孙强明 作品数:114 被引量:280 H指数:7 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 云南省自然科学基金 国家自然科学基金 云南省社会发展科技计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
CpG ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性分析 2016年 目的评价Cp G ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性,以评估IMB-AC5佐剂的应用前景。方法利用市售的单铝佐剂乙型肝炎疫苗,根据相同配比加入3种Cp G ODN(IMB-AC5及Coley 7909和Dynavax 1018),作为实验组(V-AC5、V-7909和V-1018),并以乙型肝炎疫苗为对照组,分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后2、4、6、8周,经尾静脉采血,第10周处死小鼠采集全血,分离血清,采用乙肝表面抗体试剂盒检测anti-HBs抗体水平,ELISA法检测Ig G1/2a亚型抗体比例;ELISPOT法检测小鼠脾细胞IFNγ表达水平。结果免疫后0~4周内,各组小鼠血清抗体水平均无明显变化,第6周开始呈明显上升趋势,至第8周后趋于平缓;各实验组抗体水平均明显高于对照组(P〈0.05),V-AC5显示出与V-7909同样良好的体液免疫效果,略优于V-1018。免疫后各实验组小鼠血清中Ig G2a/Ig G1比例明显高于对照组。各实验组小鼠脾细胞斑点数明显高于对照组(P〈0.05);V-AC5斑点数介于其他两个实验组之间。结论 IMB-AC5佐剂能显著活化B细胞产生抗体并具有刺激细胞免疫的效果,可增强疫苗的免疫原性。 赵玉娇 蔡路奎 王晓丹 席珏敏 陈俊英 潘玥 邱丽娟 姜黎明 孙强明关键词:CPG ODN 佐剂 乙型肝炎疫苗 免疫原性 登革病毒通过IL-10非依赖性方式抑制NOS2表达介导抗体依赖增强感染 登革热病毒(DENV)是一种蚊媒病毒,在超过100多个国家中,尤其是亚洲和拉丁美洲,引起了巨大的公共卫生问题.据估计,每年有超过5000万人感染登革热病毒.一般认为登革热病毒感染的抗体增强效应(ADE)参与登革出血热(D... 黄新伟 李多 赵玉娇 孙强明关键词:登革热病毒 NOS2 一种登革3型病毒E蛋白在293F细胞中的高分泌表达方法 本发明涉及一种登革3型病毒E蛋白在293F细胞中的高分泌表达方法,所述表达方法包括的质粒优化步骤中,优化后的质粒序列为SEQ ID NO.2。所述优化后的质粒序列添加在pSectag2A载体的Kpn1和Not1两个酶切位... 孙强明 索家乐 闫玲梅 潘玥 吴正存人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-6融合蛋白及构建方法 本发明是人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-6融合蛋白及构建方法。融合蛋白为:GM-CSF(9-127)-IL-6(29-184),GM-CSF(9-127)-IL-6(1-184)GM-CSF(1-127)-I... 孙强明 戴长柏 徐维明 孙茂盛 李亮助 李鸿钊 刘红岩 谢天宏文献传递 一种四级生物安全实验室病毒化学淋浴消毒验证方法 本发明公开了一种四级生物安全实验室病毒化学淋浴消毒验证方法,包括如下步骤:(1)病毒原液制备;(2)病毒载体的制备:取适量事先配制好的粘附基质加至1.5*1.5cm的正方形载体上,后再加100ul上述病毒原液至表面,然后... 王云川 郑吟秋 李静美 朱凡丽 杨梦莉 孙强明文献传递 一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒 本发明涉及一种I-IV型登革热病毒的通用检测试剂盒,属于病毒检测技术领域。该试剂盒包括酶标记板、阴性对照血清、阳性对照NS1重组蛋白、检测抗体、显色底物和终止液。所述酶标记板上的包被抗体为DV14抗体,检测抗体为连接了生... 孙强明 李多 王晓丹 潘玥 陈俊英 席珏敏 黄新伟 赵玉娇 邱丽娟 姜黎明文献传递 HIV介导的细胞凋亡 被引量:1 2002年 孙强明 徐维明 戴长柏关键词:HIV感染 病毒蛋白 细胞因子 细胞凋亡 介导 云南特色中药臭灵丹体外抗甲型H1N1流感病毒的实验研究 被引量:7 2015年 臭灵丹Laggera pterodonta,一种民间常用的治疗感冒的具有民俗特色的中药。为了检测臭灵丹不同溶剂萃取物对甲型H1N1流感病毒在体外的中和杀伤作用和增殖抑制作用,本研究采用中和抑制实验和增殖抑制实验,用狗肾传代MDCK细胞培养法观察臭灵丹萃取物抑制甲型H1N1流感病毒的致细胞病变作用(CPE),观察2种实验中臭灵丹萃取物在体外对甲型H1N1流感病毒血凝效价的影响,同时采用Real time RT-PCR定量检测流感病毒的拷贝数,比较臭灵丹不同溶剂萃取物对甲型H1N1流感病毒在体外增殖的影响。结果显示,臭灵丹乙酸乙酯萃取物及石油醚萃取物作用72 h后,中和实验组H1N1病毒血凝效价下降了8倍,而增殖抑制组,H1N1病毒血凝效价也分别下降了2倍和4倍;Real time RT-PCR的检测结果表明,臭灵丹乙酸乙酯萃取物中和H1N1病毒的抑制率为72.5%,而增殖抑制组的抑制率为25.3%,石油醚萃取物中和H1N1病毒的抑制率为60.2%,增殖抑制组为81.4%。由此可以得出,臭灵丹乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物在体外对甲型H1N1流感病毒有明显的中和作用及直接的抑制增殖作用。 夏晓玲 孙强明 王晓丹 赵玉娇 杨子峰 黄庆晖 姜志宏 王新华 张荣平关键词:臭灵丹 甲型流感病毒 抗病毒药物 中草药 人survivin的克隆、在大肠杆菌中的表达及活性鉴定 被引量:4 2004年 目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子。方法应用RT-PCR的方法得到survivin的cDNA,并构建成pBV220-survivin原核表达质粒,将其导入E.coliBl21(Gold)中,诱导表达survivin蛋白。通过DEAESepharoseFastFlow离子交换柱和SephacrylS-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白。用Westernblotting检测表达产物。结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致,表达质粒在E.coliBl21(Gold)中得到高效表达,表达的survivin蛋白占总蛋白含量的30%以上,表达产物以包涵体的形式存在。通过离子交换柱和分子筛二步柱纯化及复性后获得的目的蛋白,其纯度达到95%以上。Westernblotting证明表达产物具有特异性。结论获得了较高纯度的survivin蛋白,为进一步深入研究该蛋白的细胞凋亡调控功能提供了工具。 别俊 孙茂盛 孙强明 郑建平 孙雯佳关键词:克隆 基因表达 纯化 Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法 本发明提供一种Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒基因拷贝数的绝对定量检测方法,通过Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒的接种培养,再构建Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒标准品质粒,参照所得Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒前膜蛋白区目的基因序列设计下列Ⅱ型、Ⅲ型登革病毒荧光定量PCR... 孙强明 黄新伟 席珏敏 赵玉娇 潘玥 陈俊英 王晓丹 李多 邱丽娟 姜黎明文献传递