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吕琦: 作品数：28 被引量：93H指数：5; 供职机构：云南大学生命科学学院更多>>; 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金云南省教育厅科学研究基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程农业科学更多>>

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人白血病抑制因子真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达被引量：1: 2006年; 应用RT-PCR方法从人子宫内膜组织总RNA扩增出hLIF的全长基因,然后将其克隆至pcDNA3上,成功构建了重组真核表达载体pcDNA3/hLIF.利用脂质体介导将这一表达载体导入COS-7细胞和CHO-K1细胞,分别获得了hLIF的瞬时表达和稳定表达,为进一步进行hLIF生物学功能研究和hLIF在哺乳动物细胞中的高表达研究奠定了基础.; 马涛肖雪吕琦王泽华马岚; 关键词：COS-7细胞 CHO-K1细胞克隆基因表达

大鼠肝硬变病程中血清透明质酸的动态变化被引量：4: 2000年; 目的通过系统测定大鼠肝硬变病程中血清透明质酸 HA 的动态变化,来探讨其用于肝纤维化的测试和监控的临床价值.方法利用 CCl_4损伤 SD 大鼠造成肝硬变模型(n=6),综合分析不同时间取材的实验组和正常对照组(n=6)之间血清肝纤维化指标-血清 HA 浓度、肝组织病理改变以及 HA 在肝组织中的免疫组织化学定位.结果在大鼠肝硬变的病变发展过程中,血清 HA 含量在3(7.98 ng/mL),6(20.10 ng/mL),9(229.73 ng/mL),12(324.74 ng/mL)周时,均较正常组(0周:0.21 ng/mL)有极显著升高(P<0.01),其中9 wk 和12 wk 的血清 HA 含量比正常对照组分别高出1094和1546倍.而在0→3 wk、3→6 wk、6→9wk、9→12wk 时,血清 HA 平均增加的倍数依次为38,2.5,11.4和1.4倍.同时,肝组织病理学结果(HE 染色)显示,CCl_4诱发的肝纤维化大鼠在9 wk 以前无明显变化;9 wk～12 wk 时,与正常肝组织相比,有明显肝细胞坏死,同时伴有肝细胞质分布不均匀程度的加深及红细胞增多成团现象.此外,12 wk 组还出现明显的肝细胞气球样变性现象及局部炎症细胞浸润.同期用免疫组化法观察 HA 在不同期肝硬变大鼠肝内的分布,镜检发现只在12 wk 有少量 HA 的特异性分布.结论动态观察血清 HA 数值可用于早期肝纤维化的预测和肝纤维化的分期.; 马岚赵力生李春华吕琦李仁宽邓双胜; 关键词：透明质酸四氯化碳免疫组织化学

“Anti-UV Clone”柴胡细胞提取物对HaCaT和HepG2细胞生长的影响研究被引量：1: 2010年; 实验利用噻唑蓝比色分析法(MTT法)研究"Anti-UV Clone"柴胡细胞株不同溶剂提取物对人角质上皮细胞(HaCaT细胞)和人肝癌细胞(HepG2细胞)生长的影响.实验表明,75%乙醇提取剩余物在低浓度时对HaCaT细胞的生长具有显著的促进作用,其中以加入质量浓度为2.50mg/L时效果最好,添加后HaCaT细胞的生长速率比空白对照高(43.71±1.23)%.表明该提取物中存在促进HaCaT细胞生长的活性物质.而"Anti-UVClone"柴胡细胞株石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯提取物则都会抑制HaCaT细胞和HepG2细胞的生长.其中石油醚和乙酸乙酯提取物对HaCaT细胞生长的抑制作用最强,在加入质量浓度为7.50mg/L时对HaCaT细胞的抑制率分别达(39.70±0.61)%和(40.20±0.95)%;而石油醚提取物对HepG2细胞生长的抑制作用最强,在加入质量浓度为7.50mg/L时对HepG2细胞生长的抑制率达(44.97±1.01)%.; 范静李育中沈霏王建光吕琦张鸽夏光敏陈穗云; 关键词：提取物 HACAT细胞 HEPG2细胞 MTT

三种贝类多糖MPa.MPc和MPf药理作用的初步研究被引量：14: 1998年; 研究ＭＰａ．ＭＰｃ和ＭＰｆ，对病理造型的小白鼠，离体蛙心灌流和体外培养的肿瘤细胞及滋养层上皮细胞的作用．证实三种贝类多糖：（１）能显著降低实验性小鼠血清胆固醇含量（Ｐ＜０．０１）；（２）具有增强蛙心心肌收缩力的作用，而对收缩频率无影响；（３）明显抑制肺腺癌（ＧＬＣ）和胃癌细胞（ＳＪＣ）的生长，对正常的滋养层上皮细胞无影响．; 崔悦礼赵翠兰李开源陈静华周铭东吕琦; 关键词：药理作用胆固醇癌细胞

河蚌多糖(MPa)对巨噬细胞吞噬能力的影响与抗炎作用被引量：23: 1998年; 河蚌多糖（ＭＰａ）对小鼠灌胃（ｉｇ）给药，能显著增强腹腔巨噬细胞（ＭΦ）吞噬能力；对大鼠和小鼠ｉｐ和ｉｇ给予ＭＰａ时，分别对甲醛引起的大鼠足跖反应和二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀。; 崔悦礼李开源赵翠兰吕琦周铭东; 关键词：河蚌多糖抗炎作用中药

扶桑花醚不溶物HR-2对体外培养的人绒毛膜组织及小鼠离体子宫活动力的影响被引量：3: 1998年; 不同浓度的扶桑花醚不溶物ＨＲ－２对体外培养的人绒毛膜组织的形态、ＨＣＧ和孕酮分泌的影响．观察了ＨＲ－２对小鼠离体子宫的刺激作用及不同阻断剂对子宫活动力的影响．结果表明：１）ＨＲ－２可以明显抑制人绒毛膜组织细胞的正常生长．２）培养液中的孕酮含量随ＨＲ－２的浓度增加呈梯度下降（Ｐ＜０．０１）；而ＨＣＧ仅在高浓度时有明显降低．３）ＨＲ－２对离体的小鼠子宫有直接的兴奋作用（Ｐ＜０．０１），这种兴奋作用不被消炎痛、阿托品和心得安阻断，但可被异丙嗪完全阻断．; 江燕吕琦赵翠兰李开源崔悦礼周铭东马岚; 关键词：离体子宫 HCG

磺胺甲基嘧啶和磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体的制备和鉴定被引量：2: 2007年; 为建立磺胺类药物残留的免疫化学分析方法，利用磺胺甲基嘧啶（SM）、磺胺二甲基嘧啶（SM2）分子结构中的芳香氨基，采用重氮反应和戊二醛法将其与载体蛋白（牛血清白蛋白和鸡卵清蛋白）交联制备抗原，最终获得5株抗SM和18株抗SM2杂交瘤细胞株．对杂交瘤细胞株的核型、抗体的亚类和轻链型、抗体的异相包被ELISA反应性以及抗体的竞争反应性和交叉反应性进行了分析和评价．其中SM抗体11c8结合SM的竞争抑制质量浓度Ic50为14．1弘∥L，与类似物SD的交叉反应性接近20％，但与其他类似物低于10％．SM2抗体中的6株抗体的竞争抑制质量浓度IC50在38．8—70．0μL范围内，287，4D5，13c9，14c5和16c2抗体与类似物SM的交叉反应性达到73．5％。132．9％，而15D10抗体与SM的交叉反应性低于5％．因此，本研究所获得的磺胺甲基嘧啶和磺胺二甲基嘧啶抗体，可用于SM和SM2残留的免疫分析方法研究和应用．; 吕琦王泽华邓双胜马岚; 关键词：磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体磺胺类

抗前列腺特异性抗原单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用被引量：4: 2003年; 通过杂交瘤技术制备抗前列腺特异性抗原(PSA)单抗细胞株,共获得68株稳定分泌PSA单克隆抗体的细胞株,并对其中与总PSA(t-PSA)反应的12株进行了详细的免疫特性鉴定.; 张瑜吕琦王泽华袁航赵翠兰贾黎马以娟王永祺张远旭马岚; 关键词：前列腺特异性抗原单克隆抗体抗原表位

人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCG-β)单克隆抗体的制备及鉴定: 2003年; 为了获得抗人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCG-β)单克隆抗体,以hCG为免疫原,经细胞融合和有限稀释后,得到4株分泌抗hCG-β单克隆抗体(McAb)细胞株.酶联免疫吸附测定(ELISA)结果表明,所得抗体均为IgG1,κ型,其腹水效价均可达10-6.; 肖雪吕琦马岚; 关键词：单克隆抗体酶联免疫吸附测定

表达肿瘤抗原HPV-58E7的HLA-A^＊0201阳性宫颈癌细胞模型的构建和鉴定: 2015年; 为建立内源性表达58型人乳头瘤病毒(Huamn papillomavirus type 58,HPV-58)重要癌抗原E7蛋白的HLA-A*0201阳性人宫颈癌细胞模型.以HPV-58全基因组为模板,采用PCR法扩增E7蛋白的编码基因,构建真核表达载体p EGFP-N2-HPV58E7;转化大肠杆菌DH5α,通过DNA测序鉴定质粒载体;经除内毒素纯化后,将大量制备的重组质粒瞬时转染293T细胞,采用RT-PCR和细胞免疫荧光方法研究重组质粒在人源细胞中的表达情况;最后,选择HPV检出阴性的HLA-A*0201阳性人宫颈癌C33A细胞株为宿主细胞,采用脂质体转染、G418抗性加压筛选和细胞克隆化培养技术,建立能够稳定表达HPV-58 E7的恒定转染细胞株.采用RT-PCR、Western-blot和细胞增殖测定等方法从转录、翻译和表型等3个层次对所建细胞株进行鉴定研究.研究结果显示:克隆制备了HPV-58 E7蛋白的编码基因;构建获得了能够在人源细胞中表达HPV58E7-EGFP融合蛋白的真核表达质粒;并成功建立了能够稳定表达HPV-58 E7的HLA-A*0201阳性人宫颈癌细胞模型;核酸和蛋白水平的鉴定结果表明所建模型细胞能够表达HPV-58 E7癌抗原,宿主细胞本身表达的Ⅰ类组织相容性抗原HLA-A*0201有望通过内源性抗原加工途径将E7抗原的细胞毒性T细胞(Cytotoxic lyphocyte,CTL)表位提呈到细胞表面;另外,细胞增殖试验结果亦表明该细胞模型体现出E7蛋白显著的诱导细胞增殖的生物学特征.总之,能够稳定表达HPV-58 E7癌蛋白的HLA-A*0201阳性人宫颈癌细胞模型的建立为后续即将展开的以HPV-58 E7为靶标的宫颈癌治疗性疫苗和药物的寻找和研究奠定基础.; 林洁李旋吕琦童亮张士煜邓双胜

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