吕猛
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 东亚钳蝎毒素BmαTX14的基因组克隆、真核表达纯化及其功能的初步研究
- 蝎毒素是一类由20-90个氨基酸构成的小分子多肽。这类小肽一般含3或4对二硫键,可以选择性地与动物可兴奋细胞膜上的钠、钾、钙、氯离子通道结合,影响离子通道的状态,成为研究离子通道生理作用和功能定位的重要工具之一。此外,在...
- 吕猛
- 关键词:东亚钳蝎蝎毒素毕赤酵母真核表达
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- 东亚钳蝎短链K^+通道毒素BmP05基因多态性分析
- 2005年
- 基于从东亚钳蝎中鉴定的低电导Ca2+激活K+通道毒素BmP05的蛋白质和前体核苷酸序列,采用5′和3′RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术,成功地从东亚钳蝎毒腺组织中分离到了一系列与BmP05前体核苷酸序列高同源性的cDNA序列.它们含有完整开放阅读框(openreadingframe,ORF),彼此同源性很高,有的突变导致编码不同氨基酸,有的只是沉默突变.基因组克隆结果进一步显示,尽管来源不同个体蝎的BmP05基因组的结构相同,但它们的基因组序列并不完全一致,在第二个外显子和内含子区域发生许多突变.BmP05在cDNA水平的多态性与其在基因组水平的多态性一致.所有结果表明,东亚钳蝎的毒素基因存在个体多态性.
- 刘辉曹志贱吕猛徐秀玲吴英亮毛歆蒋达和李文鑫
- 关键词:东亚钳蝎蝎毒素多态性
- 东亚钳蝎毒素BmαTX14的基因组克隆、真核表达纯化及功能的初步研究被引量:5
- 2005年
- 以东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch,BmK)BmαTX14全长cDNA序列设计引物,克隆BmαTX14成熟肽,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K中,转化酵母,诱导表达。Tricine-SDS-PAGE和Westernblot分析显示,表达产物以可溶性分子形式存在于培养上清中,诱导84h时的表达量达到高峰,约为120mgL。通过Ni金属螯合层析柱亲和层析、聚乙二醇沉淀、凝胶分子筛层析获得纯化的rBmαTX14融合蛋白,经毒性实验表明,具有明显的抗昆虫活性。同时以蝎基因组总DNA为模板进行PCR扩增,得到BmαTX14基因克隆,序列分析显示:BmαTX14在编码信号肽的基因序列中有1个长408bp的内含子,其基因组织结构具有α型Na+通道毒素的特征。从功能活性和基因组织结构两个角度证实BmαTX14为α型Na+通道毒素。
- 吕猛王昆曹志贱蒋达和毛歆李文鑫
- 关键词:蝎毒素毕赤酵母真核表达
- 一种新的蝎毒素BmTXKβ的基因组结构及分析被引量:4
- 2003年
- 根据从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺cDNA文库中筛选得到的长链钾离子通道毒素BmTXKβ基因序列设计引物 ,采用Vectorette方法克隆其 5′及 3′侧翼区。结果表明 :BmTXKβ在编码信号肽的基因序列中有一大于 997bp的内含子 ,并且其成熟肽中也有一个 886bp内含子 ,而目前已知的其他蝎毒素只在信号肽中有一个内含子或没有内含子。
- 肖帆曹志贱吕猛蒋达和毛歆刘辉李文鑫
- 关键词:东亚钳蝎