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TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达被引量：1: 2008年; 目的:构建携带绿色荧光蛋白的TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒表达载体,转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)。方法:设计含有GM-CSF信号肽序列和BglⅡ及HindⅢ酶切位点的引物,PCR扩增TNFα-Tumstatin,将扩增产物亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组。筛选获得含有融合基因的重组腺病毒质粒,酶切鉴定并测序。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,经过包装、扩增后感染hUCMSCs并检测细胞内融合基因的表达。结果:重组腺病毒质粒经PCR和PacⅠ酶切鉴定,证实含有TNFα-Tumstatin融合基因,测序结果和设计片段的序列一致。重组腺病毒感染的hUCMSCs表达绿色荧光蛋白和融合基因。结论:成功构建了TNFα-Tumstatin融合基因的腺病毒表达载体,能高效率感染hUCMSCs,为进一步研究融合基因修饰的hUCMSCs抗肿瘤效应奠定了基础。; 周忠海许文荣朱伟乔纯王兴忠陈圆司煜安徐静周洪兴张蕾蕾李继刚钱晖; 关键词：腺病毒载体融合基因细胞转染

浅论甲状腺功能检查在对孕妇进行孕期监测中的应用价值被引量：4: 2017年; 目的:探讨甲状腺功能检查在对孕妇进行孕期监测中的应用价值。方法:对2013年9月至2016年1月期间在江阴市人民医院进行定期产检的2000例孕妇的临床资料进行回顾性研究。将其中1000例接受孕期甲状腺功能检查的孕妇设为试验组,将其中1000例未接受孕期甲状腺功能检查的孕妇设为参照组。观察并记录试验组孕妇游离甲状腺素、促甲状腺素、游离三碘甲腺原氨酸、甲状腺过氧化物酶抗体的水平及其甲状腺疾病的检出率,同时比较两组孕妇的妊娠结局。结果:1)试验组孕妇游离甲状腺素的平均水平为(14.52±6.56)pmol/L、促甲状腺素的平均水平为(3.01±1.59)u IU/mL、游离三碘甲腺原氨酸的平均水平为(5.53±2.04)pmol/L、甲状腺过氧化物酶抗体的平均水平为(7.52±3.56)IU/mL。2)对试验组孕妇进行甲状腺功能检查的结果显示,其中有甲状腺功能亢进孕妇42例,甲状腺功能减退孕妇27例,桥本氏甲状腺炎孕妇13例。其甲状腺疾病的检出率为8.2%。3)试验组孕妇新生儿畸形的发生率、胎膜早破的发生率、妊娠期高血压的发生率、胎儿窘迫的发生率、死胎的发生率及新生儿死亡的发生率均低于参照组孕妇,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对孕妇进行甲状腺功能检查,能明确其是否患有甲状腺疾病,这对其甲状腺疾病的早期治疗和妊娠结局的改善均具有重要的意义。; 司煜安; 关键词：甲状腺功能检查孕期监测

慢病毒转染人骨髓间质干细胞研究被引量：3: 2008年; 目的:分离培养人骨髓来源间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行慢病毒载体介导的基因转染研究。方法:采取全骨髓贴壁培养法分离培养人骨髓MSCs。利用脂质体法进行慢病毒感染人骨髓MSCs。结果:分离培养出人骨髓来源的MSCs,并用携带绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的慢病毒成功感染人骨髓MSCs。结论:获得人骨髓MSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为间质干细胞基因工程和组织工程研究奠定了基础。; 张徐钱晖朱伟曹慧玲徐学静司煜安王梅许文荣; 关键词：间质干细胞慢病毒转染

微小RNA-1表达水平与高血压左心室肥厚的关系被引量：1: 2017年; 目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)与高血压左心室肥厚的相关性。方法选取50例高血压患者及50例高血压左心室肥厚患者,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血浆中miRNA-1表达水平,分析miRNA-1表达水平与左心室相关指标的相关性,应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价miRNA-1对高血压左心室肥厚的预测价值。结果高血压左心室心肥厚组室间隔厚度、左心室壁厚度、左心室舒张末期内径、左心室质量指数及miRNA-1表达水平均显著高于高血压组,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-1表达水平与室间隔厚度(r=0.382,P=0.002)、左心室壁厚度(r=0.411,P=0.001)、左心室舒张末期内径(r=0.285,P=0.023)、左心室质量指数(r=0.492,P=0.000)呈正相关。miRNA-1预测高血压左心室肥厚的ROC曲线下面积为0.937(95%CI:0.875~0.962,P<0.05)。结论 miRNA-1表达与高血压左心室肥厚发生、发展密切相关,miRNA-1可能是高血压左心室肥厚特异性诊断的潜在标志物。; 司煜安; 关键词：高血压微小RNA-1 左心室肥厚

血清PCT、CRP、NLR对病毒性、细菌性上呼吸道感染鉴别诊断价值的研究被引量：4: 2023年; 目的:分析血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对病毒性、细菌性上呼吸道感染(URTI)的鉴别诊断价值。方法:选取2021年7月至2022年7月江阴市人民医院门诊接诊的152例URTI患者,根据感染类型分为细菌性URTI组(80例)、病毒性URTI组(72例)。另选取同期在江阴市人民医院门诊体检中心接受体检的80例健康体检者,将其设为健康组。三组均进行血清PCT、CRP、NLR检测,比较三组的血清PCT、CRP、NLR水平、PCT、CRP阳性率及NLR高表达率。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,比较PCT、CRP、NLR单独与联合检测对细菌性URTI、病毒性URTI的诊断效能。结果:细菌性URTI组的血清PCT、CRP、NLR水平均高于病毒性URTI组、健康组,P<0.05。细菌性URTI组的PCT阳性率(53.75%)、CRP阳性率(65.00%)、NLR高表达率(63.75%)均高于病毒性URTI组(34.72%、31.94%、41.67%)、健康组(1.25%、1.25%、7.50%),P<0.05。PCT、CRP、NLR联合检测诊断细菌性URTI的灵敏度(94.2%)、特异度(91.7%)均高于PCT、CRP、NLR单独检测(82.1%、85.2%;83.4%、84.2%;84.1%、82.7%),P<0.05。PCT、CRP、NLR联合检测诊断病毒性URTI的灵敏度(95.1%)、特异度(92.2%)均高于PCT、CRP、NLR单独检测(81.6%、84.3%;82.9%、85.5%;83.1%、81.7%),P<0.05。结论:血清PCT、CRP、NLR检测可辅助鉴别URTI类型,细菌性URTI患者血清PCT、CRP、NLR的表达量、PCT、CRP的阳性率及NLR的高表达率相对较高。PCT、CRP、NLR联合检测可提高对URTI类型的诊断效能。; 司煜安怀昱洁曹励强; 关键词：病毒性感染细菌性感染

TNFα-Tumstatin融合基因的重组腺病毒载体构建及其表达与检测: 目的:构建带EGFP的TNFα-Tumstatin融合基因的真核表达载体,并探讨该载体在真核细胞如骨髓 MSCs中的表达效率。方法:采用PCR技术从质粒PBV220-TNFα-Tumstatin扩增融合基因,插入pAdt...; 王兴忠乔纯杨欢周洪兴司煜安徐静周忠海钱晖许文荣; 关键词：TNFΑ TUMSTATIN 腺病毒骨髓间质干细胞; 文献传递

体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞被引量：4: 2008年; 目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞。方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob lastgrowth factor,bFGF)及CC l4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志。结果:在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alphafetal prote in,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-d ioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuc lear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性。与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO。结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CC l4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源。; 司煜安许文荣严永敏钱晖朱伟周忠海徐静周洪兴曹慧玲李继刚; 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞细胞分化

人骨髓间质干细胞ING4基因的克隆及其慢病毒表达载体构建: 2007年; 目的:克隆人骨髓间质干细胞ING4(inhibitor of growth famility,member4)基因,构建其慢病毒表达载体PNL-ING4。方法:提取人骨髓间质干细胞(hMSCs)总RNA,经RT-PCR扩增出ING4cDNA,克隆至PMD19-T载体,选择阳性克隆进行酶切鉴定和测序,构建慢病毒表达载体PNL-ING4,用双酶切、基因测序进行鉴定。结果:RT-PCR产物为750 bp的条带,双酶切和基因测序正确。结论:成功从hMSCs克隆了ING4基因并成功构建其慢病毒表达载体PNL-ING4,为进一步研究ING4基因的作用与抗肿瘤机制奠定了基础。; 张蕾蕾许文荣乔纯钱晖朱伟李继刚周洪兴司煜安周宗海阴晴; 关键词：ING4 慢病毒表达载体人骨髓间质干细胞克隆

腺病毒介导的RNA干扰技术抑制肿瘤细胞Nucleostemin表达的初步研究: 目的:研究RNAi效应对肿瘤细胞中Nucleostemin基因的干扰抑制,达到较好的抗肿瘤生长及抗肿瘤转移的目的。方法:体外化学合成针对Nucleostemin基因的小干扰RNA片断(siRNA)P1P2．P3P4,设计...; 徐静许文荣韩崇旭乔纯王兴忠杨欢周洪兴司煜安周忠海; 文献传递

下肢骨折患者血浆中纤维蛋白原和D-二聚体检测结果分析被引量：4: 2010年; 目的探讨血浆中纤维蛋白原(FIB)及D-二聚体(D-dimerDD)检测对下肢骨折并发深静脉血栓(DVT)的早期诊断价值。方法对90例下肢骨折患者术前及术后第3天进行血浆中FIB及DD的定量检测,并与正常对照组(90例)比较。结果骨折患者术前术后3d的血浆中FIB和DD均高于对照组(P<0.01);90例患者有10例并发DVT,并发DVT组术前、术后第3天血浆中FIB及DD的检测结果差异有统计学意义(P<0.05)。未并发DVT组术前、术后第3天血浆中FIB及DD的检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。而并发DVT组与未并发DVT组相比较,术前血浆中FIB及DD的检测结果差异无统计学意义(P>0.05);术后第3天血浆中FIB及DD的检测结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论血浆中FIB及DD的动态监测对下肢骨折并发DVT具有早期诊断价值。; 王奔放司煜安周剑波; 关键词：下肢骨折纤维蛋白原 D-二聚体

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