包龙龙
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- hSulf-1基因腺病毒表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖、迁移能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的构建携带人硫酸酯酶1基因(hSulf-1)的腺病毒载体,研究其对于人脐静脉内皮细胞ECV-304增殖、迁移能力的影响。方法通过基因操作技术将hSulf-1基因插入到腺病毒基因组中,构建重组腺病毒Ad5-hSulf1;应用蛋白质免疫印迹法检测hSulf-1蛋白在ECV-304细胞中的表达及细胞内磷酸化Akt、ERK的表达变化;MTT实验检测hSulf-1过表达对于ECV-304细胞增殖的影响;采用划痕实验研究hSulf-1过表达对于ECV-304细胞迁移的影响。结果成功构建携带目的基因hSulf-1的腺病毒载体;免疫印迹结果表明hSulf1基因过表达会下调ECV-304细胞Akt和ERK信号分子的磷酸化水平;细胞增殖实验结果表明hSulf1基因过表达抑制了ECV-304细胞增殖,感染复数为50、100时细胞存活率下降至(68.49±0.05)%以及(67.78±0.06)%(P<0.05);划痕实验结果表明hSulf1基因过表达能够抑制细胞的迁移,相比于对照组细胞迁移能力减弱(P<0.01)。结论重组腺病毒Ad5-hSulf1介导的hSulf-1基因在ECV-304细胞中的过表达明显抑制细胞增殖及迁移,为hSulf-1用于肿瘤及血管生长相关疾病的基因治疗奠定了基础。
- 季卫丹包龙龙严妍曹璐傅晓辉姜小清苏长青
- 关键词：腺病毒血管内皮细胞细胞增殖细胞运动
- 细胞微环境microRNAs在肿瘤侵袭转移中的作用被引量：1
- 2012年
- 肿瘤微环境是肿瘤发生、发展的重要组成成分,微环境中microRNAs作为原癌基因或抑癌基因能够进入靶细胞,调控相关靶基因的表达和功能,从而影响微环境的构成,并在肿瘤细胞侵袭和转移中发挥重要作用。因此,microRNAs在肿瘤诊断治疗中具有诱人的应用前景。
- 包龙龙苏长青
- 关键词：微环境微小RNA肿瘤
- hSulf-1过表达提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨人硫酸酯酶-1(human sulfatase 1,hSulf-1)基因过表达是否提高乳腺癌MCF-7细胞对PARP抑制剂AZD2281的敏感性。方法:采用不同浓度AZD2281处理细胞,并筛选AZD2281处理的最佳浓度。将携hSulf-1基因的重组腺病毒Ad5-hSulf1感染MCF-7细胞,以Ad-hSulf1和AZD2281单独或联合处理MCF-7细胞,以Ad5-EGFP处理为对照。采用流式细胞术检测细胞周期,克隆形成实验检测细胞克隆形成率,Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的表达,Transwell法、MTT法分别检测细胞的迁移及增殖。结果:AZD2281浓度为7μmol/L时对MCF-7细胞的抑制作用趋于峰值,用于后续实验。Ad5-hSulf1+AZD2281联合处理与AZD2281单独处理相比,MCF-7细胞的G2/M期细胞比例明显增多[(22.15±0.17)%vs(17.44±0.57)%,P<0.01],细胞克隆形成率[(21.43±1.52)%vs(49.43±1.44)%,P<0.01]及细胞周期蛋白CDK4的表达[(0.67±0.02)vs(0.72±0.02),P<0.05]、AKT的磷酸化水平[(0.17±0.003)vs(0.42±0.02),P<0.01]均明显降低,同时细胞的增殖率和迁移能力也有明显下降[(57.69±4.83)%vs(79.35±5.44)%;(10.33±1.53)个vs(50.67±2.31)个,均P<0.01]。结论:hSulf-1过表达可明显提高乳腺癌细胞MCF-7对AZD2281的化疗敏感性,阻滞细胞周期于G2/M期,并更明显地抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,这一效应可能是通过调节细胞周期蛋白CDK4及AKT通路产生的。
- 徐高亚季卫丹严妍包龙龙沈舒文顾蕾傅晓辉姜小清苏长青吴孟超
- 关键词：乳腺癌MCF-7细胞周期蛋白化疗敏感性
- miR-21调控肝癌细胞增殖转移分子机制的研究
- microRNAs/(miRNAs/)是一类进化上高度保守的内源性非编码小分子RNA，它能够结合于靶基因mRNA的3、-UTR区域，阻遏靶基因的翻译，从而抑制基因表达。miRNAs在许多病理、生理过程中，包括癌症发生及癌...
- 包龙龙
- 关键词：肝细胞癌MIRNAS上皮间质转化细胞增殖细胞迁移细胞侵袭
- 文献传递
- MiR-21通过AKT/ERK途径对肝癌BEL-7402细胞增殖和迁移的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对人肝癌BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green luorescent protein,EGFP)基因的miR-21表达载体pGL3-miR21-EGFP瞬时转染BEL-7402细胞,实时荧光定量-PCR检测细胞中miR-21的表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中磷酸化蛋白激酶B[phospho-protein kinase B,p-PKB(又称p-AKT)]、磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)的表达,MTT法检测miR-21过表达对BEL-7402细胞增殖的影响,细胞划痕和Transwell小室法检测miR-21过表达对BEL-7402细胞迁移和侵袭能力的影响。将pGenesil-shAKT载体转染BEL-7402细胞,实时荧光定量PCR检测细胞中miR-21的表达,蛋白质印迹法检测细胞中AKT和p-AKT的表达水平,MTT法和细胞划痕实验检测pGenesil-shAKT对BEL-7402细胞增殖和迁移的影响。结果:与空白对照组(未转染质粒的BEL-7402细胞)相比,pGL3-miR21-EGFP转染后,BEL-7402细胞中miR-21的表达水平明显上调(P<0.01),p-AKT和p-ERK的表达水平同时上调(P<0.05);与空白对照组相比,miR-21的过表达明显促进了BEL-7402细胞的增殖、迁移和侵袭的能力(P<0.05)。pGenesil-shAKT转染BEL-7402细胞后,伴随着AKT和p-AKT表达水平的下调,细胞的增殖和迁移能力均明显下降(P<0.05),而细胞中miR-21的表达水平无明显变化。结论:MiR-21可能通过AKT/ERK信号通路促进BEL-7402细胞的增殖和迁移。
- 包龙龙严妍季卫丹沈舒文吴孟超苏长青
- 关键词：细胞增殖细胞运动肿瘤侵润微RNAS
