刘玲珑 作品数:16 被引量:338 H指数:8 供职机构: 南京农业大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1的原核表达、纯化及鉴定 被引量:19 2008年 脂氧合酶是动植物体内催化脂质降解的关键酶,也是茉莉酸合成途径的第一个关键酶。以先前克隆到的水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到大肠杆菌表达载体pET30a(+)上并转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。经过20℃条件下的IPTG诱导,OsLOX1重组蛋白在BL21(DE3)菌株中得到表达,经生化特性分析,发现该重组蛋白具有LOX催化活性,其最适pH和温度分别为4.8和30℃。该重组子可进一步应用于体外生产茉莉酸和研究植物种子LOX结构与功能的关系。 汪仁 沈文飚 江玲 刘玲珑 翟虎渠 万建民关键词:水稻种子 脂氧合酶 原核表达 纯化 稻米脂肪与米粉RVA谱特征的关系分析 被引量:7 2009年 应用水稻新品系W1721和大面积应用的杂交粳稻恢复系轮回422构建了重组自交系群体,分析了稻米脂肪与米粉RVA谱特征间的关系。结果表明,脱脂米粉的峰值黏度和热浆黏度都显著高于未脱脂米粉,冷胶黏度也表现同样的趋势,说明脱脂后米粉的黏度显著上升;峰值黏度、热浆黏度、冷胶黏度与脂肪含量都分别存在着极显著的负线性关系,其线性变异的成分分别占10.05%、16.19%、27.53%,说明脂肪含量升高,米粉黏度下降。本研究从正反两方面取得了一致的结果,提示脂肪对食味品质的影响主要是通过脂肪的润滑作用降低黏度来实现的。 吴洪恺 刘世家 张文伟 刘玲珑 赵志刚关键词:稻米 脂肪 RVA谱 巨胚水稻W025糙米浸水后γ-氨基丁酸含量变化的研究 被引量:46 2005年 富含γ-氨基丁酸(GABA)的降血压功能水稻正受到越来越多的关注。W025是通过化学诱变和杂交选育而成的水稻新品系,具有巨胚特征,遗传分析表明巨胚基因受单隐性基因控制。进一步研究W025和其原始品种金南风浸水后γ-氨基丁酸(GABA)含量及其合成关键酶———谷氨酸脱羧酶活性的动态,并用半定量RT-PCR检测了2个谷氨酸脱羧酶转录本在浸水过程的表达变化。结果表明,(1)GABA主要集中在胚部,浸水后W025的GABA积累量显著高于金南风。(2)随着浸水时间延长,谷氨酸脱羧酶(GAD)的活性呈逐渐增加趋势,W025胚部的酶活性显著高于金南风。GAD活性的变化与GABA的积累呈显著正相关,表明浸水后种胚GABA的积累与谷氨酸脱羧酶的催化反应有关。(3)2个谷氨酸脱羧酶基因OsGAD1与OsGAD2在W025和金南风之间没有转录水平的差异。提示可能存在其他的谷氨酸脱羧酶基因对浸水后GABA的积累起关键作用。 刘玲珑 江玲 刘世家 周时荣 张文伟 王春明 陈亮明 翟虎渠 万建民关键词:水稻 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶 水稻白条纹叶Gws基因的精细定位与遗传分析 被引量:24 2010年 叶色突变是一类十分明显的性状突变,在高等植物的叶绿素合成、叶绿体结构、功能、遗传、分化与发育等基础研究中均具有重要意义。到目前为止,已鉴定多个重要的水稻功能基因,据不完全统计,水稻中至少已定位了79个叶色突变位点,并已成功克隆出多个叶色相关基因,其中OsCHLH、OsCAO1、OsCAO2、chlorina1、chlorina9、ygl等直接参与编码叶绿素合成,其余基因均参与叶绿体发育调控。在日本晴(Nipponbare)T-DNA插入突变体库中筛选到一份对温度敏感的白条纹突变体gws(green-white-stripe),遗传分析表明它来自组织培养过程中的单隐性基因突变。利用gws与培矮64杂交组合的F2代群体,将Gws精细定位于第6染色体标记InDel15和InDel16之间,物理距离为73kb,此区间内包含13个基因。基因组序列分析发现,突变体在核糖核苷二磷酸还原酶小亚基(ribonucleoside-diphosphate reductase small chain,RNRS1)编码区第314~315碱基发生缺失,第316~317碱基由GC变为TT,导致该基因阅读框移码突变,蛋白质翻译提前终止。该基因是已经报道的水稻白条纹叶基因St1(Stripe1)的等位基因,gws突变体较st1突变体的白条纹出现早且明显,gws白条纹表型出现在第2片叶之后,而st1的白条纹表型仅出现在第4或5片叶之后。 许凤华 程治军 王久林 吴自明 孙伟 张欣 雷财林 王洁 吴赴清 郭秀平 刘玲珑 万建民关键词:水稻 突变体 叶绿素 稻米浸水后γ-氨基丁酸(GABA)的积累及其分子机制研究 环境污染,饮食结构不合理,快节奏生活方式,社会老龄化等导致的“三高”疾病已经成为我国人群致死、致残的主要原因之一。采用药物疗法存在长期用药易产生药物依赖及副作用大的缺点,给患者带来极大心理和经济压力。通过研究和开发具有调... 刘玲珑关键词:稻米 Γ-氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶 一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法 本发明为一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法,属于水稻育种领域。以W3660为母本、镇稻88为父本杂交,F<Sub>2</Sub>代开始,选择植株主穗12粒稻米中全蛋白的SDS-PAGE蛋白带型与W3660... 万建民 江玲 刘世家 王益华 张迎信 刘喜 陈亮明 赵志刚 刘玲珑 张文伟 翟虎渠文献传递 应用近红外光谱技术分析稻米蛋白质含量 被引量:56 2006年 以稻谷、米粒、米粉3种形态的样品,应用近红外光谱技术(NIRS)和偏最小二阶乘法(PLS),建立了6个稻米蛋白质含量近红外光谱数学模型,并对模型预测结果的准确性进行了评价。结果表明,糙米蛋白质含量的稻谷、糙米粒和糙米粉近红外光谱预测模型校正决定系数(RC2)分别为0.893、0.971和0.987,校正标准差(RMSEC)分别为0.507、0.259和0.183;精米蛋白质含量的稻谷、精米粒和精米粉近红外光谱预测模型R2C分别为0.897、0.984和0.986,RMSEC分别为0.4970、.186和0.190。模型内部交叉验证分析表明,预测糙米蛋白含量的稻谷、糙米粒和糙米粉模型内部交叉验证决定系数(RCV2)分别为0.865、0.962和0.984,内部验证标准差(RMSECV)分别为0.557、0.290和0.205;预测精米蛋白含量的稻谷、精米粒和精米粉的模型RCV2分别为0.845、0.951和0.979,RMSECV分别为0.5940、.316和0.233。模型外部验证分析表明,预测糙米蛋白含量的稻谷、糙米粒和糙米粉近红外光谱模型外部验证决定系数(RV2)分别为0.683、0.801和0.939,外部验证标准差(RMSEV)为0.962、0.799和0.434;预测精米蛋白含量的稻谷、精米粒和精米粉近红外光谱的模型RV2分别为0.673、0.921和0.959,RMSEV为0.976、0.513和0.344。用米粉建立的近红外光谱预测模型准确性最高,米粒次之,基于稻谷的预测模型准确性相对较低;内部交叉验证和外部验证表明,近红外光谱分析技术与化学分析方法一致性较好,且能保证样品的完整性,在水稻优质育种和稻米品质分析中具有广泛的应用价值。 毕京翠 张文伟 肖应辉 王海莲 江玲 刘玲珑 万向元 翟虎渠 万建民关键词:水稻 蛋白含量 近红外光谱技术 水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫中的作用 被引量:10 2008年 LOX3是主要的水稻种胚脂氧合酶同工酶。为了研究水稻LOX3基因在逆境胁迫中的作用,构建了LOX3基因的反义植物表达载体,用农杆菌介导法转化水稻品种武运粳7号和Kasalath,获得了转基因植株。PCR和Southern鉴定证实基因已经导入水稻基因组中,种胚LOX3缺失鉴定和半定量RT-PCR分析证实反义RNA抑制了LOX3基因的表达。对T2代转基因植株进行了水分胁迫处理及稻瘟病和白叶枯病的接种鉴定。结果显示,与非转基因对照相比,反义LOX3转基因植株对水分胁迫、稻瘟病和白叶枯病都表现敏感,说明水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫反应中发挥一定的作用。 刘南南 江玲 张文伟 刘玲珑 翟虎渠 万建民关键词:水稻 反义RNA 转基因植株 逆境胁迫 完善我国野生动物刑事物证鉴定体系的思考 被引量:7 2005年 目前,我国还没有一部全面规范野生动物司法鉴定工作的法规,致使野生动物刑事物证鉴定工作存在许多问题或缺陷。本文就目前野生动物刑事物证鉴定机构的设置、鉴定人资格的认定、鉴定的技术方法、鉴定程序等方面存在的问题进行讨论,并提出了相应解决措施。 黄娅琳 刘玲珑关键词:野生动物 刑事物证 软米水稻低直链淀粉含量基因位点的分子标记方法 本发明提供了云南软米水稻品种毫屁低直链淀粉含量基因位点的分子标记方法,属于分子遗传学领域。用标记引物dCAPs-SalI-hp扩增云南软米水稻品种毫屁的DNA,然后用SalI限制性内切酶酶切,如果能得到151bp和145... 万建民 马晓东 江玲 刘玲珑 张文伟 刘世家 刘喜 陈亮明 翟虎渠文献传递