刘晔
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠肾脏缺血再灌注损伤后自噬的初步研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究大鼠肾脏缺血再灌注(I/R)损伤后自噬溶酶体相关蛋白随损伤时间表达的规律,检测自噬体、溶酶体的变化。方法采用肾动脉夹闭法制作大鼠肾脏I/R损伤模型,将实验动物随机分入I/R组和对照组,每组在各时间点各6只。分别于I/R后2、6、12和24h,采用Western印迹法检测肾组织中自噬相关蛋白Belinl和微管相关蛋白1轻链3(LC)的表达情况,在透射电子显微镜下观察I/R后肾组织内自噬小体的形成情况。结果 I/R组大鼠肾组织内Beclin1和LC3蛋白表达水平均自I/R后2h起开始升高,至I/R后24h达到高峰(P值均<0.05)。透射电子显微镜下见,对照组大鼠近端小管上皮细胞核膜完整,染色质结构正常,细胞质中细胞器形态正常,未见自噬小体;I/R组大鼠I/R后2h可见到损伤区域有自噬体形成,溶酶体增多,I/R后24h最为明显。结论大鼠肾I/R损伤后肾组织的自噬活性升高。
- 蔡彦叶朝阳高翔付莉莉刘晔李楠王文苓梅长林
- 关键词：自噬肾缺血再灌注损伤BECLIN
- 载脂蛋白D在常染色体显性多囊肾病中的表达及对囊肿衬里上皮细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的探讨载脂蛋白D(apolipoprotein D,ApoD)在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidneydisease,ADPKD)发病中的作用。方法采用免疫组织化学及蛋白质印迹方法分析ApoD在ADPKD患者肾脏囊肿组织中的表达;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测Han:SPRD大鼠肾组织ApoD蛋白和基因表达的变化。应用MTT法检测人重组ApoD蛋白对ADPKD囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖的影响;流式细胞术检测经人重组ApoD蛋白作用后WT9-12细胞的凋亡情况及细胞周期改变。结果 ADPKD患者及Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾组织中ApoD表达量分别低于正常人及Han:SPRD正常大鼠(+/+)肾组织(P<0.05,P<0.01)。8、12、16、24周龄Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾脏中Ap-oD基因表达量均低于同周龄Han:SPRD正常大鼠(+/+)(P<0.05)。人重组ApoD蛋白以100、200、400 ng/ml作用于WT9-12细胞,作用48 h细胞增殖抑制率分别为8.21%、7.59%、8.07%(P<0.05),作用72 h细胞增殖抑制率分别为8.62%、6.43%、9.42%(P<0.05)。人重组表达ApoD蛋白以400 ng/ml浓度刺激细胞72 h,对细胞凋亡无明显影响,但可使G1期细胞增加8.26%,S期细胞减少8.09%(P<0.05)。结论 ApoD蛋白可能通过调节细胞周期减弱WT9-12细胞增殖,其表达减少可能在ADPKD的发病过程中具有一定作用。
- 胡文娟刘晔刘冬梅高翔李宏栋梅长林
- 关键词：常染色体显性多囊肾细胞增殖细胞周期
- Sprague-Dawley大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的代谢组学研究被引量：8
- 2009年
- 目的系统分析急性肾损伤动物模型体内代谢产物,以评估代谢组学能否早期发现急性肾损伤,进一步寻找新的诊断生物标记物及治疗方法。方法建立肾脏急性缺血再灌注损伤动物模型,收集不同时间点的动物血清,利用高分辨率液相色谱/四级杆-飞行时间-质谱串联的方法对动物血清标本进行代谢产物的分析。结果术后4 h手术组大鼠的血清肌酐、尿素氮显著高于假手术组(P值均<0.01)。代谢组学能在2～72 h各时间点区分手术组与假手术组。差异代谢产物主要有卡尼汀及其衍生物和磷脂酰胆碱分解代谢产物两类,卡尼汀及短链脂酰卡尼汀在缺血再灌注损伤模型血清中含量降低,而后一类物质的血清浓度则有不同程度的升高。结论代谢组学能够早于血清肌酐、尿素氮的变化而发现肾脏损伤,可用于急性肾损伤的早期诊断。
- 刘晔吉程程王雪琦付莉莉董哲毅高翔梅长林
- 关键词：急性肾损伤代谢组学磷脂酰胆碱
- 载脂蛋白D在常染色体显性多囊肾病中的表达异常及其作用
- 胡文娟刘晔高翔刘冬梅梅长林
- 未折叠蛋白反应参与小鼠急性肾缺血/再灌注损伤被引量：6
- 2009年
- 目的探讨未折叠蛋白反应(UPR)在小鼠急性肾缺血/再灌注损伤中的作用。方法将C57B6小鼠分为正常、假手术组和0、4、12、24 h手术组(分别于术后0、4、12和24 h处死小鼠),留取各组小鼠的左侧肾脏。苏木精-伊红(H-E)、过碘酸雪夫反应(PAS)和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色观察各组肾脏组织学变化,Western印迹法和实时聚合酶链反应(PCR)检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和caspase12在各组小鼠肾组织中的表达。结果H-E、PAS染色可见24 h手术组的肾小管上皮细胞坏死明显,病变最重的部位为外髓外带近端小管,肾小管坏死评分为(2.930 0±0.131 1)分,显著高于其他组(P值均<0.01)。TUNEL染色可见24 h手术组的肾小管上皮细胞凋亡指数为(36.17±7.53)%,显著高于其他各组(P值均<0.01)。Western印迹法结果显示,12 h手术组的GRP78和caspase12蛋白水平显著高于其他各组(P值均<0.01)。实时PCR结果显示,4 h手术组的GRP78和caspase12 mRNA水平显著高于其他各组(P值分别<0.01、0.05)。结论在夹闭左侧肾动脉致急性肾缺血/再灌注损伤模型中,小鼠左侧肾脏组织学损伤显示再灌注后24 h最严重。GRP78和caspase12在再灌注后其mRNA和蛋白表达水平明显升高或激活,其变化早于组织学改变。提示UPR可能在急性肾缺血/再灌注损伤中发挥重要作用。
- 肖敏王雪琦蔡厚安刘晔刘冬梅梅长林
- 关键词：急性肾损伤未折叠蛋白反应GRP78
