冯磊
- 作品数:17 被引量:82H指数:6
- 供职机构:郑州大学第一附属医院更多>>
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- 急性单核细胞白血病细胞系THP-1侧群细胞的分选、鉴定与富集
- 2013年
- 目的探讨人急性单核细胞白血病细胞系THP-1中是否存在侧群(SP)细胞,鉴定其是否具有白血病干细胞(LSCs)的生物学特性,并研究从THP-1细胞系中富集sP细胞的方法。方法THP-1细胞用Hoechst33342荧光染料染色后,分别应用荧光显微镜和流式细胞术(FCM)检测是否存在sP细胞及sP细胞的形态和比例。分选sP和非侧群(NSP)细胞,FCM检测其表面抗原表达及细胞周期;实时荧光定量PCR检测耐药基因ABCG2、ABCBl和凋亡基因Bcl-2、Bax在两亚群细胞中的表达差异。将THP-1细胞用不同水平阿糖胞苷(Ara—C)处理24h,染色后检测sP细胞比例的变化。结果1.荧光显微镜观察到在THP-1细胞中存在拒染的sP细胞,形态与NSP细胞无明显区别。FCM检测结果显示,试验管sP细胞比例为(1.81-4-0.99)%,对照管可被维拉帕米完全拮抗。2.FCM分选sP细胞的纯度达到(96.71±0.90)%;SP细胞大部分处于静止期,G0/G1期细胞比例达(84.04±4.98)%,而NSP细胞则处于增殖期,S/G2/M期细胞比例为(56.38±1.48)%;CD34+、CD34+CD%一细胞在sP亚群中的比例要高于NSP亚群(P〈0.05);SP细胞ABCG2及ABCBl表达水平显著高于NSP细胞(P均〈0.05)。SP细胞Bcl-2表达水平(0.99±0.08)显著高于NSP细胞(0.29±0.13)(P〈0.05),而Bax表达值(0.68±0.05)与NSP细胞(0.85±0.09)表达水平差异无统计学意义(P〉0.05),但Bcl-2/Bax比值显著高于NSP细胞亚群(P〈0.05)。3.经与Ara-C共培养24h后,sP细胞的比例显著提高,且随着Ara.C水平增大,sP细胞比例也越高。结论人急性单核细胞白血病细胞系THP-1中存在少量sP细胞,较之NSP细胞更具有干细胞的生物学活性。与一定水平Ara—C共培养可有效富集THP-1细胞系中的sP细胞,可作为LSCs研究的切入点,对进一步研究白血病有重要意义。
- 王颖超马丽娜殷楚云冯磊魏永纬盛光耀
- 关键词:THP-1细胞白血病干细胞侧群细胞阿糖胞苷
- α-平滑肌肌动蛋白在肝癌组织中的表达及其与肝癌侵袭转移的关系被引量:7
- 2012年
- 目的探讨α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肝癌中的表达及与肝癌侵袭转移的关系。方法收集非肝癌的肝脏组织15例,肝癌并伴门静脉转移的癌组织30例,按病理分化程度分为3组:低分化组、中分化组和高分化组。采取逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌组织中α-SMAmRNA的表达和免疫组织化学的方法检测理.SMA在癌组织及门静脉癌栓组织的表达。结果RT-PCR结果显示0L.SMA在所有肝癌组织中均呈阳性表达;免疫组织化学显示α-SMA在对照肝脏、肝癌组织和门脉癌栓组织的表达值分别为125.69±29.17、187.43±17.66、218.70±13.52,方差分析显示α-SMA表达差异有统计学意义(P〈0.01),门脉癌栓组表达最高;按照肝脏病理分为3组:低分化组、中分化组和高分化组,表达值分别为237.14±25.83、190.57±19.90、165.67±22.64,方差分析显示α-SMA表达差异有统计学意义(P〈0.01),在低分化组表达最高。结论α-SMA在肝癌中表达明显增加,特别是门静脉癌栓组及低分化组,与肝癌的侵袭、转移有关。
- 潘延凤陶丰宝王永刚兰超冯磊张贤强
- 关键词:肝细胞癌Α-平滑肌肌动蛋白肿瘤转移
- 儿童EB病毒相关性噬血细胞淋巴组织增生症的临床特征及死亡相关危险因素分析
- :总结儿童EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症(EBV-HLH)的临床特征、实验室检查、基因筛查等特点,探讨分析其预后转归相关死亡危险因素.方法:收集2010年1月至2013年3月期间我院收治的44例EBV-HLH患儿的临...
- 王颖超魏永纬马丽娜殷楚云冯磊刘东杰
- 关键词:EB病毒儿童患者
- 自分泌运动因子受体在急性髓细胞白血病中的表达及意义
- 王颖超马丽娜冯磊殷楚云刘冬杰刘满菊
- 抗CD47抗体联合阿糖胞苷靶向治疗NOD/SCID小鼠单核细胞白血病的研究被引量:11
- 2013年
- 目的探讨CD47在急性髓细胞白血病NOD/SCID小鼠模型中的预后意义及靶向治疗的最佳策略。方法将分选的CD34+CD38-白血病干细胞(leukemia stem cells,LSCs)移植入NOD/SCID小鼠体内,建立小鼠急性单核细胞白血病模型;抗人CD47单克隆抗体单独或联合阿糖胞苷治疗白血病小鼠7~14 d,并进行疗效分析。将LSCs与小鼠巨噬细胞在含抗CD47单克隆抗体的培养液中共培养,观察CD47对巨噬细胞吞噬LSCs能力的影响。结果 THP-1细胞中存在CD34+CD38-LSCs,比例约为0.12%±0.06%,将分选后的CD34+CD38-LSCs(比例高达97.0%±1.7%)移植入NOD/SCID小鼠后成功建立白血病模型。体内实验表明,阿糖胞苷(7 d)联合抗CD47单克隆抗体(14 d)治疗后,白血病小鼠外周血和骨髓中CD33+CD45+白血病细胞下降最明显(P<0.01),生存时间明显长于其它各组。体外共培养2 h后,抗CD47单克隆抗体组吞噬指数(76.9%±12.2%)明显高于抗CD45单克隆抗体组(7.60%±2.4%,P<0.01)。结论 CD47高表达是急性髓细胞白血病的预后不良因素。阿糖胞苷联合抗CD47单克隆抗体可有效杀灭普通白血病细胞和白血病干细胞,对彻底治愈急性髓细胞白血病具有重要临床意义。
- 王颖超冯磊殷楚云马丽娜魏永纬王春美盛光耀
- 关键词:白血病干细胞CD47阿糖胞苷靶向治疗小鼠
- 自分泌运动因子受体mRNA在急性髓细胞白血病细胞株中的表达及意义
- :通过检测自分泌运动因子受体(AMFR) mRNA在急性髓细胞白血病(AML)细胞株中的表达,探讨其在AML发病中的作用及其靶向治疗的潜在价值.方法:①以急性髓细胞白血病THP-1细胞株组、HL60细胞株组及K562细胞...
- 王颖超马丽娜冯磊殷楚云王春美魏永纬刘冬杰
- 关键词:急性髓细胞白血病微小核糖核酸
- 乙型肝炎病毒相关肝细胞癌中的肝癌相关mRNA的筛选和分析被引量:1
- 2011年
- 目的观察乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌的mRNA表达谱的变化,并进行生物信息学分析。方法用长链RNA芯片检测肝癌组织和正常肝组织mRNA的表达谱,并进行GO分析将差异表达的基因进行功能和细胞定位。结果肝癌mRNA表达量与正常对照组比较,2倍以上变化,差异有统计学意义(P〈0.05)的mRNA认为是差异表达的mRNA,共991条,占所有基因总数的5.7%。其中2倍以上升高的共733条;2倍以上降低的共258条;5倍以上升高的共94条;5倍以上降低的共39条;10倍以上升高的共18条;10倍以上降低的共11条。GO分析表明差异性表达的mRNA参与了重要生物学调节功能,其中一些基因可能是HBV相关肝癌所特有的。结论HBV相关肝癌的mRNA表达谱发生显著变化,差异基因参与了细胞的重要生物调节过程,可能参与肝癌的重要调节过程;HBV相关肝癌的表达谱与其他病因相关的肝癌有共性,也有一定的特性。
- 潘延凤陶丰宝宋丽杰李志勤张贤强梁红霞冯磊
- 关键词:肝细胞基因芯片乙型肝炎病毒
- 三种不同方法分离脐血造血干细胞的效果比较被引量:5
- 2012年
- 目的探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究。方法取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,每份均采用羟乙基淀粉沉淀(HES)法、淋巴细胞分离液(Ficoll)密度梯度离心法、免疫磁珠(MACS)法处理。比较3种方法分离后的单个核细胞(MNCs)回收率、锥虫蓝拒染率及CD34细胞阳性率;将以上3种方法所得细胞用完全培养基培养,不同时间点计数细胞,绘制生长曲线,并观察原代细胞的生长情况及其形态特征;并采用半固体琼脂培养法,计数其粒-巨噬细胞集落形成单位数。结果 HES法得到的MNCs回收率高于Ficoll密度梯度离心法和MACS法(Pa<0.05);锥虫蓝拒染率三者比较差异无统计学意义(P>0.05);MACS法所得细胞CD34阳性率明显高于另2种方法(Pa<0.05),并且其所得细胞生长状态好,集落数最多;HES法和Ficoll法所得细胞,部分呈贴壁生长,与贴壁细胞共培养的细胞生长状态好;Ficoll密度梯度离心法得到细胞生长状态最差,集落数最少。结论 HES法可作为一种首选常规分离脐血造血干细胞的方法;MACS法分离得到造血干细胞纯度高,适于实验及临床研究。
- 王颖超殷楚云冯磊赵小明王晓晖徐彦磊
- 关键词:脐血造血干细胞间充质干细胞
- 自分泌运动因子受体在急性髓细胞白血病中的作用研究
- 目的 通过检测自分泌运动因子受体(autocrine motility factor receptor,AMFR)在急性髓细胞白血病细胞株中的表达,及其对髓系白血病细胞凋亡和细胞周期的影响,初步探索AMFR在急性髓细胞白...
- 王颖超冯磊马丽娜殷楚云魏永纬王春美
- 急性单核细胞白血病细胞系THP-1侧群细胞分选、鉴定与富集
- 目的探讨人急性单核细胞白血病细胞系THP-1中是否存在侧群(SP)细胞,鉴定其是否具有LSCs的生物学特性并研究从THP-1细胞系中富集SP细胞的方法。方法THP-1细胞用Hoeehst33342荧光染料染色后,分别应用...
- 王颖超殷楚云冯磊王春美盛光耀