何燕浙
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
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- 抑制miR-691通过调控VIM对人胰腺癌BXPC-3细胞侵袭转移的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨微小RNA-691(miR-691)在胰腺癌细胞系中表达状况及抑制miR-691对人胰腺癌BXPC-3细胞生物学行为的影响。方法 miR-691采用实时荧光定量PCR检测。人工化学合成抑制miR-691并转染BXPC-3细胞。流式细胞术检测细胞凋亡情况。通过Transwel^x室细胞侵袭转移实验检测BXPC-3细胞侵袭转移能力。结果人胰腺癌细胞系中BXPC-3对miR-691呈高表达;转染抑制miR-691后,BXPC-3细胞miR-691表达下降,其细胞凋亡无显著改变(P>0.05);而转染抑制miR-691组中通过Transwel小室的细胞数明显高于空白组和对照组(P<0.01)。结论 miR-691可有望成为人胰腺癌基因治疗的候选靶点。
- 何燕浙唐德军
- 关键词：胰腺癌微小RNA
- Rho家族蛋白在胰腺癌组织中的表达及临床意义被引量：1
- 2014年
- 目的研究Rho家族中3个重要成员RhoA、RhoB、RhoC在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学SP法检测43例胰腺癌组织及25例正常胰腺组织中RhoA、RhoB、RhoC蛋白的表达情况,并分析它们的表达与胰腺癌临床病理特征之间的关系。结果 RhoA、RhoC蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率分别为76.7%和72.1%,在正常胰腺组织中的阳性表达率分别为28.0%和20.0%,两者比较差异均有统计学意义(P<0.05);RhoB蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率为4.7%,在正常胰腺组织中的阳性表达率为32.0%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);RhoA、RhoC蛋白表达均与胰腺癌的分化程度、肿瘤分期、有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 RhoA、RhoC蛋白的表达与胰腺癌的发生发展、浸润转移密切相关。
- 黄洋潘耀振江建新王敏李旭何燕浙詹磊孙诚谊
- 关键词：胰腺癌免疫组织化学
- Lv-shRNA-Hsa-microRNA-691慢病毒表达载体的构建与鉴定
- 2016年
- 目的构建Lv-shRNA-hsa-microRNA-691慢病毒表达载体。方法 PCR扩增pri-miR-691-2前体序列,克隆至plenti-GFP慢病毒表达载体;双酶切及测序鉴定正确后进行慢病毒包装与滴度检测。构建成功后感染人胰腺癌细胞Panc-1,48h后Real-time Q-PCR检测miR-691的表达。结果酶切、测序鉴定证明插入序列正确,测定病毒滴度为1×109TU/m L,病毒感染48h后的Panc-1胰腺癌细胞在倒置荧光显微镜下观察可见绿色荧光,Real-time Q-PCR显示被感染细胞的miR-691表达量较未感染细胞显著增高。结论建立了高效稳定表达Lv-shRNA-hsa-miR-691的慢病毒转染系统。
- 何燕浙唐德军
- 关键词：MICRORNA慢病毒表达载体
- siRNA沉默KAP-1表达抑制胰腺癌细胞PANC-1的侵袭能力被引量：1
- 2013年
- 目的:观察siRNA沉默KAP-1基因表达对人胰腺癌PANC-1细胞侵袭能力的影响,探求该基因作为治疗靶点的可行性.方法:针对KAP-1基因设计5条siRNA,构建真核表达载体,转染293T细胞筛选RNAi有效靶点,包装成重组慢病毒Lv-siRNA-KAP-1,感染胰腺癌细胞PANC-1成功后RT-qPCR检测RNA干扰沉默效果,Transwell小室检测细胞侵袭能力.Western blot检测波形蛋白表达.结果:转染48h后,5条siRNA能显著抑制KAP-1的蛋白表达;其中最有效的1条siRNA包装成重组慢病毒Lv-siRNA-KAP-1,感染PANC-1细胞侵袭能力明显受到抑制;感染后细胞侵袭数目(97.3±25.6)较空白对照组(253.3±20.6)与阴性对照组(213.2±19.4)明显减少,差异显著(P<0.05);感染后PANC-1细胞的波形蛋白表达下调.结论:Lv-siRNA-KAP-1能显著抑制PANC-1细胞KAP-1的表达,抑制PANC-1细胞侵袭能力及波形蛋白表达,KAP-1基因有可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点.
- 江建新詹磊黄洋何燕浙孙诚谊
- 关键词：胰腺癌小干扰RNA
- KAP-1在胰腺癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2013年
- 目的:研究KAP-1在胰腺癌组织和细胞株中的表达及意义.方法:采用免疫组织化学方法检测46例胰腺癌标本(高分化15例,中分化17例,低分化14例)及9例正常胰腺标本中的KAP-1表达;采用RT-qPCR和Western blot的方法检测8对胰腺癌组织和配对癌旁组织标本中KAP-1的mRNA和蛋白质水平;采用RT-qPCR和Wsetern blot检测胰腺癌细胞株BxPC3、PANC-1、AsPC-1、SW1990、MIAPaCa-2、CFPAC-1、Capan-1和Capan-2中KAP-1mRNA和蛋白的表达水平.结果:免疫组织化学结果显示KAP-1在胰腺癌组织中阳性表达率为45.6%(21/46例),正常胰腺组织中阳性表达率为11.1%(1/9);在低分化胰腺癌组织中阳性表达率为78.6%(11/14),中分化胰腺癌组织为47.1%(8/17),高分化胰腺癌组织为13.3%(2/15);RT-qPCR和Western blot显示在胰腺癌组织中KAP-1的mRNA和蛋白质水平较癌旁正常胰腺组织高,KAP-1的mRNA水平在Panc-1中最高,在BXPC-3和CFPAC-1中较高,在SW1990、Capan-1和MIAPaCa-2中较低,在AsPC-1和Capan-2中最低.KAP-1蛋白质水平在低分化胰腺癌细胞株MIAPaCa-2和Panc-1中高,来源于肝转移的胰腺癌细胞系CFPAC-1中较高,其余细胞株中不表达.结论:KAP-1在胰腺癌组织中高表达,正常胰腺组织中几乎不表达,其表达与胰腺癌细胞分化相关;KAP-1可能在胰腺癌发生发展中发挥重要作用.
- 江建新詹磊黄洋何燕浙孙诚谊
- 关键词：胰腺癌分化
- 慢病毒介导KAP-1增强胰腺癌细胞Capan-2侵袭能力
- 2013年
- 目的观察KAP-1基因对人胰腺癌细胞Capan-2侵袭能力的影响,探求该基因作为治疗靶点的可行性。方法针对KAP-1基因构建真核表达载体,在293T细胞中包装成重组慢病毒Lv-eGFP-KAP-1,RT-qPCR和Western Blot法检测其对Capan-2细胞KAP-1的影响,Transwell侵袭小室检测其对Capan-2细胞侵袭能力的影响。结果成功地构建Lv-eGFP-KAP-1,感染Capan-2后细胞侵袭数目(128.3±4.6)较空白对照组(45.3±2.6)与阴性对照组(36.2±3.4)明显增加,差异有显著性(P<0.05)。结论 Lv-eGFP-KAP-1能显著上调Capan-2细胞KAP-1的表达,增强其侵袭能力,KAP-1基因有可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。
- 江建新詹磊黄洋何燕浙喻超孙诚谊
- 关键词：胰腺癌细胞侵袭
