龚邦强
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项江苏省海洋资源开发研究院科技开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 基于mPGES-1表达调控的药物筛选模型的建立
- 2008年
- 聚合酶链式反应扩增mPGES-1上游调控序列并插入到已预先在pGL3-Basic载体的Sal Ⅰ位点插入真核筛选基因新霉素抗性基因（neomycin）形成的质粒pGL3B—neo中，构建重组报告基因载体pGL3B-neo／mPGES-1，转染人肺癌细胞A549，通过G418筛选，建立了稳定的mPGES-1表达下调剂筛选细胞株SPGES1。通过检测荧光素酶报告基因表达水平的变化筛选人mPGES．1表达下调剂，并优化了其筛选条件，优化的条件是每孔细胞接种数目为1×10^4-3×10^4个，溶剂DMSO终浓度为1％，底物用量为20μL。利用该模型可有效地进行人mPGES-1表达下调剂的筛选。
- 郭雷王淑军龚邦强
- 关键词：炎症前列腺素E2报告基因
- 金叶子中抑制膜结合型PGE_2合酶-1表达活性物质的分离与鉴定(英文)被引量：5
- 2008年
- 在从天然产物筛选抗炎物质的过程中,应用有机溶媒萃取、浓缩及层析分离纯化后,从金叶子中得到三个化合物:槲皮素(1)、番石榴苷(2)、栎素(3)。化合物2为首次从此植物中分离鉴定,化合物1显示了强烈的抑制mPGES-1基因表达的活性,其IC50值为35.40μg/mL。
- 郭雷龚邦强
- 关键词：合酶-1类风湿性关节炎槲皮素
- 转基因动物在医药产业中的应用
- 龚邦强
- 关键词：转基因动物药物筛选药物生物学
- 文献传递
- 基于选择性抑制mPGES-1的表达筛选抗炎中药被引量：4
- 2010年
- 通过建立的选择性膜型前列腺素E2合酶-1(mPGES-1)表达抑制剂的体外细胞筛选模型,对50味中药共236个样品进行筛选。初筛中,筛选中药不同极性提取物对mPGES-1表达的抑制作用,抑制率>50%的样品进入复筛;复筛中,检测初筛活性样品对环氧化酶(COX)-1和COX-2表达的抑制作用,抑制率均<20%的样品认为是阳性物。结果表明,吲哚美辛对3种酶的抑制活性与文献报道相近;筛选发现泽泻组分1、蒲黄组分2对mPGES-1的表达有可重复的选择性抑制作用,对泽泻组分1、蒲黄组分2进行进一步研究,有望确定其抗炎的有效部位或化合物。
- 郭雷王淑军龚邦强
- 关键词：炎症中药药物筛选
- 基于报告基因能筛选下调p66^(shc)基因转录的药物普筛系统的建立
- 2007年
- 将p66shc基因的启动子序列克隆到含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,然后将重组质粒pGL3B-neo-p66shc转染入人的肺癌细胞A549中,通过单集落分离法得到含有重组质粒的稳定细胞系A549/p66shc。利用这个以报告基因为基础的药物普筛系统,筛选了数百种中药提取物及单体化合物,发现抑制率达到50%以上的2种中药提取物和8种单体化合物。
- 钱铭许伟钦龚邦强
- 关键词：荧光素酶药物筛选
- 人apoA-I基因启动子转录上调剂筛选系统的建立与应用被引量：2
- 2007年
- PCR扩增含有apoA-I基因的转录调控序列的启动子片断(376 bp),克隆入含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,构成受apoA-I启动子调控的重组报告基因质粒pGL3B-neo::apo,稳定转染人肝癌细胞株HepG2。通过细胞有限稀释法筛选稳定表达荧光素酶活性的细胞株SAPOA-I。经apoA-I转录调控因子PPARα激动剂的鉴定和细胞接种密度、溶剂使用浓度等条件的优化,成功建立了靶向apoA-I基因启动子转录活性的报告基因筛选体系。应用该体系对400多种降脂中药提取物进行筛选,泽泻、罗布麻叶、山楂等提取物显示出较好的上调活性,与文献报道采用动物模型研究的结果一致。
- 邓婷纪伟连霁虹郭雷胡蔚蓉龚邦强
- 关键词：荧光素酶报告基因药物筛选降脂中药
- 温度诱导模式对重组大肠杆菌质粒拷贝数的影响被引量：9
- 2006年
- 对于大肠杆菌温度表达系统,温度的选择和变化对外源基因的表达至关重要,最直接的因素表现在对质粒拷贝数的影响上。本文通过重组大肠杆菌DH 5α表达载脂蛋白A I-M ilano来分析不同温度诱导模式对质粒拷贝数的影响,确立了二次升温诱导(30°C→42°C→37°C→42°C)有利于菌体质粒拷贝数的增加,从而提高目的蛋白的表达量,结果表明:二次升温诱导比一次升温诱导蛋白表达量增加80%。
- 丁满生马文峰郭美锦储炬张嗣良龚邦强
- 关键词：温度质粒拷贝数大肠杆菌
- 建立一个基于报告基因的靶标筛药系统筛选上调ABCA1基因转录的中药提取物
- 2007年
- ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)具有催化外周细胞过量胆固醇和磷脂外向流出的功能。本实验将ABCA1启动子序列克隆到含有荧光素酶报告基因和新霉素抗性基因的pGL3B-neo载体中,并将得到的重组质粒pGL3B-neo/ABCA1转染入人肝癌细胞(hepG2)。通过稀释培养法最终得到含有重组质粒的稳定细胞系SABCA1。利用这个报告基因为基础的药物筛选系统,筛选了100多种中药提取物。通过荧光素酶活性测试,相对活性达到180%以上的有4种中药提取物,并最终挑选能明显激活ABCA1基因启动子的鬼箭羽水提组分进一步研究,得出半数有效浓度(EC50)为48.06 mg/L。此外,利用基于apoA1基因的药物筛选系统验证得出鬼箭羽水提组分也能促进apoA1基因的表达。
- 胡蔚蓉连霁虹纪伟郭雷龚邦强
- 关键词：高密度脂蛋白胆固醇逆向转运
