黄东煜
- 作品数：19 被引量：96H指数：7
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金卫生部科学研究基金福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 老年重症肺炎患者细胞免疫功能的初步研究——附60例报告被引量：19
- 2010年
- 目的:探讨老年重症肺炎患者的细胞免疫功能变化。方法:筛选老年重症肺炎患者60例(老年重症组)、老年非重症肺炎患者34例(老年非重症组)、非老年重症肺炎患者9例(非老年重症组)、非老年非重症肺炎患者21例(非老年非重症组),流式细胞术检测其外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及NK细胞的活性。结果:老年重症组患者CD3+、CD4+、CD8+及NK细胞活性比老年非重症组明显下降(P均<0.01)。非老年重症组患者CD3+、CD4+及NK细胞活性均低于非老年非重症组(P<0.05或0.01)。老年重症组患者CD3+、CD8+均低于非老年重症组(P均<0.05)。老年非重症组与非老年非重症组的各项指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:重症肺炎患者细胞免疫功能较非重症肺炎患者下降,其中老年重症肺炎患者细胞免疫功能下降更明显。免疫功能减退可能是老年患者发生重症肺炎的原因之一。
- 连宁芳陈公平林其昌王碧瑛黄东煜
- 关键词：重症肺炎T细胞亚群自然杀伤细胞
- 慢病毒载体介导Bdnf基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死被引量：17
- 2008年
- 为研究经Bdnf基因修饰的骨髓间质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)对脑梗死的协同治疗作用,构建带有大鼠Bdnf基因之慢病毒载体,并感染大鼠骨髓间质干细胞(Rat mesenchymal stem cells,rMSCs)。运用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,经尾静脉注射移植,对照组注射0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)1mL,Bdnf-rMSCs和Mock-rMSCs组分别注射Bdnf-rMSCs细胞悬液以及未插入目的基因的空病毒载体感染后的rMSCs细胞悬液各1mL。各组大鼠分别于术后24h、移植后2周及2月应用modified Neurological Severity Scores(mNSS)评价神经功能状况。结果显示,与对照组相比,Mock-rMSCs及Bdnf-rMSCs移植组神经功能改善明显,mNSS评分差异有统计学意义(P<0.001),而且Bdnf-rMSCs移植组明显优于Mock-rMSCs移植组(P<0.001)。移植后2周及2月,与对照组相比两移植组梗死区脑组织结构恢复较好,均可见EGFP阳性细胞在梗死区及其周边区聚集并存活,并有部分细胞出现神经元样改变。Bdnf-rMSCs移植组中移植细胞大量表达BDNF,两移植组中均有部分植入细胞表达神经细胞表面标志物。研究表明Bdnf基因修饰的rMSCs经静脉移植后可迁移至脑梗死灶周围,向神经细胞分化并长期存活。移植后的干细胞可与其分泌的BDNF协同促进脑梗死后神经功能恢复,这为将来基因工程干细胞移植治疗脑梗死提供了实验依据。
- 黄东煜张志坚陈柏龄吴秀丽王柠张彦定
- 关键词：骨髓间质干细胞静脉移植
- Ang-1基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死的实验研究被引量：12
- 2009年
- 目的:观察血管生成素-1(Ang-1)和骨髓间质干细胞(MSCs)对脑梗死的联合治疗作用。方法:构建带有大鼠Ang-1基因的慢病毒载体,感染大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)获得可表达具有生物活性Ang-1蛋白的rMSCs(Ang-rMSCs)。制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,随机分为对照组、Ang-rMSCs组及空载体-rMSCs(pNL-rMSCs)组。脑栓塞术后24h进行细胞移植。各组大鼠分别于术后24h、移植后1周、1月及3月用mNSS量表评价神经功能状况,移植后1周应用伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性,应用荧光激发及荧光免疫组化观察移植细胞在脑内的存活、分化情况,并经组织学观察有无成瘤迹象。结果:与对照组相比,移植后1周、1月,pNL-rMSCs及Ang-rMSCs组神经功能改善明显(P<0.01),Ang-rMSCs组明显优于pNL-rMSCs组(P<0.001)。移植后3月3组间的mNSS评分差异无显著(P>0.05)。EB检测示血脑屏障通透性在pNL-rMSCs及Ang-rMSCs组低于对照组(P<0.01),Ang-rMSCs组低于pNL-rMSCs组(P<0.01)。移植后1周、1月及3月,Ang-rMSCs和pNL-rMSCs组在荧光激发下均见移植细胞在梗死灶及其周边区聚集并存活。荧光免疫组化检测示Ang-rMSCs组中移植细胞大量表达Ang-1,两移植组中均有部分细胞可同时表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)或星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。未观察到移植细胞异常增殖等成瘤迹象。结论:Ang-1基因修饰的rMSCs移植后可迁移至脑梗死灶周围,分化表达神经细胞标志物并较长期存活。MSCs移植与其分泌的Ang-1蛋白可协同促进脑梗死后神经功能恢复。
- 陈柏龄陈东平张志坚黄东煜吴秀丽张彦定
- 关键词：骨髓间质干细胞慢病毒载体血管生成素-1
- 大鼠Bdnf基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间质干细胞中的表达被引量：11
- 2007年
- 骨髓间质干细胞（MSCs）是目前基因工程正在探讨应用的靶细胞，为构建带有脑源性神经营养因子（Banf）基因慢病毒载体并使其在大鼠骨髓间质干细胞中表达，采用RT-PCR技术获得大鼠Bdnf基因编码区（CDS）片段，限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP，在脂质体介导下与包装质粒HELPER，包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒。所获慢病毒感染大鼠MScs（rMSCs）后，PCR和免疫细胞化学法检测在rMSCs中Bdnf基因的插入和表达。结果显示所获的Bdd基因经测序后与GenBank报道序列完全一致。重组慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP经鉴定正确。三质粒共转染293T细胞成功，收集、浓缩病毒后测定其滴度为6．7×10^7 TU/mL，PCR证实Bdnf基因插入病毒基因组。感染rMSCs后RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western检测各组细胞均有BDNF蛋白表达，其中试验组BDNF-rMSCs更大量表达BDNF，与其余2组（Mock-rMSCs、rMSCs）比较差异具有统计学意义。构建带有Bdnf基因慢病毒载体并在大鼠骨髓间质干细胞中成功表达，为今后基因修饰干细胞的移植后长期观察研究奠定了基础。
- 黄东煜张志坚陈柏龄吴秀丽王柠张彦定
- 关键词：慢病毒BDNF骨髓间质干细胞
- PBL教学法在呼吸内科临床见习教学的实践和体会被引量：2
- 2011年
- 目的培养学生理论和实践紧密结合,锻炼学生的临床思维和解决问题能力,提高临床教学效果。方法在临床教学中采取"以问题为基础"的学习模式(PBL教学法),实践积极主动的带教方法。结果该方法有效地激发了学生的学习积极性、主动性,为理论学习到临床实践应用打下良好的基础,帮助医学生角色的转变。结论 PBL教学法很适合小班组的见习教学,是一种适合医疗教学新形势较好的教学方式,值得进一步推广,并在实践中总结。
- 林晓金咏絮王碧瑛黄东煜连宁芳
- 关键词：PBL临床见习呼吸内科
- 脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间充质干细胞治疗坐骨神经损伤被引量：8
- 2009年
- 背景:对周围神经损伤的治疗,目前希望能提高损伤局部的脑源性神经营养因子浓度来促进神经的修复再生。目的:观察坐骨神经损伤大鼠体内植入脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞后神经纤维的再通及运动功能的恢复情况。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-05/2008-05在福建省神经病学研究所完成。材料:无菌条件下取2月龄F344雄性大鼠股骨、胫骨制备骨髓间充质干细胞。利用构建好的慢病毒载体PNL-BDNF-IRES2-EGFP制备脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间质干细胞。方法:将60只成年SD大鼠经钳夹制作成右坐骨神经损伤模型,随机分为磷酸盐缓冲液组,骨髓间质干细胞组,脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组。在损伤处分别注射磷酸盐缓冲液2μL,骨髓间质干细胞混悬液2μL和脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞混悬液2μL。主要观察指标:在术后2,4周,通过辣根过氧化物酶示踪观察损伤侧L4,5脊髓前角存活的神经细胞数目,通过测量坐骨神经功能指数值观察大鼠损伤侧肢体运动功能恢复情况,同时应用荧光激发及免疫组化技术检测骨髓间质干细胞存活和脑源性神经营养因子表达情况。结果:脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组损伤侧L4,5脊髓前角细胞的存活数目多于磷酸盐缓冲液组和骨髓间质干细胞组,并且神经功能恢复也比其他两组好。骨髓间质干细胞组和脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组可观察到神经损伤处有较多的骨髓间质干细胞存活,并且脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组脑源性神经营养因子表达明显比骨髓间质干细胞组多。结论:脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞对周围神经损伤后神经纤维的再通及功能恢复有促进作用。
- 郑明辉张志坚黄东煜陈东平
- 关键词：脑源性神经营养因子骨髓间质干细胞周围神经损伤辣根过氧化物酶
- 血管生长素-1基因慢病毒载体的构建及其在间质干细胞的表达被引量：7
- 2007年
- 目的:构建带有血管生长素-1(Ang-1)基因的慢病毒载体并实现该基因在大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)中的表达。方法:RT-PCR获得大鼠Ang-1基因,限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒PNL-Ang-1-IRES2-EGFP,在脂质体介导下与包装质粒HELPER,包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒颗粒并感染rMSCs。PCR检测Ang-1基因的插入,细胞RT-PCR检测Ang-1mRNA表达,免疫细胞化学和Western blotting检测Ang-1蛋白的表达。结果:所获Ang-1基因经测序证实与GenBank报道的序列一致。慢病毒载体质粒PNL-Ang-1-IRES2-EGFP经SaⅠl和BamHⅠ双酶切后电泳显示1 512 bpAng-1目的基因片段和10.5 kb PNL-IRES2-EGFP载体片段。病毒基因组PCR证实Ang-1基因插入。荧光显微镜观察到EGFP表达。细胞RT-PCR检测到Ang-1mRNA表达。免疫细胞化学和Western blotting检测到Ang-1蛋白表达。结论:成功构建带有Ang-1基因的慢病毒载体并实现在rMSCs中的表达,为Ang-1基因修饰干细胞的应用研究奠定了基础。
- 陈柏龄张志坚黄东煜吴秀丽张彦定
- 关键词：间质干细胞
- 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血管内皮生长因子的表达及其意义被引量：4
- 2010年
- 目的 观察阻骞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者外周血血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化,探讨其与OSAHS及OSAHS相关性心脑血管疾病的关系. 方法 采用多导睡眠呼吸监测对6个OSAHS高发家庭的21例OSAHS患者及48例体检正常者进行睡眠呼吸监测,应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及计算机条带分析半定量检测单纯OSAHS组、OSAHS合并心脑血管疾病组以及正常对照组外周血VEGF mRNA表达水平,同时应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法分别检测3组的外周血浆VEGF的水平. 结果 （1）单纯OSAHS与正常对照组血浆VEGF含量[（205.75±2.79）ng/L与（168.72±4.64）ng/L]及外周血单个核细胞VEGF mRNA的表达[0.61±0.02与0.47±0.02（灰度面积比值）]比较,差异有统计学意义（均P＜0.01）.OSAHS合并心脑血管病组与单纯OSAHS组血浆VEGF含量[（288.74±2.73）ng/L与（205.75±2.79）ng/L]及外周血单个核细胞VEGFmRNA的表达[1.16±0.03与0.61±0.02（灰度面积比值）]比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.（2）OSAHS患者血浆VEGF及外周血单个核细胞VEGF mRNA水平均与其呼吸紊乱指数（AHI）、晨起收缩压、晨起舒张压呈正相关,与最低动脉血氧饱和度（MinSaO2）呈负相关. 结论 OSAHS患者VEGF水平明显增加,考虑VEGF可能参与了OSAHS的病理生理过程,特别是OSAHS相关性心脑血管病的病理生理过程.
- 林其昌时玲燕黄建钗黄东煜王碧瑛赵建铭黄瑞强
- 关键词：血管内皮生长因子类反转录聚合酶链反应酶联免疫
- 转基因干细胞技术治疗脑梗死实验研究
- 张志坚张彦定俞晓岚周海涛陈柏龄陈东平王伟黄东煜黄志新
- 项目属神经病学领域。来源于卫生部科学研究基金、福建省卫生教育联合攻关计划资助项目（WKJ2005-2-011）“利用转基因干细胞技术预防与治疗脑梗塞的研究”。项目内容包括三个方面。干细胞转治疗基因技术提高脑梗死后神经功能...
- 关键词：
- 关键词：脑梗死骨髓间充质干细胞基因工程
- 慢病毒载体介导Ang-1基因修饰的骨髓间质干细胞移植治疗脑梗死
- 目的:利用慢病毒载体的介导获得表达血管生长素-1(Angiopoietin-1,Ang-1)的大鼠骨髓间充质干细胞 (rMSCs),经股静脉移植入大脑中动脉栓塞大鼠,观察rMSCs在脑内存活、分化情况,及对病灶组织结构和...
- 陈柏龄张志坚黄东煜吴秀丽王伟
- 文献传递
