鲍晶晶
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
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- 卡介苗体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞ICAM-1表达
- 2012年
- 目的探讨卡介苗(bacillus Calmette-Guerin,BCG)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-2Z细胞及细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响及可能的调控机制。方法显微镜观察细胞形态学变化和记录细胞被胰蛋白酶完全消化所用时间;流式细胞术检测细胞表面ICAM-1表达;免疫细胞化学检测细胞NF-κB表达,western blot检测ICAM-1、NF-κB表达。结果 BCG作用24、48和72 h细胞对培养介质的粘附力增加,且被胰蛋白酶完全消化所用的时间明显长于对照组[(5.8±0.4)、(7.8±0.4)、(8.8±0.4)min vs(5.0±0.5)min,F=22.01,P<0.01];流式细胞术检测24、48和72 h组ICAM-1表达的平均荧光强度(MnX)明显高于对照组[(25.2±0.4)、(28.7±1.1)、(37.2±1.6)vs(23.4±0.9),F=112.34,P<0.01];免疫细胞化学结果表明,BCG作用72 h组NF-κB表达水平高于对照组。western blot结果表明,各组NF-κB和ICAM-1表达均明显高于对照组。结论 BCG体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞ICAM-1表达,且该过程可能与NF-κB信号途径有关。
- 曾今诚鲍晶晶王红梅张慧梁艳芳张俊爱徐军发
- 关键词：卡介苗鼻咽癌细胞间黏附分子1
- 肿瘤浸润性自然杀伤细胞的研究进展被引量：1
- 2012年
- 自然杀伤（natural killer,NK）细胞是一类独立的淋巴细胞群,它无需预先致敏即可直接杀伤靶细胞。NK细胞抗肿瘤作用主要是通过诱导靶细胞凋亡、释放效应细胞因子、介导抗体依赖性细胞毒性（antibody dependent cell mediated cy-totoxicity,ADCC）作用等途径发挥作用。
- 鲍晶晶徐军发
- 关键词：自然杀伤细胞肿瘤浸润性抗肿瘤作用细胞凋亡NK细胞细胞因子
- 检测人可溶性疱疹病毒侵入介体双抗体夹心ELISA的建立被引量：5
- 2011年
- 目的:建立快速、灵敏的检测人可溶性疱疹病毒侵入介体(HVEM)双抗体夹心ELISA。方法:在获得HVEM重组蛋白的基础上,制备兔抗人HVEM多克隆抗体,以HVEM单克隆抗体(mAb)和HVEM多克隆抗体(pAb)为双抗体,建立双抗体夹心ELISA。结果:建立的检测人可溶性HVEM双抗体夹心ELISA最低检出限为3.91μg/L,标准曲线范围7.81～250μg/L,线性方程为y=0.0021x+0.1852,R2=0.9944。回收率在89.7%～92.8%之间,平均回收率为91.4%。批内变异系数<10%,批间变异系数<15%。结论:建立的双抗体夹心ELISA快速、灵敏、简单,可满足实际工作需要。
- 刘伟郑淑华吕晶鲍晶晶王红梅关向前张慧徐军发
- 关键词：HVEM共刺激分子抗体制备ELISA
- 小鼠BTLA慢病毒表达载体的构建及鉴定
- 2013年
- 目的构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒。PCR技术和基因测序对重组质粒进行鉴定。荧光显微镜观察重组慢病毒感染293T细胞形态学变化。RT-PCR和Western blot法鉴定BTLA在重组慢病毒感染293T细胞中的表达。50%组织培养感染剂量法(TCID50法)检测重组慢病毒滴度。结果成功构建的pMD18-T-mBTLA质粒和pSL6-mBTLA质粒,经双酶切电泳后均出现大小约为1 kb的条带与mB-TLA编码序列的大小相符。基因测序并比对分析进一步证实mBTLA编码序列成功整合到质粒载体。病毒上清PCR扩增和293T细胞形态学观察证实Lenti-mBTLA慢病毒包装成功。TCID50法测定Lenti-mBTLA慢病毒滴度为1.3×108pfu/mL。RT-PCR和Western blot法证实Lenti-mBTLA慢病毒能有效表达mBTLA mRNA和蛋白质。结论成功构建了表达小鼠BTLA的慢病毒。
- 曾今诚鲍晶晶王红梅张慧张俊爱王万党关向前徐军发
- 关键词：慢病毒293T细胞PCR技术
- 卡介苗对人鼻咽癌CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨卡介苗(BCG)对鼻咽癌CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响。方法碘化丙啶染色法检测细胞周期,Annex-in V-FITC检测细胞凋亡,Western blotting检测周期相关蛋白表达。结果 BCG作用不同时间后,G1期细胞百分率由未处理细胞(对照组)的(47.1±0.9)%升高至72h作用组的(65.3±1.3)%,S期细胞百分率由对照组的(39.2±0.7)%降低至72h作用组的(17.6±0.5)%。不同处理时间组和对照组均未检出明显细胞凋亡。CyclinD1蛋白表达随着BCG作用时间的延长逐渐减弱。结论 BCG体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞CyclinD1低表达,促使细胞周期发生G1/S期阻滞。
- 曾今诚鲍晶晶王红梅张慧梁艳芳张俊爱徐军发
- 关键词：鼻咽肿瘤卡介苗细胞周期
- 人BTLA分子胞外区的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定
- 2011年
- 目的:表达并纯化重组人BTLA(hBTLA)分子胞外区,制备和鉴定兔抗hBTLA多克隆抗体,为进一步实验研究奠定基础。方法:采用特异性引物扩增hBTLA胞外功能区DNA,经酶切、连接构建原核表达载体pET28a-hBTLA。将构建的重组表达质粒转化入E.coliBL21(DE3)菌株,采用IPTG诱导表达,Ni-NTA柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白纯度。将纯化的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对抗体进行纯化、效价测定及特异性鉴定。结果:序列测定证实构建的pET28a-hBTLA重组表达载体含有hBTLA编码序列,其序列比对分析与GenBank中公布序列一致,质粒在E.coli中诱导表达相对分子质量(Mr)为15720的目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析纯化后的目的蛋白达到电泳纯。双向琼脂扩散法检测抗体效价为1∶16,ELISA法检测抗体效价为1∶20 000,Western blot分析显示抗体能特异性结合重组hBTLA蛋白。结论:成功构建了hBTLA蛋白的原核表达载体,获得高纯度的融合蛋白,制备高效价、高特异性的多克隆抗体。
- 郑淑华刘伟吕晶王红梅鲍晶晶徐军发
- 关键词：BTLA原核表达多克隆抗体
