魏军亚
- 作品数：3 被引量：13H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市21世纪青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 两株大蒜病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：12
- 2001年
- 利用建立cDNA库的方法 ,通过RT PCR分别扩增和克隆了感染我国天津地区大蒜的大蒜花叶病毒 (GMVc)和大蒜潜隐病毒 (GLVc)的外壳蛋白 (CP)基因 ,并对其分别在原核细胞中进行了诱导表达和表达产物的分析。克隆基因的序列测定与分析表明 ,GMVc的CP基因全长 867个核苷酸 ,编码 2 89个氨基酸 ,与报道的一株GMV的核苷酸和氨基酸的同源性分别为 88 5%和 97 2 % ,属于马铃薯Y病毒属 (Potyvirus)的成员 ;GLVc的CP基因全长 885个核苷酸 ,编码 2 94个氨基酸 ,与报道的一株GLV的核苷酸和氨基酸同源率分别为 73 6%和 90 9% ,属于香石竹潜隐病毒属 (Carlavirus)的成员 ;克隆基因的表达产物经SDS PAGE分析表明 ,GM Vc和GLVc的外壳蛋白分别约 32kD和 34kD ,与预测的结果一致。本实验结果对感染我国大蒜的病毒进行分子水平的确切诊断、分类和调查奠定了基础 ,将对大蒜病毒病的防治与脱毒大蒜的生产具有重要的意义。
- 马筠杨恭徐绍华魏军亚邱并生
- 关键词：外壳蛋白基因克隆
- 复制酶与运动蛋白编码基因的突变对烟草花叶病毒的弱化效应被引量：1
- 2001年
- 番茄花叶病毒弱毒疫苗K(ToMV-K)的复制酶基因和运动蛋白基因分别具有乳石和赭石突变的特征. 为了对这一致弱特征进行扩展研究, 用PCR介导的定点突变技术, 对烟草花叶病毒普通株中国分离物(TMV-Cv)复制酶基因和运动蛋白基因分别进行乳石突变(UGA)和赭石突变(UAA), 构建了复制酶单突变体--TMV-Cvrase, 运动蛋白单突变体--TMV-Cvmp和复制酶与运动蛋白双突变体--TMV-Cvrase-mp. 烟草侵染试验发现, TMV-Cvmp和TMV-Cvrase-mp能侵染枯斑(Xanthi NC)和系统(K326)寄主, 后者侵染普通烟K326仅出现少量轻微的花叶症状; 子代病毒的电子显微镜观察、重复接种试验及其核酸的RNA斑点杂交、RT-PCR扩增与测序结果表明, TMV-Cvmp和TMV-Cvrase-mp子代病毒与TMV-Cv的大小和形态基本一致, 具有完整和稳定的侵染、复制和繁殖能力, 且其基因组仍保持着突变, 而复制酶单突变体TMV-Cvrase不能侵染烟草. 以上结果表明, 复制酶与运动蛋白的乳石突变与赭石突变协同致弱TMV-Cv对烟草的侵染症状, 从而暗示ToMV-K基因组的这种突变模式也可以用于其他植物病毒的致弱研究.
- 杨恭邱并生魏军亚刘广超
- 关键词：烟草花叶病毒复制酶运动蛋白弱化效应基因突变体
- 渗漏型UGA终止密码在植物病毒相关基因组中的作用
- 2001年
- 弱毒疫苗ToMV K的复制酶基因在 2 6 70 2 6 72核苷酸处发生UGA突变 ,研究表明该突变是导致病毒弱化的主要原因。通过ToMV K复制酶的突变区与其它具有UGA渗漏终止密码的植物ssRNA病毒基因组通读结构区的分析和比较 ,发现ToMV K和其它植物病毒的UGA渗漏与通读相关基因的共同特征 :CGG基元 ,通读区的α 螺旋结构和一些疏水氨基酸残基使UGA的通读成为可能。这些渗漏与通读的特征可能才是ToMV K致弱的根本原因。可以根据这一模式 ,探讨对其它植物ssRNA的病毒如PVX、PVY。
- 魏军亚杨恭邱并生张继澍
- 关键词：通读植物病毒弱毒疫苗
