马婧 作品数:37 被引量:136 H指数:7 供职机构: 西南大学园艺园林学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
蜡梅WRKY转录因子基因CpWRKY71及其启动子的克隆和应用 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及蜡梅WRKY转录因子基因CpWRKY71及其启动子的克隆和应用。本发明的目的是为蜡梅逆境胁迫研究提供一种新选择。本发明提供了蜡梅WRKY转录因子基因CpWRKY71,其编码蛋白具有如S... 黄仁维 刘道凤 眭顺照 马婧 李志能 李名扬文献传递 “素心”蜡梅花粉生活力及贮藏力的研究 被引量:1 2016年 采用离体萌发法,研究不同的培养基对成年株"素心"蜡梅(Chimonanthus praecox)花粉萌发的作用,并探讨不同干燥时间及贮藏条件对花粉生活力的影响。结果表明,干燥4h的花粉在10%蔗糖+75mg·L^(-1) H_3BO_3+0.1‰CaCl_2+50mg·L^(-1) GA3的培养基上培养4h后萌发率最高,并且干燥4h后的花粉贮藏2d后生活力下降明显,在-20℃条件下贮藏6d后花粉萌发率明显高于4℃和20℃贮藏的花粉,第8d后3种贮藏条件下的花粉萌发率均不到1%。研究结果可为测定和分析蜡梅花粉生活力提供一定的参考,也为蜡梅储存指出了方向。 杨姗 张家瑞 秦垚 马婧 李名扬 李志能关键词:蜡梅 花粉 生活力 贮藏力 蜡梅凝集素基因克隆及其对蚜虫、蛞蝓抗性分析 被引量:8 2011年 【目的】克隆蜡梅凝集素基因并研究其抗蚜虫和抗蛞蝓活性,为植物抗虫基因工程提供理论依据和试验材料。【方法】通过随机挑选克隆测序的方法,从蜡梅花cDNA文库中克隆蜡梅凝集素基因,并构建植物表达载体,用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,并对转基因植株进行抗蚜和抗蛞蝓试验。【结果】从蜡梅花cDNA文库中克隆到了一个凝集素基因CpLEC(GenBank登录号:DQ352145),该基因全长871 bp,ORF框长558 bp,编码185个氨基酸。该基因DNA分析表明其不含内含子。具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,有2个典型的甘露糖结合位点(QXDXNXVXY),和1个变异的可能结合位点(HXGXNXVXY)。Southern杂交表明,该基因在蜡梅基因组中为多拷贝。构建了35S启动子控制下的CpLEC基因的植物表达载体pBI121-CpLEC,利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株。PCR和半定量RT-PCR分析表明,CpLEC基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达。抗蚜虫鉴定表明,转基因植株及其离体叶片有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率分别为60%和68%。抗蛞蝓试验结果表明转基因植株有明显的抗蛞蝓活性,转基因烟草虫害指数为0.17,远低于非转基因烟草的虫害指数0.96。【结论】克隆获得了蜡梅凝集素基因CpLEC,通过转基因手段分析其抗蚜和抗蛞蝓活性,结果表明该基因对抗虫基因工程有重要的应用价值。 眭顺照 李琳莉 祝钦泷 马婧 李名扬关键词:转基因烟草 抗性 蚜虫 蛞蝓 中国芦荟AlDREB2基因的克隆及其胁迫表达 被引量:5 2009年 为了研究中国芦荟的抗逆机理,以cDNA为模板,利用3′RACE和PCR扩增方法,克隆得到了一个编码DREB蛋白的基因,命名为AlDREB2,GenBank登录号为FJ560460。其cDNA序列全长为886bp,包含一个636bp的开放阅读框,推导编码的氨基酸序列(212个氨基酸)与库拉索芦荟AlDREB1的序列相似性很高。进化树分析结果将AlDREB2归入DREB亚家族中A-6亚组。利用RT-PCR技术分析了AlDREB2基因的表达与胁迫的关系,表明AlDREB2基因在非生物胁迫与生物胁迫中能够被不同程度诱导表达。 张倩 马婧 何婧 李名扬 眭顺照关键词:芦荟 DREB转录因子 胁迫处理 2个蜡梅nsLTP基因启动子的克隆及其在烟草中的瞬时表达分析 被引量:7 2012年 利用hiTAIL-PCR法得到了2个蜡梅(Chimonanthus praecox)非特异性脂转移蛋白(non-specific lipid transfer protein)基因家族成员CpLTP3和CpLTP4翻译起始位点上游启动子序列,长度分别为1298bp和838bp。生物信息学分析表明2个序列均存在启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。在烟草叶片中的瞬时表达结果表明这两个启动子序列均具备驱动报告基因GUS表达的功能。 马婧 刘群 王晓斌 眭顺照 李名扬关键词:蜡梅 非特异性脂转移蛋白 启动子 胁迫 金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1的克隆及分子特征分析 被引量:6 2009年 目的:对金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1进行克隆和序列特征分析。方法:采用RACE结合cDNA文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆MYBP1基因(FdMYBP1);生物信息学分析,Southern杂交。结果:克隆到1个MYBP1转录因子基因(FdMYBP1),通过Southern杂交分析,推测FdMYBP1基因是1~2个拷贝基因;FdMYBP1基因编码1个长256个氨基酸的蛋白质, 在N端存在1个保守结构域,属于MYB转录因子家族。结论:首次从金荞麦中克隆到转录因子基因FdMYBP1,它具有MYB同源基因的典型特征,可能在金荞麦类黄酮代谢途径中起作用。 马婧 祝钦泷 郭铁英 刘光德 眭顺照 李名扬关键词:金荞麦 MYB转录因子 类黄酮 园艺专业研究生《基因工程实验技术》课程教学探索与实践 被引量:3 2014年 针对园艺专业研究生的特点和人才培养要求,分析了《基因工程实验技术》课程在理论和实验教学中存在的不足,结合笔者在该课程教学实践中积累的经验和体会,从课程的理论体系、实验设置、实施方案和考核制度几个方面进行了探索,提出了一套较为有效的教学体系. 马婧 眭顺照 李名扬关键词:基因工程 实验教学 教学改革 蜡梅CpSRG1基因、启动子及其应用 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及蜡梅CpSRG1基因、启动子及其应用。本发明提供了蜡梅CpSRG1蛋白、编码该蛋白的基因及启动子的克隆其应用。本发明首次克隆获得蜡梅CpSRG1基因,并通过实时荧光定量PCR技术检测... 马婧 李桂香 刘道凤 罗江会 门维婷 李名扬 眭顺照文献传递 蜡梅SUMO E3连接酶基因CpSIZ1及其应用 本发明属于生物技术领域,具体涉及蜡梅SUMO E3连接酶基因CpSIZ1及其应用。本发明要解决的技术问题是为蜡梅育种提供一种新选择。本发明提供了蜡梅SUMO E3连接酶CpSIZ1,具有如SEQ ID No.30所示的氨... 眭顺照 李瑞 马婧 刘道凤 李名扬 王霞 李涛文献传递 蜡梅胚胎晚期丰富蛋白基因CpLEA的克隆及表达分析 被引量:4 2014年 从蜡梅(Chimonanthus praecox)花cDNA文库中获得了1个胚胎晚期丰富蛋白(LEA)基因的cDNA全长序列,命名为CpLEA(GenBank登录号:JF412788),该基因cDNA含有一个273 bp编码91个氨基酸的开放阅读框,从蜡梅基因组DNA中扩增该基因发现,该基因含有两个大小分别为35 bp和707 bp的内含子。生物信息学分析显示,CpLEA的编码蛋白含有4个胚胎晚期丰富蛋白第3族LEA蛋白特有的11个氨基酸的基元重复序列,进化树分析表明该编码蛋白与榛子的LEA蛋白亲缘关系最近。通过原核表达获得了与预期大小一致的融合蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在蜡梅成熟种子中表达量最高,在根中几乎不表达;在盛开期花的各个部位中又以雌蕊中的表达量最高;在花发育早期表达量较高,随后下降并保持相对稳定,在衰败期突增并达到最高;检测该基因在脱落酸(ABA 50μmol·L-1)、低温(4℃)、高温(42℃)、干旱(30%PEG6000)和高盐(NaCl 1 mol·L-1)5种外源非生物胁迫因子作用下的表达特性。结果表明,该基因能够被ABA、低温、高温、PEG和NaCl诱导表达,并在随后的时间内呈现出不同的表达模式。表明CpLEA可能在蜡梅花发育和多种非生物胁迫响应中发挥作用。 马婧 孙文婷 王晶 眭顺照 李名扬关键词:蜡梅 原核表达 基因表达分析