靖志强 作品数:7 被引量:8 H指数:2 供职机构: 武汉工程大学化工与制药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 武汉市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 农业科学 更多>>
低感染复数下重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞HzAM1的感染策略优化 昆虫细胞一杆状病毒表达系统逐渐被人们认识到是重组病毒杀虫剂,疫苗,重组蛋白生产的有效手段。在过去几十年中,人们主要从以下几个方面去优化昆虫杆状病毒表达系统:细胞株;培养基;溶氧;反应器的设计和感染策略。其中感染策略包括感... 靖志强关键词:昆虫细胞 文献传递 重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞感染策略优化及放大试验 昆虫细胞—杆状病毒表达系统已经广泛应用于生物杀虫剂及重组蛋白的大规模生产。在昆虫细胞—杆状病毒表达系统中,采用低感染复数进行重组病毒的大规模生产是一个很好的选择,但感染策略中的感染复数(MOI)、感染时间(TOI)、细胞... 靖志强 张佑红关键词:杆状病毒 昆虫细胞 文献传递 不同周期Sf9细胞琥珀酸脱氢酶酶活的研究 被引量:2 2009年 为了研究不同周期Sf9细胞线粒体琥珀酸脱氢酶酶活的差异,首先使用TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法将Sf9细胞同步化于G1/S期,恢复生长分别得到S、G2/M、G1期的细胞,然后利用MTT法检测不同细胞周期的Sf9细胞琥珀酸脱氢酶酶活,发现处于G1期的细胞酶活比S、G2/M期的细胞酶活大.跟踪细胞成长,在不同的时间点采样,以MTT法检测琥珀酸脱氢酶酶活,发现接种后48 h的Sf9细胞酶活最大,此时与其他时刻相比的Sf9细胞处于G1、S期所占的比例最大. 张佑红 陈龙 靖志强 郑伟 陈林 秦琴关键词:细胞周期 琥珀酸脱氢酶 MTT法 重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞感染策略优化及扩大试验 被引量:2 2010年 昆虫细胞-杆状病毒表达系统已经广泛应用于生物杀虫剂及重组蛋白的大规模生产。在昆虫细胞-杆状病毒表达系统中,感染策略中的感染复数(MOI)、感染时间(TOI)、细胞初始浓度(ICD)的相互关系还不是很清楚,而且相关报道也很少。本研究在摇瓶中利用正交实验探讨了MOI、TOI及ICD的相互作用关系以及对包涵体病毒(OV)和非包涵体病毒(BV)产量的影响。结果表明,感染复数对OV和BV产量有显著的影响;最佳感染条件为MOI为0.1,TOI为细胞处于对数生长期初期,ICD为2×105cells.ml-1;最大BV病毒滴度为2.0×107TCID50.ml-1。将在摇瓶中获得的最佳条件在气升式反应器进行扩大试验,获得最大病毒滴度为2.13×107TCID50.ml-1。 张佑红 靖志强 马静 徐鹏 陈龙关键词:杆状病毒 昆虫细胞 流式细胞术快速检测杆状病毒滴度 被引量:4 2010年 为了快速而准确的测定杆状病毒的滴度,采用流式细胞术对经SYBR Green I染色后的杆状病毒直接计数.考察固定、破膜和染色等因素对检测结果的影响,并验证改进后的方法的重复性和线性性.杆状病毒最佳染色条件:质量分数为0.1%的多聚甲醛固定病毒30min后,加入一定量的SYBR Green I在80℃下孵育10min.测量结果CV值为2.4%(n=8),R^2为0.9998.整个测量过程由原来终点稀释法的7~10d缩短到1h. 徐鹏 张佑红 杨益 彭继明 陈龙 靖志强 危威 马静 秦琴关键词:流式细胞术 杆状病毒 SYBR I 反应器结构和表观气速对昆虫细胞在气升式反应器中培养的影响 被引量:3 2008年 细胞的大规模培养是利用昆虫细胞培养生产杆状病毒的一个关键步骤。相对其他昆虫细胞培养系统来说,气升式反应器是一个较理想的选择。为了寻找适合细胞生长的反应器最优的结构参数,棉铃虫细胞HzAm1分别在不同几何参数的反应器中生长。下降室和上升室的截面积比,底部系数,高径比这些几何参数和表观气速都与细胞的生长紧密相关。在一定反应器尺寸下测定表观气速的影响,寻找一个能够提供足够氧分压而又不会对活细胞造成伤害的表观气速。并且,在不同尺寸反应器中表观气速与液体流速的关系能够测出来。改变反应器的上升室和下降室的截面积比和表观气速,活细胞的浓度可以从4.5×10~5提高到7.7×10~5cells//ml,细胞存活率从95.14%提高到98.38%。 赵亮 张佑红 靖志强 陈龙关键词:昆虫细胞培养 气升式反应器 表观气速 重组杆状病毒感染悬浮昆虫细胞感染策略优化及放大试验 靖志强 张佑红