陈思瑾
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人呼吸道合胞病毒裂解纯化疫苗的初步研究
- 目的：采用成熟的病毒裂解纯化疫苗制备技术，以人类呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus，HRSV)野毒株中能诱导保护性抗体的F蛋白和G蛋白为目标蛋白，研究有效裂解HRSV和纯化...
- 陈思瑾
- 关键词：呼吸道合胞病毒亚单位疫苗疫苗制备
- 文献传递
- 人呼吸道合胞病毒的稳定性被引量：6
- 2009年
- 目的观察人呼吸道合胞病毒(HRSV)在不同温度保存、冻融和超声波处理的稳定性。方法将HRSVA2株接种于KMB17细胞上适应培养后,收获病毒液,分别置于37、22、4和-20℃条件下保存不同时间,或经冻融和超声波处理后,用微量细胞病变法检测HRSV的感染性滴度,观察其稳定性。结果HRSV在37℃保存,病毒感染性滴度下降很快,第4天时,降至约1.50lgCCID50/ml,5d后降至1.00lgCCID50/ml以下,几乎检测不到;在22℃保存,病毒感染性滴度下降相对缓慢,第14天时比原始滴度降低约3.20lgCCID50/ml;在4℃和-20℃下保存较稳定,分别保存5周和3个月后,病毒感染性滴度下降<0.60lgCCID50/ml。冻融1、2、3次,病毒感染性滴度分别下降1.37、2.55和3.61lgCCID50/ml,冻融4次后,病毒几乎无感染性。超声波处理后,病毒感染性滴度下降很快,处理1次病毒滴度即下降至原始滴度的50%左右,处理2次后,病毒几乎无感染性。结论HRSV不宜在37℃和22℃存放,可短暂保存于4℃,在-20℃可保存较长时间;冻融和超声波处理均对病毒感染性滴度有明显影响。
- 蒋蕊鞠李华龙润乡陈思瑾陈洪波宋霞崔萍芳谢忠平
- 关键词：人呼吸道合胞病毒稳定性感染性滴度温度冻融超声波处理
- HRSV在人二倍体细胞上的生长动力学研究
- 2009年
- 目的研究人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)在人二倍体KMB17细胞上的增殖动力学,为病毒的体外细胞大量繁殖创造条件.方法将HRSVA2株接种到人二倍体KMB17细胞,采用微量细胞病变法在不同时间检测病毒的感染性滴度,绘制一步生长曲线;同时,以不同剂量的病毒感染复数(MO)I感染细胞,分析细胞开始出现病变及所有接种孔全部病变的时间,并检测收获物的感染性滴度,确定最佳MOI.结果HRSV在KMB17细胞上的感染增殖一步生长曲线分析提示,该病毒在培养到2～4d后开始病变,第5～10天呈对数增长,其增殖高峰为10～11d,10d后增殖趋于平缓;接种MOI越大,开始出现病变时间及完全病变的时间都越早.接种100、10及1个MOI时,接种后2～3d均出现病变,第6天时三组细胞病变率均为100%,感染性滴度为7.37～7.50lgCCID50/mL,三组之间无明显的差异;接种在0.1、0.01及0.001个MOI时,接种后第4天有30%的细胞出现病变,第8～9天时细胞病变率也均达到100%,感染性滴度在6.50～7.0lgCCID50/mL之间;当接种在0.0001个MOI以下时,接种后第5～6天才出现病变,至第14天时细胞仍未能完全产生病变,发生病变的细胞收获物其感染性滴度仅为6.00～6.12lgCCID50/mL.结论HRSVA2株病毒在KMB17细胞内能良好增殖,其增殖高峰为10～11d,收获物感染性滴度最高可达7.50lgCCID50/mL,接种最佳MOI约为0.1～1.0.
- 谢忠平龙润乡李华杨蓉蒋蕊鞠陈思瑾
- 关键词：人呼吸道合胞病毒人二倍体细胞
- 人呼吸道合胞病毒病理特征分析被引量：3
- 2009年
- 目的系统分析人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)对体内外不同细胞影响的病理学变化特征。方法将HRSV A2株病毒接种到人二倍体KMB17细胞、VERO细胞,同时接种小鼠、乳鼠、豚鼠,通过病理切片及电镜切片检查,分析体内外不同细胞的感染变化情况。结果HRSVA2株病毒对VERO细胞感染力强于二倍体KMB17细胞;小鼠及乳鼠脑内接种不引起死亡,没有炎症细胞浸润;豚鼠鼻腔接种主要感染下呼吸道及肺部,引发浸润性病变,对核膜、核仁均产生损伤,肺及组织片状坏死。结论VERO细胞适于HRSVA2株的病毒培养;豚鼠可作为HRSV毒力评价的动物模型。
- 李华龙润乡蒋蕊鞠陈思瑾李志强杨蓉谢忠平
- 关键词：人呼吸道合胞病毒病理特征电镜检查动物试验
- 人呼吸道合胞病毒的裂解方法
- 本发明提供一种人呼吸道合胞病毒的裂解方法，将人呼吸道合胞病毒经常规沉淀、浓缩成病毒液后，加入NP－40至最终体积浓度为1～2％，或者加入去氧胆酸钠至最终质量浓度为3～4％，混合均匀后，在20～37℃下裂解90～120mi...
- 谢忠平陈思瑾蒋蕊鞠李华龙润乡崔萍芳杨蓉白惠珠
- 文献传递
- 人呼吸道合胞病毒裂解条件的初步探索被引量：1
- 2009年
- 目的对人呼吸道合胞病毒(HRSV)的裂解条件进行初步探索,为研制HRSV裂解纯化疫苗奠定基础。方法用不同的裂解剂,以不同浓度和温度对HRSV裂解不同时间,以HRSV的F及G蛋白为目标蛋白,对得到的蛋白进行还原蛋白电泳分析及Western blot鉴定,电镜观察验证裂解效果。结果1%浓度的TritonX-100在4℃作用90min,对HRSV的裂解效果优于其他裂解剂。电镜观察可见病毒样品呈云絮状裂解;Western blot分析表明,特异性条带为HRSV的F蛋白。结论已初步筛选出HRSV的裂解条件,其对HRSV的裂解效果较好。
- 陈思瑾谢忠平李华龙润乡蒋蕊鞠崔萍芳
- 关键词：人呼吸道合胞病毒亚单位疫苗
