陈华
- 作品数：15 被引量：106H指数：6
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 农杆菌介导的双价抗盐基因转化番茄的研究被引量：31
- 2005年
- 植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状,将多个耐盐相关基因导入同一植物更有助于提高植物的耐盐能力。运用农杆菌介导法向转AtNHX1(拟南芥Na+/H+逆向运输蛋白编码基因)的番茄(Lycopersicumesculentum L.Moneymaker’)株系X1OEA1自交二代植株(T2)中转入山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)。PCR、Southern、RT-PCR和甜菜碱含量分析结果表明,BADH已经整合到番茄基因组中,并在转基因植株中转录和翻译表达。叶绿素荧光(Fv/Fm)、相对电导率(Rc/Rc’)、叶绿素含量(Chla+b)、叶绿素a/b比(Chla/b)、光合速率(Pn)测定结果表明,200mmol·L-1NaCl胁迫下,双转化的番茄植株各项生理指标均优于单转化AtNHX1的番茄。转双基因植株TT0-2随着NaCl浓度的增加,Fv/Fm值下降幅度最小;相对电导率与非胁迫条件下相比增加了3.6倍,而单转化AtNHX1的T2增加了4.2倍;与转单基因植株T2相比,茎部干重、鲜重分别增加12.5%、19.8%;叶部干重、鲜重分别增加22.5%、14.0%,差异达显著水平。初步证明双基因转化有助于增强番茄的耐盐性。同时对番茄的转化系统进行优化的结果表明,使用抗生素特美汀的转化效率明显高于头孢霉素的。
- 刘晶周树峰陈华韩和平李银心
- 关键词：农杆菌番茄基因转化农杆菌介导甜菜碱醛脱氢酶基因转基因植株
- 一种筛选耐盐药蒲公英的方法及其专用引物
- 本发明公开了一种筛选耐盐药蒲公英的方法及其专用引物。本发明所提供的筛选耐盐药蒲公英的方法，是以药蒲公英的基因组DNA为模板，以核苷酸序列：TCGCATCCCT为引物，进行PCR扩增，电泳检测扩增产物，如扩增产物中检测到5...
- 李银心陈华
- 文献传递
- 一种离体培养药蒲公英的方法及其专用分化培养基
- 本发明公开了一种离体培养药蒲公英的方法及其专用培养基。该方法是以药蒲公英叶片为外植体，接种在分化培养基MS+0.2－1.5mg/L IAA+0－5.0mg/L 6－BA或MS+0.2－1.5mg/L IAA+0－2mg/...
- 李银心陈华
- 文献传递
- 药蒲公英再生体系的建立和优化被引量：17
- 2005年
- 通过愈伤组织诱导和直接不定芽再生途径 ,建立了药蒲公英的快速高效再生系统。叶片外植体在含 0 2mg LIAA和1mg LTDZ的MS培养基中培养 2周后便产生大量的丛生芽 ,在含有 0 5mg L 2 ,4 D和 2mg L 6 BA的MS培养基中培养 30d后 ,形成明显的愈伤组织 ,愈伤组织块在含 1 0mg L 6 BA的MS培养基中成功再生。对 9株再生植株进行RAPD检测表明 ,部分植株在DNA水平上发生了变异。与对照相比 ,再生植株的主要抗氧化成分无明显变化 ,保证了有效成分的稳定。
- 陈华李平刘晶李银心
- 关键词：愈伤组织培养器官发生RAPD
- 药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)耐1．5％NaCl变异体的筛选及特性分析被引量：8
- 2008年
- 为提高药蒲公英的耐盐性,用20～30 d大小的药蒲公英叶片诱导愈伤,获得的愈伤以NaCl作为选择因子,用直接筛选的方法,每3周进行一次继代培养,经3个月继代筛选获得了耐1.5%NaCl的药蒲公英愈伤组织,将耐1.5%NaCl的药蒲公英愈伤组织接种在分化培养基上分化出芽,之后将再生芽转接到生根培养基中进行生根培养,经4个月得到了12株耐1.5%NaCl的药蒲公英再生植株。与野生型相比,耐盐植株叶片宽大、叶柄粗短、叶表面覆盖白色细毛,根粗壮较短,花茎中部具2 cm左右的苞叶。RAPD(Random amplified polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA)和SDS-PAGE检测表明,耐盐植株与对照植株在DNA及蛋白水平上均存在明显差异。1.5%NaCl处理后,与普通再生植株相比,耐盐株系的抗氧化酶活性明显提高,脯氨酸含量上升幅度更为显著,而丙二醛(MDA)含量降低,其主要药用成分黄酮的含量显著增加。这些结果说明耐盐植株的抗氧化防御能力明显增强。以上结果表明耐1.5%NaCl的药蒲公英再生植株为耐1.5%NaCl药蒲公英变异体,这些耐盐变异体有望成为抗盐耐海水蔬菜家族的新成员。同时,这些耐盐变异体植株比普通植株具有更高的医用商业价值。耐1.5%NaCl的药蒲公英再生变异体遗传稳定性的研究正在进行中。
- 张新果李银心陈华石武良
- 关键词：耐盐变异体叶片外植体
- 一种筛选耐盐药蒲公英的方法及其专用引物
- 本发明公开了一种筛选耐盐药蒲公英的方法及其专用引物。本发明所提供的筛选耐盐药蒲公英的方法，是以药蒲公英的基因组DNA为模板，以核苷酸序列：TCGCATCCCT为引物，进行PCR扩增，电泳检测扩增产物，如扩增产物中检测到5...
- 李银心陈华
- 文献传递
- 番杏Na^＋／H^＋逆向转运蛋白基因的克隆及特性分析被引量：20
- 2004年
- 根据同源序列设计筒并引物，通过RT—PCR及RACE的方法从盐生植物番杏中克隆出Na^+／H^+逆向运输蛋白基因。序列分析表明，该cDNA全长2199bp，开放读码框为1665bp，可编码一个554个氨基酸的多肽，与其他植物中已经克隆的Na^+／H^+逆向转运蛋白具有很高的同源性。系统发育分析表明该蛋白(TtNHX1)与液泡型的Na^+／H^+逆向转运蛋白的亲缘较近，与质膜型的Na^+／H^+逆向转运蛋白亲缘关系较远。TtNHX1的表达具有组织特异性，在番杏的根、茎和叶中均有表达，而花中没有表达。经NaCl诱导后根、茎和叶中的表达量增加，而花中仍没有表达。
- 吕慧颖李银心陈华刘晶李平杨庆凯
- 关键词：番杏NA^+同源序列质膜逆向转运
- 农杆菌介导的转双抗盐基因番茄的研究
- 通过农杆菌介导法向已转入编码Na/H逆向运输蛋白基因AtNHX1的番茄(Lycopersicumesculentum L.‘Moneymaker’)株系XOEA中转入山菠菜BADH基因,以期获得耐盐性更高的转双基因耐盐番...
- 刘晶陈华李平李银心
- 文献传递
- 一种离体培养药蒲公英的方法
- 本发明公开了一种离体培养药蒲公英的方法。该方法是以药蒲公英萌发后1个月的无菌苗叶片为外植体，接种在分化培养基中，培养7-14天分化出丛生芽，再将得到的丛生芽转入MS培养基进行生根，培养8-12天得到完整的再生植株；其中，...
- 李银心陈华
- 文献传递
- 盐角草的Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>逆向转运蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种盐角草Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>逆向转运蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的盐角草Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>逆向转运蛋白来源于盐角草(Sali...
- 李银心吕慧颖陈华
- 文献传递
