钱柳
- 作品数：22 被引量：90H指数：5
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人血管钠肽与人血清蛋白的融合蛋白及其制备
- 人血管钠肽与人血清白蛋白的融合蛋白及其制备方法，属于长效重组融合蛋白药物技术领域。本发明利用重叠PCR技术，将hVNP和HSA cDNA进行拼接，中间不加入任何连接肽，得到的hVNP-HSA cDNA融合基因被整合到宿主...
- 张雁云金坚钱柳金敏王慧姜曰水崔燕生陈蕴刘强
- 文献传递
- 类风湿性关节炎患者抗胶原蛋白Ⅱ抗体及其自身反应性T淋巴细胞的检测被引量：3
- 2010年
- 目的:分析类风湿性关节炎(RA)患者T淋巴细胞免疫应答及抗胶原蛋白Ⅱ(CⅡ)抗体的异常表现。方法:应用流式细胞仪分析22例RA及6例骨关节炎(OA)患者外周血和关节滑膜液(SF)中T淋巴细胞免疫表型和趋化因子受体的表达。选用HSP-65和胶原蛋白Ⅱ(CⅡ)抗原诱导和分析患者自身反应性T淋巴细胞克隆频率,采用经典的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者外周血和SF中抗CⅡ抗体以及IFN-γ、IL-10、IL-4和IL-12的含量。结果:RA患者关节SF中CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值为1.09,显著低于外周血中CD4+/CD8+T淋巴细胞比值(2.02);SF中CD3+/CD25+双阳性的活化T淋巴细胞占(15.9±9.6)%。SF中T淋巴细胞表面趋化因子受体CCR5表达较低,与外周血相比无统计学意义,但趋化因子受体CD25+/CXCR3+表达量较高,为(16.0±4.0)%,远远高于外周血T淋巴细胞[仅为(0.5±0.3)%](P<0.01)。ELISA检测结果表明RA患者关节SF中抗CⅡ抗体阳性率明显高于其血清以及OA患者SF和血清;RA患者SF中IFN-γ、IL-12的含量高于外周血。来自RA患者病灶关节SF单个核细胞(SFMC)较外周血单个核细胞(PBMC)对HSP-65抗原和CⅡ的诱导具有更高的自身反应性T淋巴细胞应答频率(分别为8.5×10-6和11.5×10-6)。结论:RA患者关节SF中存在高活化状态的T淋巴细胞,其对CⅡ的高克隆反应频率以及SF中高表达抗CⅡ抗体,均提示自身反应性T淋巴细胞的浸润是造成患者病灶区组织损伤的关键因素。
- 缪怡徐雪亮黄秋愉胡朝英钱柳余奇文张继英
- 关键词：类风湿性关节炎滑膜液
- Vγ9Vδ2T细胞亚群的建立与功能分析被引量：2
- 2013年
- 目的:建立γδT细胞的一个亚群(Vγ9Vδ2 T细胞亚群),分析其免疫学相关功能。方法:对健康人外周血单个核细胞进行磁珠分选,获得富含γδT细胞的细胞群,用异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)、白细胞介素2(IL-2)刺激γδT细胞增殖。通过流式细胞仪检测分析Vγ9Vδ2 T细胞(γδT细胞主要亚群)在IPP刺激后的分化趋势及表面标志,分离出效应型Vγ9Vδ2 T细胞,对其抗原递呈功能进行研究,并分析不同表型的Vγ9Vδ2 T细胞的分泌格局。结果:Vγ9Vδ2 T细胞在IPP作用下可被激活,不断增殖并分化为效应记忆型(TEM、CD45RA-CD27-γδT),该细胞群高表达HLA-DR和CD80/86等分子,呈现出专职性抗原递呈细胞的表型特征;此群效应记忆型Vγ9Vδ2 T细胞能有效递呈PPD、TT等可溶性抗原给CD4+T细胞,具有与B细胞相当的抗原递呈功能。实验还发现,不同表型的Vγ9Vδ2 T细胞具有不同的细胞因子分泌格局,新鲜分离的健康人外周血Vγ9Vδ2 T细胞(非效应型)以分泌IFN-γ为主,而效应记忆型Vγ9Vδ2 T细胞在产生IFN-γ的同时能分泌IL-17。结论:Vγ9Vδ2 T细胞亚群能在IPP的作用下激活、增殖,并分化为具有抗原递呈细胞功能的效应记忆型细胞,其分泌IFN-γ的同时可分泌IL-17。
- 邱潮林周晓薇胡朝英谢秋华胡锦辉赵蓉钱柳张冬青
- 关键词：T细胞
- IFN-β干预抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的RA样小鼠模型(CAIA)的分子学机制研究
- 研究背景:新近研究表明B细胞在 RA的发病中起着重要的作用,因此本研究采用CAIA小鼠模型研究 RA这一因免疫功能紊乱并最终引起骨质损伤而致残的自身免疫性疾病。IFN-β不仅具有抗病毒和免疫调节作用,且在维持骨平衡中也有...
- 赵蓉周晓薇苗平钱柳余奇文张继英许荣陈雪华张冬青
- 关键词：IFN-ΒC-FOS
- 槲寄生凝集素蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究
- 槲寄生(Mistletoe)是一种半寄生植物。被中医用于治疗淋病、梅毒、高血压和风湿病已有悠久历史。在欧洲,槲寄生凝集素(Mistletoe Lectin,ML)多年来一直被用作肿瘤的辅助治疗药物。近来的研究发现,从槲寄...
- 钱柳胡朝英黄秋愉程伟志余奇文张继英张冬青陈雪华
- 关键词：槲寄生凝集素肿瘤治疗肿瘤细胞凋亡
- 文献传递
- 病毒分子模拟介导多发性硬化发病机制的初步分析
- 2011年
- 目的研究多发性硬化(MS)患者所具有的与人类疱疹病毒6型(HHV-6)病毒/人类疱疹病毒4型病毒(EBV)和髓鞘碱性蛋白(MBP)发生交叉反应的CD4+/CD8+T细胞,以及MS患者血清和脑脊液中MBP和抗病毒抗体表达状况,探讨MS发病与HHV-6/EBV感染的关系。方法通过氚标记胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入实验分析HHV-6/EBV病毒肽和MBP肽段诱导的MS患者CD4+和CD8+T细胞的应答反应,以高灵敏ELISA试剂盒检测MS患者脑脊液和血清中抗HHV-6/EBV抗体水平,并以引物序列特异的PCR(SSP-PCR)技术分析MS患者HLA-Ⅱ类分子DRB1的表达格局。结果 (1)MS患者HLA-Ⅱ类分子DRB1*04基因(41.7%)与健康对照组(18.7%)相比具有较高的检出率,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)MS患者血清中存在高水平抗HHV-6抗体,同时亦可检测出抗EBV壳蛋白抗原(VCA)IgG抗体和EBV核抗原-1(EBNA-1)的IgG抗体。(3)3H-TdR掺入实验结果表明,MS患者的CD4+T细胞或CD8+T细胞对自身MBP肽段及合成的HHV-6/EBV肽段的诱导作用均存在交叉反应。结论 HHV-6/EBV与MS患者MBP自身抗原存在结构上的同源性。该同源性可诱发MS患者自身反应性CD4+/CD8+T细胞活化而导致MS患者免疫损伤,可能是MS的发病机制之一。
- 钱宪明周晓慧钱柳程伟志胡朝英黄秋愉余奇文张继英陈生弟刘振国张冬青
- 关键词：自身免疫病分子模拟病毒多发性硬化人类疱疹病毒
- 类风湿性关节炎与自身反应性B细胞被引量：8
- 2009年
- 钱柳陆梅生张冬青
- 关键词：类风湿性关节炎自身抗体谱IL-13
- 抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体对IL-6信号分子调控浅析被引量：4
- 2014年
- 目的:分析鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体[anti-IL-6Rβ(gp130)mAb]的生物学特性及对IL-6信号分子的调节作用。方法:利用Western blot、竞争性ELISA实验、功能表位结合实验,检测anti-IL-6Rβ(gp130)mAb的亲和力、效价及与gp130抗原表位结合特异性。进而探讨anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对U266细胞、RA患者外周血单个核细胞(PBMC)及滑膜液单个核细胞(SFMC)增殖和分化中的IL-6信号分子的调控机制。结果:Anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对gp130具有高亲和性(如10A1细胞株的亲和力常数可达为2.62E-10),所获得的多株单抗还具有针对不同抗原结合表位的特性,可用于分析和研究IL-6信号通路及下游STAT3的磷酸化。结论:获得针对不同抗原结合表位的anti-IL-6Rβ(gp130)mAb,初步的实验结果表明此类单抗不仅具有调控IL-6信号分子和下游STAT3磷酸化的生物学功能,并为解析临床RA的发病与IL-6信号分子的关联性提供了初步的实验结果。
- 周晓薇苗平陈呢喃赵蓉钱柳余奇文张继英许荣何东仪何东仪陆梅生张冬青
- 关键词：IL-6GP130STAT3RA
- 槲寄生凝集素蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究从中药槲寄生中制备的槲寄生凝集素蛋白诱导肿瘤细胞凋亡机制。方法用经典的染色技术、流式细胞术、MTT法分析经分子生物学方法分离纯化的槲寄生凝集素蛋白诱导肿瘤细胞凋亡形态特征,AP峰值和抑制肿瘤细胞增殖的抑制率以研究其诱导肿瘤细胞凋亡机制。结果槲寄生凝集素蛋白具有诱导肿瘤细胞凋亡和显著抑制和阻断肿瘤细胞增殖且以Caspase依赖的方式发挥其生物学作用的。结论槲寄生凝集素蛋白具有直接抗肿瘤作用,在肿瘤免疫学的基础和临床应用研究中具有前景。
- 孙华魏美娟许均钱柳胡朝英黄秋愉程伟志余奇文张继英张冬青陈雪华
- 关键词：细胞凋亡肿瘤免疫CASPASE-3
- 抗人gp130单克隆抗体的制备及其生物学特性分析被引量：2
- 2011年
- 目的:制备小鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体,并分析其生物学特性及初步的免疫学功能。方法:用gp130抗原免疫BALB/c小鼠,经三次免疫获得高效价的ELISA结果后,取小鼠的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经多次亚克隆筛选得到稳定分泌抗gp130单克隆抗体的杂交瘤细胞株。大量扩增杂交瘤细胞,收集细胞上清,随即过亲合层析柱进行纯化,对经纯化的抗人gp130单克隆抗体进行亚型鉴定,用Western blot及间接ELISA、biacore方法分析抗人gp130单克隆抗体的纯度、特异性及亲和力,用FACS术检测抗人gp130单克隆抗体与膜表面富含IL-6受体的U266细胞系的结合率,同时建立IL-6诱导的U266细胞增殖系统,用以检测和分析抗人gp130单克隆抗体的抑制和阻断效应。结果:本研究获得了多株能够稳定分泌抗人gp130单克隆抗体的细胞株,取其中一株(14C4)进行分析,表明其亚型属于IgG2b,轻链为κ链,经Western blot及间接ELISA证明此株抗体有较高的纯度及特异性,biacore结果显示14C4与抗原结合的亲和力为2.62E-10,FACS结果证实能与U266细胞表面的gp130特异性结合,并且呈剂量依赖性,细胞增殖实验说明14C4在一定程度上可抑制IL-6诱导的U266细胞的增殖。结论:初步成功制备了抗gp130单克隆抗体,并且具备较好的生物学特性,为研究人IL-6gp130在抗感染、炎症以及肿瘤和自身免疫病学中的诊断和治疗中的意义提供了有效的工具和手段。
- 苗平钱柳赵蓉余奇文张继英陈雪华陆梅生张冬青
- 关键词：IL-6GP130单克隆抗体特异性
