金坤林 作品数:33 被引量:43 H指数:4 供职机构: 温州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省教育厅科研计划 浙江省医学会临床科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
雌激素对缺血后抑郁大鼠行为学以及额叶杏仁核BDNF和pTrkB表达的影响 目的通过观察缺血性卒中后内源性抑郁大鼠额叶及杏仁核的脑源性生长因子(BDNF)、受体酪氨酸激酶B(TrkB)及磷酸化酪氨酸激酶B(pTrkB)的表达,探讨缺血性卒中后内源性抑郁的发病机制。方法将SD雌性大鼠随机分为对照组... 邵蓓 蒋慧刚 肖丽 程建华 金坤林生物素标记DNA探针快速诊断胎儿性别 被引量:3 1990年 本文用生物素代替同位素标记人Y染色体特异性DNA探针PY3.4和人男、女性均具有的ALu探针,进行正常人外周血和胎儿绒毛DNA样本的性别诊断,减少同位素特有的放射性损害和污染以及半衰期短等缺点,此种技术较常规的染色体核型分析周期短、特异性强,可用于性连锁遗传病的产前基因诊断。 金坤林 王申五 陆道培关键词:性别诊断 胎儿 生物素 DNA探针 mTOR信号通路对人类鼻咽癌细胞增殖的调控作用 被引量:2 2013年 目的:探讨mTOR信号通路在鼻咽癌细胞中是否激活以及mTOR抑制剂雷帕霉素对细胞增殖的调控作用。方法:利用原代培养的人类鼻咽癌细胞,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学法检测人类鼻咽癌细胞中mTOR信号通路活化情况;采用Western blot方法检测不同浓度雷帕霉素作用24 h后细胞中S6、pS6、mTOR、pmTOR蛋白的表达量;同时用CCK8检测雷帕霉素作用24 h后细胞的存活情况。结果:West-ern blot法检测结果显示S6、pS6、mTOR、pmTOR四种蛋白在原代培养的人类鼻咽癌细胞中呈阳性表达。免疫荧光进一步证实mTOR和pmTOR两种蛋白主要表达于鼻咽癌细胞浆中。当雷帕霉素浓度为0~100nmol/L时,随着药物浓度增加,四种蛋白的表达量逐渐下降,相应的细胞存活率也逐渐下降。但当雷帕霉素浓度超过100 nmol/L时,药物浓度增加对鼻咽癌细胞增殖抑制的影响无明显变化。雷帕霉素浓度为0和1 000 nmol/L时,鼻咽癌细胞的存活率存在较大差异。结论:mTOR信号在人类原发鼻咽癌细胞中呈激活状态,对这些细胞增殖起重要的调控作用。 江文静 杨春光 彭建华 张悦 金坤林关键词:鼻咽肿瘤 细胞培养技术 雷帕霉素 细胞增殖 重组DNA技术在遗传性疾病诊断上的应用 1992年 已确定的人类遗传性疾病已超过3000种~〔1,2〕过去仅极少数可用蛋白质或酶活性分析做孕妇产前诊断,来确定胎儿是否带有遗传病因素。对有遗传病的患者,常用人染色体核型分析来确诊,但这只能存有明显的染色体缺失,断裂或不正常的重组等情况下才会发现。有许多遗传病难以做产前诊断。随着重组DNA技术的发展。 金坤林关键词:遗传性疾病 染色体缺失 染色体核型分析 孕妇血 限制性内切酶 雌激素对卒中后抑郁大鼠神经再生作用的剂量相关性研究 目的探讨雌激素对脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)大鼠行为学和神经元再生的剂量相关性。方法双侧卵巢切除(ovariectomy surgery,OVX)的SD(Sprague-Dawle... 邵蓓 肖丽 蒋慧刚 程建华 金坤林雌激素对PSD大鼠行为学以及额叶杏仁核BDNF和pTrkB表达的影响 <正>目的通过观察缺血性卒中后内源性抑郁大鼠额叶及杏仁核的脑源性生长因子(BDNF)、受体酪氨酸激酶B(TrkB)及磷酸化酪氨酸激酶B(pTrkB)的表达,探讨缺血性卒中后内源性抑郁的发病机制。方法将SD雌性大鼠随机分为... 邵蓓 蒋慧刚 肖丽 程建华 金坤林文献传递 聚合酶链反应假阳性的防范 被引量:1 1992年 聚合酶链反应(PCR)技术目前广泛应用干各个研究领域,但是由于DNA 污染带来的假阳性结果日益引起人们关注.本文综述了PCR 假阳性产生的原因以及预防措施,从而使PCR 技术成为更高效,精确的研究手段。 刘晓荣 金坤林 王申五关键词:聚合酶链反应 假阳性 雌激素对脑卒中后抑郁大鼠抑郁行为学及前额叶BDNF表达的影响 被引量:5 2012年 目的:探讨雌激素对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠的影响及分子机制。方法:应用大脑中动脉栓塞和慢性不可预见温和刺激方法制备大鼠PSD模型。将PSD大鼠分为雌激素组(PSD大鼠皮下注射雌二醇),PSD组(PSD大鼠皮下注射大豆油)和对照组(假手术,皮下注射大豆油)。3组的不同干预均持续14 d。观察各组大鼠行为学和前额叶脑源性生长因子(BDNF)的含量改变。结果:雌激素组在雌二醇干预后强迫游泳测试结果表明行为学显著改善:不动时间减少,与PSD组比较(18.4±4.84 vs 52.1±5.38)差异有显著统计学意义(P<0.01);雌激素组挣扎时间增加,与PSD组比较(63.8±12.31 vs 36.3±5.22)差异有统计学意义(P<0.05)。前额叶BDNF含量在雌激素组也显著增高:雌激素组与PSD组比较,P<0.05;PSD组与对照组比较,P<0.01。结论:雌激素可能通过BDNF通路改善PSD大鼠的抑郁症状。 苏巧尔 邵蓓 金坤林 程建华 程一帆 林真珍 王柳青关键词:雌激素 脑卒中后抑郁 前额叶 多聚酶链反应技术及其在临床血液学上的应用 1990年 多聚酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是一种在体外由引物(primers)介导的特定DNA序列的酶扩增,又称基因扩增.这种技术能在数小时内合成一百多万个特定DNA序列考贝,既敏感,又快速、方便.因此,虽然PCR于1985年底首见报道,但其应用日趋广泛.本文就PCR原理、基本过程及其在临床血液学上的应用作一综述.PCR原理PCR扩增的DNA片段的特异性基于两个寡核苷酸引物,这两个引物位于待扩增的DNA片段的两侧,并与相应的DNA链互补.该过程包括:DNA热变性使之成为单链状,然后退火,使引物连接于与引物互补的特定DNA链上。 金坤林 王申五 陆道培关键词:血液学 聚合酶链反应 基因治疗的伦理问题 被引量:2 1990年 近几年来,随着重组DNA技术的发展,使我们加深了对人类遗传病分子病理的认识。用分子克隆技术能制造大量纯的、克隆化基因。 金坤林关键词:基因治疗 医学伦理学