郭亚文
- 作品数：8 被引量：46H指数：5
- 供职机构：天津科技大学食品工程与生物技术学院更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目天津市重大科技攻关项目天津市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 氢化可的松高转化菌株的选育及其发酵条件被引量：11
- 2004年
- 利用酮康唑抗性突变选育氢化可的松高转化菌株 ,即将经过紫外线诱变处理的新月弯孢霉原生质体倾注于含有酮康唑最小抑制浓度 (10 μmol/L)的培养基平板上 ,获得了 136株酮康唑抗性突变株 ,氢化可的松转化率高于出发菌株的有 14株 .其中抗性突变株KA - 91,其氢化可的松转化率为出发菌株的 1.4 2倍 ,达到 6 8.0 5 % .研究了菌株的发酵性能 ,优化了培养基组成和发酵工艺条件 ,氢化可的松转化率达到 73.6 % .图 7表 3参
- 王敏郭亚文卢文玉包慧珂杜连祥
- 关键词：诱变育种发酵条件新月弯孢霉
- 高效液相色谱法测定氢化可的松发酵液中的氢化可的松及其有关物质被引量：5
- 2003年
- 建立了用高效液相色谱法对氢化可的松发酵液中的主要组分氢化可的松(HC)、表氢化可的松(EHC)、17α 羟基孕甾 4 烯 3,20 二酮 21 醋酸酯(RSA)和17α 羟基孕甾 4 烯 3,20 二酮(RS)进行测定的方法。采用硅胶吸附色谱柱,以二氯甲烷 乙醚 甲醇 水(体积比为385∶60∶30∶2)为流动相,流速0 8mL/min,在242nm波长下检测。发酵液各组分分离良好,HC,EHC,RSA和RS的线性范围分别为25～375mg/L,5～75mg/L,5～75mg/L和5～75mg/L;检出限分别为0 4,0 1,0 05和0 02mg/L。方法准确,灵敏,重现性好。
- 卢文玉郭亚文王敏杜连祥
- 关键词：高效液相色谱法皮质激素类药物
- 甾体11-β羟化过程中底物溶解性的研究被引量：17
- 2004年
- 底物 17α 羟基孕甾 4 烯 3,2 0 二酮 2 1 醋酸酯 (RSA)的溶解是甾体C11 β羟基化转化工艺的控制步骤。对添加吐温 80、β 环糊精包埋、超声波振荡处理底物RSA 3种方法进行了研究 ,探索提高氢化可的松转化率的有效方法。
- 郭亚文卢文玉王敏杜连祥
- 关键词：甾体吐温80Β-环糊精超声波
- 氢化可的松高产菌株新月弯孢霉的选育被引量：5
- 2003年
- 应用酮康唑抗性筛选法,将经过紫外线诱变处理的甾体11β-羟基化菌株——新月弯孢霉的原生质体倾注在含有酮康唑最小抑制浓度(10μmol/L)的再生培养基平板上,再生出136株酮康唑抗性突变株。其中氢化可的松转化率高于出发菌株的有14株,正向突变率达到10.3％,同时获得了氢化可的松转化率为出发菌株1.42倍的遗传稳定突变株KA-91。
- 卢文玉陈泮成郭亚文王敏杜连祥
- 关键词：新月弯孢霉诱变
- 新月弯孢霉P450酶在甾体11β羟基化过程中的作用被引量：8
- 2003年
- 目的 :考察底物 17α 羟基孕甾 4 烯 3 ,2 0 二酮 2 1 醋酸酯 (RSA)对P450酶的诱导作用 ,探讨P450酶在细胞内作用的部位 ,进而研究P450酶与新月弯孢霉转化氢化可的松能力的关系。方法 :采用CO差光谱法对新月弯孢霉P450酶含量进行检测 ,分别在转化过程的不同时期加入不同浓度的RSA ,检测P450酶含量和氢化可的松产量。分别考察RSA在菌体细胞悬液和去菌体细胞上清液中的转化情况。结论 :RSA对P450酶具有诱导作用 ,在对数期初期 (12h)加入 0 5g/L的RSA对P450酶的诱导作用最佳 ,对细胞的生长抑制作用较小。P450酶是胞内酶。氢化可的松转化过程中 ,在对数生长期 ,P450酶含量平稳升高 ,进入产氢化可的松时期后 ,经过一段迟滞期 ,P450酶含量迅速增高。
- 卢文玉郭亚文陈泮成王敏杜连祥
- 关键词：新月弯孢霉甾体细胞色素P450酶
- 提高新月弯孢霉原生质体再生率的研究被引量：2
- 2003年
- 报道了氢化可的松生产菌新月弯孢霉的原生质体制备与再生条件。将培养 2 2h的菌丝体用0 .3mol L的二硫苏糖醇处理 2 0min ,0 .6mol L的KCl作为渗稳剂 ,30℃下经 0 .5 %新生酶 2 34和 1%溶壁酶混合液(pH5 .6 )酶解 3.5h ,原生质体释放量达到最大值 8.15× 10 6 个 ml,再生率为 2 3.0 7%。再生菌株菌落形态不变 ,保留了对底物RSA的羟化能力。
- 卢文玉郭亚文龚未王敏杜连祥
- 关键词：新月弯孢霉原生质体
- 新月弯孢霉抗性菌株选育及P450酶特性分析
- 本实验研究了新月弯孢霉细胞色素P450酶与甾体11β-羟基化的关系,选育具有酮康唑抗性标记的氢化可的松高产菌株KA-91,并对其发酵条件工艺优化.主要研究内容和结果如下:1、通过CO差光谱法检测到新月弯孢霉细胞中存在P4...
- 郭亚文
- 关键词：新月弯孢霉菌种选育发酵条件细胞色素P450
- 文献传递
- 底物加料方式对氢化可的松发酵的影响被引量：5
- 2004年
- 考察了甾体11b-羟基化过程中,底物17a,21-二羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯(2)投料时间、投料量及pH对细胞色素P-450(3)诱导和氢化可的松(1)产量的影响。在此基础上提出了生产1的诱导发酵改进方法:菌体生长至16h投入2 0.3g/L,培养至24h补加2 0.7g/L,培养至32h调至pH6.5,以后每12h调节一次。结果表明,在发酵周期不变(68h)的情况下,3蛋白量和1产量分别比一次投料法提高了11.2%和12.7%。
- 陈泮成卢文玉郭亚文王敏杜连祥
- 关键词：新月弯孢霉细胞色素P-450
