郭业磊
- 作品数:33 被引量:21H指数:4
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、CAR30-NKT细胞及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、CAR30-NKT细胞及其制备方法和应用,所述嵌合抗原受体为CD30ScFv-CD8-CD137-CD3ζ,包括串联的大鼠生长激素信号肽、CD30ScFv、CD8的铰链...
- 韩为东王晓慧王瑶伍志强郭业磊代汉仁王春萌
- 文献传递
- 体外扩增的效应细胞耐受功能稳定性研究
- 目的意义:我们用超抗原SEB活化并获得了一群具有耐受功能的效应细胞.本实验对新鲜、冻存和体外长期扩增的效应细胞功能的稳定性进行了研究.方法:用MTT法检查SEB活化10d、20d的效应细胞和冻存复苏后效应细胞对ConA和...
- 郭业磊陈钰钟江张世仑
- 关键词:超抗原免疫耐受SEB
- CARHER1-NKT细胞在制备用于治疗进展期HER1阳性肺癌的制剂中的应用
- 本发明公开了CARHER1‑NKT细胞在制备用于治疗进展期HER1阳性肺癌的制剂中的应用,其中,CARHER1‑NKT细胞是由嵌合抗原受体HER1ScFv‑CD8‑CD137‑CD3ζ修饰的NKT细胞,嵌合抗原受体HER...
- 伍志强王晓慧韩为东郭业磊王瑶代汉仁丰恺超
- 文献传递
- 嵌和体水平及供受者基因配型相合程度对小鼠移植物抗宿主病的影响被引量:1
- 2008年
- 目的探讨小鼠半相合、异基因骨髓移植后受体嵌和体水平及供受者基因配型相合程度对小鼠移植物抗宿主病影响。方法以BALB/C小鼠为受鼠,以CB6F1小鼠为供鼠,A组给予全身照射4.0 Gy预处理方案,B组给予全身照射8.0 Gy,所有受鼠在第0天经尾静脉注射CB6F1小鼠骨髓细胞细胞悬液(5×106),C组以CB6F1小鼠为供鼠,D组以C57BL/6小鼠为供鼠,均给予全身照射(8.0 Gy),观察所有受鼠移植后的嵌合体水平及GVHD的情况。结果A组形成混合型嵌合体,移植2周达高峰,随后有下降趋势,B、C及D组为完全供者型嵌合体(>90%),且持久稳定;A、B两组间临床GVHD评分有显著差异(P<0.05);D组临床GVHD评分和死亡率明显高于A、B及C组(P<0.05)。结论嵌和体水平与移植后GVHD的发生有关;供受者基因配型相合程度对嵌合体水平无影响,但与GVHD的发生有关。
- 王希友杨勇黄建华洪宝发李峤陈新静马林郭业磊翟飞
- 关键词:造血干细胞移植动物模型移植物抗宿主病
- 体外扩增小鼠CD8^+NK1.1^+NKT细胞的研究
- 2010年
- 目的研究体外扩增小鼠CD8+NK1.1+NKT细胞的表面分子标志、分化途径及细胞属性。方法获取超抗原SEB活化后体外扩增的小鼠效应细胞,用抗CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRVβ8-FITC和CD69-FITC荧光抗体染色后,用流式细胞仪(FCMCalibueBD,USA)鉴定CD8+NK1.1+NKT细胞的表面分子标志和分化途径。用逆转录聚合酶链反应测定细胞内各种细胞因子和Foxp3基因转录水平。结果体外扩增的细胞中91.92%是CD8+T细胞,其中22.75%的细胞是CD8+NN1.1+NKT细胞,高于正常值(0.21±0.19,n=12)108倍以上。19.61%NKT细胞是TcRVβ8+NN1.1+NKT细胞。CD69分子的表达由原始0.11%增加到85.95%。CD4+T、CD3+T细胞亚群和CD4+NKT、CD3+NKT及CD4-CD8-NKT细胞亚群没有增加。扩增细胞TGF-β的mRNA表达呈阳性,不表达Foxp3和细胞因子IL-2、4、5、6、10及IFN-γ。CD8+NKT细胞直接由CD8+T细胞分化而来。结论 CD8+NK1.1+NKT细胞的分子特征为CD69+Foxp3-TcRVβ8+TGF-β+CD8+NK1.1+;它们既不是CD8+T调节细胞(Treg.),也不是CD4+NKT细胞,直接由CD8+T细胞分化而来,带有TCRVβ8受体,应属于T细胞亚群。
- 陈钰郭业磊钟江张世仑
- 关键词:小鼠葡萄球菌肠毒素B免疫耐受
- CARHER1-NKT细胞在制备用于治疗进展期HER1阳性胆管癌的制剂中的应用
- 本发明公开了CARHER1-NKT细胞在制备用于治疗进展期HER1阳性胆管癌的制剂中的应用,其中,CARHER1-NKT细胞是由嵌合抗原受体HER1ScFv-CD8-CD137-CD3ζ修饰的NKT细胞,嵌合抗原受体HE...
- 韩为东丰恺超郭业磊王晓慧王瑶代汉仁
- 文献传递
- 瘤内注射树突状细胞联合放疗对小鼠肾癌TNF-α表达的影响被引量:1
- 2008年
- 目的研究放疗增强DC疫苗治疗小鼠肾癌的作用机理。方法Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,分别用单纯放疗、单纯DC和DC瘤内注射联合放疗等方法治疗,第28天牺牲小鼠。体外培养2×106Renca肾癌细胞,经20 Gy X射线单次照射培养24 h后,收获细胞。提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫组化和免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织中TNF-α、CD3、CD11和F4/80蛋白的表达水平。结果DC瘤内注射联合放疗有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调。结论放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,瘤内注射DC联合放疗的增效作用与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关。
- 黄建华王瑶吕海燕郭佳郭业磊马林
- 关键词:树突状细胞肾癌TNF-Α
- 耐受性CD8^+ NKT细胞体外增殖能力的鉴定
- 2011年
- 目的:利用CFSE标记细胞,流式细胞术(FCM)检测法,解析超抗原SEB活化的耐受性CD8+ NKT细胞在体外增殖的情况。方法:利用CFSE标记新鲜分离的C57BL/J鼠脾细胞,分别与ConA和LPS共同培养3d,收集细胞进行荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69分子的表达率和增殖能力。CFSE标记的鼠脾细胞与SEB共培养5d和10d后,荧光染色并用FCM解析细胞表面CD69的百分数和增殖能力。SEB活化的第10天细胞经CFSE标记后在IL-2的协同作用下继续培养10d,荧光染色,FCM解析这群细胞的增殖能力、活性分子CD69的表达率和NKT细胞亚群的变化情况。结果:ConA、LPS和SEB三者均可以刺激小鼠脾细胞增殖。ConA和LPS在3d内可以使细胞增殖3代,且CD69的表达率为74.19%和41.56%;SEB在5d和10d内分别可以使细胞增殖5代和7代,细胞表面CD69的表达率为32.09%和48.66%。SEB活化的10d细胞可以在IL-2的协同下继续传代培养10d,可以增殖7代;这群细胞中CD8+ NKT细胞亚群,由原始的0.36%增加到38.58%;细胞表面CD69分子由正常值的0.11%提高到83.74%。结论:超抗原SEB活化的CD8+ NKT细胞可以在体外进行增殖培养,且这些细胞是活性化的细胞。利用CFSE标记细胞,FCM可以检测耐受性CD8+ NKT细胞在体外的增殖水平。
- 郭业磊陈钰钟江张世仑
- 关键词:CD8+NKT细胞超抗原SEBCFSE
- 超抗原SEB诱导的免疫耐受与细胞因子无关被引量:4
- 2009年
- 目的研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)诱导的耐受效应和耐受调节机制。方法收集SEB活化10天的细胞,充分洗涤后做为效应细胞,分别与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养,用MTT方法测定细胞的耐受性应答反应。正常淋巴细胞在与ConA、LPS、IL-2共同培养的同时添加效应细胞,用MTT方法测定效应细胞的抑制性应答反应功能。流式细胞技术解析耐受性效应细胞类型。结果效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低(P<0.01,n=3),但保持对ConA的应答反应能力。效应细胞抑制正常淋巴细胞与ConA、LPS和IL-2的应答反应(P<0.01,n=3),尤其抑制ConA和IL-2诱导的细胞增殖。SEB活化的效应细胞中CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+和CD4+NK1.1+NKT细胞以及TcRVβ8+T、CD8+T细胞数量明显增加(P<0.01和P<0.05,n=4)。结论超抗原SEB诱导的耐受性应答反应是效应细胞的直接作用,与细胞因子无关;这些效应细胞能抑制T淋巴细胞增殖,并保存识别ConA的受体功能。
- 陈钰郭业磊钟江陈中才
- 关键词:超抗原SEB免疫耐受细胞因子NKT细胞
- 嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、CAR20-NKT细胞及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、CAR20-NKT细胞及其制备方法和应用,所述嵌合抗原受体为CD20ScFv-CD8-CD137-CD3ζ,包括串联的大鼠生长激素信号肽、CD20ScFv、CD8的铰链...
- 伍志强韩为东王晓慧王瑶郭业磊代汉仁张文英
- 文献传递