郑秀红
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：延边大学农学院动物医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛附红细胞体单管套式PCR检测方法的建立被引量：2
- 2011年
- 为快速、准确地检测出牛附红细胞体,根据GenBank上发表的牛温氏附红细胞体(Mycoplasma wenyonii)l6S rRNA基因序列(登录号AF016546)设计合成内外2对引物,建立了牛附红细胞体单管套式PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性及应用试验。结果:建立的牛附红细胞体单管套式PCR检测方法扩增的片段大小为361 bp,与GenBank中相应序列同源性为98%,该方法扩增不出牛瑟氏泰勒虫、新孢子虫、布氏杆菌及牛无乳链球菌等基因片段,检测出标准模板DNA的最小量为1.22 fgμ/L。通过对吉林省延边地区66份血液样本的临床检测显示,单管套式PCR检出率28.8%,高于常规PCR的21.2%和鲜血压片镜检的12.1%,具有准确、特异、敏感等优点,是检测牛附红细胞体的一种新型、可靠的诊断技术。
- 邢莹郑秀红贾立军薛书江张守发
- 关键词：RRNA
- 东北三省部分地区猪附红细胞体16S rRNA核苷酸序列比较分析
- 2010年
- 为了解东北三省猪附红细胞体基因的流行变异情况,本试验选取相对保守的16S rRNA核苷酸序列作为分析对象,采用酚仿抽提法提取吉林株、辽宁株和黑龙江株猪附红细胞体基因组DNA,用一对特异性引物扩增目的DNA,然后分别与pMD-18T载体连接并转化BL-21菌株,经重组质粒PCR鉴定后并测序,比较其核苷酸序列。从同源性分析结果可以看出,黑龙江株、辽宁株与广东株猪附红细胞体核苷酸同源性最高,均达到100%;吉林株与美国株猪附红细胞体的核苷酸同源性最高,为97%。系统进化分析结果显示,黑龙江株与辽宁株猪附红细胞体亲缘关系最近,而与吉林株猪附红细胞体较远。结果表明,吉林株、辽宁株和黑龙江株猪附红细胞体16S rRNA基因序列存在差异。
- 李月梅邢莹张守发薛书江郑秀红吕舟
- 关键词：附红细胞体RRNA核苷酸序列东北三省
- 猪附红细胞体基因组文库的初步构建及特异性基因的筛选应用
- 猪附红细胞体病(Eperythrozoon)是由猪附红细胞体寄生于猪红细胞的表面、血浆及骨髓内,以贫血、黄疸、发热等为主要临床特征的人畜共患传染病。目前对该病的研究尚不深入,可供研究的基因片段少,极大的制约了附红细胞体病...
- 郑秀红
- 关键词：猪附红细胞体基因组文库特异性基因
- 文献传递
- 猪附红细胞体巢式PCR诊断方法的建立及初步应用被引量：2
- 2011年
- 为建立一种更加准确、敏感的猪附红细胞体检测方法,本试验根据猪附红细胞体特异的DNA序列(AJ504999)设计2对巢式PCR引物,建立了巢式PCR检测方法。筛选该检测方法的最佳反应条件,并进行了特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的巢式PCR对猪附红细胞体基因组DNA能扩增出特异性片段,而对弓形虫、链球菌、牛瑟氏泰勒虫、牛附红细胞体基因组DNA扩增反应结果均为阴性;DNA最低检测量为0.124 fg/μL;通过对55份临床样本的检测,该巢式PCR较常规PCR的阳性检出率高23.7%。本试验为猪附红细胞体病的诊断提供了一种更为特异、敏感的检测技术。
- 郑秀红邢莹贾立军薛书江甄立家张守发
- 关键词：猪附红细胞体巢式PCR
- 猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法的建立及应用被引量：9
- 2011年
- 根据GenBank上发表的猪附红细胞体16S rRNA基因序列(登录号U88565)设计合成2对引物,建立了猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法,经酶切分析、单管巢式PCR进一步鉴定后进行序列测定,并与血涂片染色镜检、常规PCR进行了比较。结果:扩增的猪附红细胞体基因序列与GenBank中发表的猪附红细胞体基因序列(U88565)同源性为96%;特异性试验表明,设计的引物不能扩增弓形虫、链球菌、大肠杆菌、葡萄球菌及羊附红细胞体等病原体;敏感性试验表明,单管巢式PCR诊断方法最低能够检测出0.116 fg的标准模板DNA。通过对75份血液样本的检测表明,建立的单管巢式PCR方法明显优于血涂片染色镜检法及常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性。本试验建立的单管巢式PCR诊断方法具有特异、敏感、实用等优点,为猪附红细胞体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。
- 郑秀红贾立军邢莹张守发
- 关键词：猪附红细胞体
- 猪附红细胞体亚单位疫苗对Balb/c小鼠的免疫试验被引量：2
- 2010年
- 为检测猪附红细胞体亚单位疫苗对Balb/c小鼠的免疫保护作用,试验将猪附红细胞体抗原与白油佐剂混合制备亚单位疫苗后免疫Balb/c小鼠,应用间接ELISA方法测定体液免疫水平,并进行攻毒试验。结果表明:在三免后第7天时,检测抗体的OD410值达0.697;攻毒7d后,PCR检测30只Balb/c小鼠的血液,共有7只为阳性,保护率为76.70%。说明猪附红细胞体亚单位疫苗对Balb/c小鼠具有一定的保护作用。
- 郑秀红贾立军李月梅张守发
- 关键词：猪附红细胞体亚单位疫苗免疫保护
- 猪附红细胞体环介导等温扩增快速检测方法的建立被引量：5
- 2010年
- 为了建立猪附红细胞体的快速实用分子生物学检测方法,试验采用环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法,用10倍系列稀释的DNA样品对该检测方法的灵敏度进行了测试,同时对新孢子虫、弓形虫、瑟氏泰勒虫病原体进行检测以验证LAMP技术的特异性。结果表明:利用LAMP技术成功检测到猪附红细胞体基因区,此方法的灵敏度可达到5×105倍稀释的DNA分子水平,并且特异性强,对新孢子虫、弓形虫、瑟氏泰勒虫病原体检测均为阴性。
- 李月梅薛书江邢莹郑秀红吕舟张守发
- 关键词：猪附红细胞体环介导等温扩增技术
- 不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响被引量：3
- 2009年
- 为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,本试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明:白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。
- 吕舟郑秀红王海军丁德张守发
- 关键词：猪附红细胞体佐剂免疫效果
- 不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响
- 2009年
- 为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,笔者通过试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明:白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为与弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。
- 吕舟郑秀红王海军张守发
- 关键词：猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果间接ELISA方法免疫小鼠
- 牛附红细胞体LAMP检测方法的建立被引量：5
- 2011年
- 为建立一种快捷、灵敏的牛附红细胞体检测方法,本研究根据GenBank上发表的16S rRNA基因(登录号:AF016546)序列设计合成2对LAMP特异引物,建立了检测牛附红细胞体环介导等温扩增(LAMP)方法,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验。LAMP扩增产物经电泳、显色鉴定。结果显示,LAMP方法扩增牛附红细胞体产物呈特征性梯状条带,显色反应呈现绿色荧光;敏感性检测最低浓度为25.6 fg/μL;特异性试验结果显示,牛附红细胞体检测管显色后呈阳性,而猪附红细胞体、牛新孢子虫、弓形虫及牛瑟氏泰勒虫等对照组均呈阴性,说明本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛附红细胞体的检测。
- 郑秀红甄立家邢莹薛书江贾立军张守发
- 关键词：16SRRNA基因环介导等温扩增技术
