郑云鹏 作品数:15 被引量:26 H指数:3 供职机构: 郑州大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
环磷酰胺治疗寻常型天疱疮的临床应用 被引量:2 2013年 对于中重度及系统应用糖皮质激素治疗抵抗的寻常型天疱疮患者,临床上常联合免疫抑制剂治疗。环磷酰胺联合地塞米松冲击疗法应用广泛,临床试验证实有效。联合环磷酰胺可以减少糖皮质激素激素的用量,优于环孢素、硫唑嘌呤。一般不推荐口服环磷酰胺。国内缺乏设计科学的随机对照临床试验。其不良反应需要长期随访,尤其应警惕发生严重感染、致癌和生育能力受损。概述环磷酰胺的使用方法、对地塞米松环磷酰胺冲击治疗的相关评估、常规用法、不良反应及预防等,尤其权重随机对照临床试验、诊疗指南及系统评价文献。 任发亮 黄丹 郑云鹏 顾恒关键词:天疱疮 寻常 环磷酰胺 circ_0007059/miR-421对皮肤鳞状细胞癌发生及发展的影响 被引量:2 2021年 目的探讨circ_0007059/miR-421对皮肤鳞状细胞癌(简称皮肤鳞癌)细胞生物学行为的影响及其对PDCD4的调控作用。方法采用qRT-PCR法检测皮肤鳞癌组织、癌旁组织中circ_0007059与miR-421的表达量;采用免疫组织化学法检测皮肤鳞癌组织中PDCD4蛋白阳性率;体外培养皮肤鳞癌细胞SCC-13,随机分为以下几组:pcDNA组、pcDNA-circ_0007059组、si-NC组、si-circ_0007059组、anti-miR-NC组、anti-miR-421组、pcDNA-circ_0007059+miR-NC组、pcDNA-circ_0007059+miR-421组。采用qRT-PCR法与Western blot实验分别检测细胞中circ_0007059、miR-421、PDCD4的表达量;采用MTT实验、平板克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验、Transwell小室实验分别检测增殖、克隆形成、凋亡、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0007059与miR-421的靶向关系,以及miR-421与PDCD4的靶向关系。结果与癌旁组织比较,皮肤鳞癌组织中circ_0007059的表达水平降低,miR-421的表达水平升高,PDCD4蛋白阳性率降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与pcDNA组比较,pcDNA-circ_0007059组miR-421的表达水平降低,PDCD4蛋白水平升高,细胞活力降低,集落形成数与侵袭细胞数减少,迁移距离减小,凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0007059组miR-421的表达量升高,PDCD4蛋白水平降低,细胞活力升高,集落形成数和侵袭细胞数增多,细胞凋亡率降低,迁移距离增加,差异均有统计学意义(P<0.05);circ_0007059可靶向结合miR-421,PDCD4是miR-421的靶基因;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-421组PDCD4蛋白水平升高,细胞活力降低,集落形成数与侵袭细胞数减少,迁移距离减小,凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与pcDNA-circ_0007059+miR-NC组比较,pcDNA-circ_0007059+miR-421组PDCD4蛋白水平降低,细胞活力升高,集落形成数与侵袭细胞数增多,迁移距离增长,凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论circ_0007059过表达可调� 李旭阳 尹光文 郑云鹏 金芳草 李冬芹 蔡丙杰关键词:皮肤鳞状细胞癌 增殖 凋亡 LncRNA DSCAM-AS1在寻常型银屑病皮损组织中的表达及其对IL-22诱导的角质形成细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1 2022年 目的:探讨LncRNA唐氏综合征细胞黏附分子反义RNA 1(DSCAM-AS1)在寻常型银屑病皮损组织中的表达,并观察其对白细胞介素22(IL-22)诱导的角质形成细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:采用qRT-PCR法分别检测37例寻常型银屑病患者皮损组织、37例行整形手术者正常皮肤组织以及IL-22(100μg/L)刺激24 h的角质形成细胞HaCaT、未处理HaCaT细胞中DSCAM-AS1和miR-199b-3p的表达水平。体外培养HaCaT,分别转染DSCAM-AS1小干扰RNA、miR-199b-3p模拟物或共转染DSCAM-AS1小干扰RNA与miR-199b-3p抑制剂后,用100μg/L的IL-22干预24 h,分别设相应阴性对照,并以未处理细胞为空白对照。采用qRT-PCR法检测细胞中DSCAM-AS1和miR-199b-3p表达,CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测CyclinD1、Bax、Bcl-2及IL-6R/STAT3信号通路相关蛋白IL-6R和STAT3蛋白的表达。利用双荧光素酶报告实验验证DSCAM-AS1和miR-199b-3p的靶向调控关系。结果:与正常皮肤组织比较,寻常型银屑病皮损组织中DSCAM-AS1表达增加,miR-199b-3p表达降低(P<0.05);HaCaT细胞经IL-22刺激后,DSCAM-AS1表达增加,miR-199b-3p表达降低(P<0.05)。敲减DSCAM-AS1或过表达miR-199b-3p可降低IL-22刺激的HaCaT细胞增殖能力及CyclinD1、Bcl-2、IL-6R和STAT3蛋白表达,提高细胞凋亡率及Bax蛋白表达(P<0.05)。DSCAM-AS1靶向结合并负调控miR-199b-3p。敲减miR-199b-3p可部分逆转DSCAM-AS1沉默对IL-22刺激的HaCaT细胞增殖、凋亡及IL-6R/STAT3信号通路的影响(P<0.05)。结论:DSCAM-AS1在寻常型银屑病皮损组织及IL-22刺激的HaCaT细胞中表达增加,敲减其表达可抑制IL-22刺激的HaCaT细胞增殖,并促进细胞凋亡,其机制与靶向miR-199b-3p并阻断IL-6R/STAT3信号通路有关。 李旭阳 郑云鹏 金芳草 尹光文关键词:银屑病 角质形成细胞 lncRNA HCP5靶向miR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 2024年 目的:探讨lncRNA HCP5靶向mlR-409-3p对皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR法检测CSCC细胞(SCC13、A431、HSC-5)中HCP5和miR-409-3p的表达情况,筛选用于实验的CSCC细胞。将抑制HCP5表达的质粒si-HCP5及其对照(si-NC)、过表达miR-409-3p的miR-409-3p模拟物及其对照(miR-NC)、抑制HCP5和miR-409-3p的si-HCP5+anti-miR-409-3p及其对照(si-HCP5+anti-miR-NC)分别转染SCC13细胞。采用CCK-8法和Transwell实验检测SCC13细胞增殖、迁移、侵袭能力,Western blot法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证HCP5和miR-409-3p的靶向关系。结果:SCC13细胞中HCP5表达最高,miR-409-3p表达最低(P<0.05)。抑制HCP5表达后SCC13细胞增殖能力降低,细胞迁移数和侵袭数减少,CycIinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-409-3p后SCC13细胞增殖能力降低,细胞迁移数和侵袭数减少,CycinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示lncRNA HCP5和miR-409-3p存在靶向关系。抑制miR-409-3p表达可减弱HCP5低表达对SCC13细胞增殖以及迁移、侵袭能力的影响(P<0.05)。结论:抑制HCP5可通过靶向促进miR-409-3p表达来抑制CSCC细胞增殖、迁移和侵袭。 郑云鹏 李旭阳 尹婕 贾苇雪 李冬芹 尹光文关键词:皮肤鳞状细胞癌 增殖 西罗莫司对UVB照射HaCaT细胞自噬的影响 2013年 目的探讨西罗莫司能否增加中波紫外线(UVB)照射下HaCaT细胞的自噬水平。方法0、25、50mJ/cm^2 UVB照射HaCaT细胞,单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色法检测自噬。设置空白组、DMSO组、25mj/cm^2 UVB组、25mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组、50mJ/cm2UVB组、50mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组共6组,MDC染色法检测自噬,并比较各组自噬水平。结果结果UVB照射HacaT细胞后出现了自噬,0、25、50mJ/cm^2照射组自噬体阳性细胞分别为1.07%±1.85%、9.37%±1.14%、16.29%±3.03%,3个剂量间差异有统计学意义;6组自噬体阳性细胞百分率分别为:0.56%±0.79%、1.61%±2.27%、10.00%±0.47%、21.18%±3.03%、15.82%±4.13%、29.45%±1.24%,各组两两比较差异均有统计学意义,且25mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组、50mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组的自噬水平均高于相应UVB组。结论UVB辐照HaCaT细胞后出现MDC染色自噬体阳性细胞,西罗莫司可能增加UVB照射下HaCaT细胞后的自噬水平。 任发亮 黄丹 陈旭 郑云鹏 陈崑 鞠梅 常宝珠 李新宇 顾恒关键词:角蛋白细胞 自噬 西罗莫司 α硫辛酸对人皮肤成纤维细胞自噬的影响 被引量:1 2015年 目的:评价α硫辛酸对人皮肤成纤维细胞自噬水平的影响。方法人皮肤成纤维细胞与终浓度分别为0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L 的α硫辛酸孵育4、12和24 h 后,采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性,单丹酰戊二胺(MDC)染色法检测细胞自噬水平,Western 印迹法检测微管相关蛋白1轻链3-B(LC3-B)表达。结果孵育4 h 和12 h 时,0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L α硫辛酸组间人皮肤成纤维细胞增殖活性(A490值)差异均无统计学意义(F 值分别为2.85、1.34,均 P 〉0.05);孵育24 h 时,各组间差异有统计学意义(F =10.41,P 〈0.01)。MDC 法检测显示,孵育4 h 和12 h 时,0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L α硫辛酸组间自噬体阳性细胞百分率差异均无统计学意义(F 值分别为0.11、0.10,均 P 〉0.05);孵育24 h 时,各组间差异有统计学意义(F =8.03,P 〈0.05)。Western 印迹法检测显示,孵育4 h 和12 h 时,0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.50 mmol/L α硫辛酸组间细胞 LC3-Ⅰ向 LC3-Ⅱ转化(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)水平差异均无统计学意义(F 值分别为3.38、2.13,均 P 〉0.05),但孵育24 h 时各组间差异有统计学意义(F =37.49,P 〈0.01)。结论α硫辛酸可能抑制人皮肤成纤维细胞基础自噬。 郑云鹏 陈旭 黄丹 徐松 顾恒关键词:自噬 成纤维细胞 lncRNA DLX6-AS1通过靶向miR-16-5p/NUCKS1调控皮肤鳞状细胞癌细胞A431增殖、迁移和侵袭 被引量:4 2020年 目的研究长链非编码生长停滞特异性蛋白6反义RNA1(lncRNA DLX6-AS1)对皮肤鳞状细胞癌细胞A431增殖、迁移和侵袭的影响及潜在机制。方法以双荧光素酶报告系统实验验证lncRNA DLX6-AS1与miR-16-5p、miR-16-5p与核酪蛋白激酶和细胞周期蛋白依赖性激酶底物1(NUCKS1)mRNA的靶向结合。通过单独或联合转染lncRNA DLX6-AS1抑制物(si-DLX6-AS1)、miR-16-5p抑制物(anti-miR-16-5p)、NUCKS1抑制物(si-NUCKS1)和相应对照(DLX6-AS1-NC、anti-miR-NC、NUCKS1-NC)调控A431细胞目的基因的表达,采用qRT-PCR检测A431细胞lncRNA DLX6-AS1、miR-16-5p、NUCKS1 mRNA的表达;Western印迹检测NUCKS1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)抗体、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9蛋白水平;CCK8实验检测细胞存活率;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。两组间比较采用独立样本t检验。结果双荧光素酶报告系统实验显示,lncRNA DLX6-AS1靶向结合miR-16-5p,miR-16-5p靶向结合NUCKS1。si-DLX6-AS1组A431细胞miR-16-5p表达水平(3.01±0.31)高于DLX6-AS1-NC组(1.02±0.10,t=18.33,P<0.001);NUCKS1、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白相对水平均低于DLX6-AS1-NC组(均P<0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数亦低于DLX6-AS1-NC组(均P<0.05)。si-NUCKS1组A431细胞NUCKS1、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白相对水平均低于NUCKS1-NC组(均P<0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数亦低于NUCKS1-NC组(均P<0.05)。低表达lncRNA DLX6-AS1后,anti-miR-16-5p组A431细胞miR-16-5p表达(0.34±0.04)低于anti-miR-NC组(1.00±0.12,t=15.65,P<0.05),Cyclin D1、MMP2和MMP9相对表达水平均高于anti-miR-NC组(均P<0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数均高于anti-miR-NC组(均P<0.05)。低表达lncRNA DLX6-AS1、敲减miR-16-5p后,si-NUCKS1组A431细胞NUCKS1、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白相对水平均低于NUCKS1-NC组(P<0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数均低于NUCKS1-NC组(P<0.05)。结论lncRNA DLX6-AS1可通过靶向miR-16-5p/NUCKS1调控A431细胞增殖、迁移� 郑云鹏 蔡丙杰 李旭阳 李冬芹 尹光文关键词:肿瘤侵润 西罗莫司诱导自噬对UVB辐照下HaCaT细胞增殖和凋亡的初步影响 被引量:3 2013年 目的:研究西罗莫司诱导自噬对UVB致HaCaT细胞光损伤的干预作用。方法:设置6组,分别为空白组、二甲基亚砜(DMSO)组、25mJ/cm^2 UVB组、25 mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组、50mJ/cm^2 UVB组、50mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组。单丹(磺)酰戊二胺(MDC)法检测不同处理后HaCaT细胞的自噬并比较各组自噬水平。噻唑蓝(MTT)法检测不同处理后HaCaT细胞的增殖活性。Hochest、碘化丙啶(PI)染色观察HaCaT细胞的凋亡和坏死。结果:MDC染色结果可见西罗莫司处理组的自噬体阳性细胞百分率分别高于相应UVB照射组。MTT法检测到25 mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组的细胞增殖抑制率低于25 mJ/cm^2 UVB组,而50mJ/cm^2 UVB+西罗莫司组高于50 mJ/cm^2 UVB组。Hochest染色观察到西罗莫司处理组的凋亡百分率分别低于相应UVB组。PI染色可见UVB照射组出现坏死细胞,而西罗莫司干预组未见坏死细胞。结论:西罗莫司诱导自噬可减轻25 mJ/cm^2 UVB辐照对HaCaT细胞增殖能力的抑制,而在50mJ/cm^2 UVB辐照下加重对细胞的抑制。西罗莫司诱导自噬可明显减轻25、50mJ/cm^2 UVB辐照下HaCaT细胞的凋亡和坏死,对UVB损伤有保护作用。 任发亮 黄丹 陈旭 郑云鹏 陈崑 鞠梅 常宝珠 李新宇 顾恒关键词:角质形成细胞 自噬 西罗莫司 长波紫外线对人皮肤成纤维细胞自噬水平的影响 被引量:2 2015年 目的 探讨长波紫外线(UVA)对人皮肤成纤维细胞(HSF)自噬水平的影响。 方法 HSF慢性UVA照射分组:未照射组、5 J/cm^2组、10 J/cm^2组和20 J/cm^2组,每天照射1次连续4 d;HSF急性照射分组:未照射组、5 J/cm^2组、10 J/cm^2组、30 J/cm^2组和60 J/cm^2组,单次照射。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐分析法(MTT)检测细胞增殖活力。单丹酰戊二胺染色法(MDC)检测细胞自噬体。Western印迹法检测细胞LC3蛋白LC3-I向LC3-II转化分析(LC3-II/LC3-I)。 结果 与未照射组HSF比较,5、10、20 J/cm^2慢性UVA照射组细胞增殖活力降低(F = 155.5,P 〈 0.05)。与未照射组HSF比较,5、10、30、60 J/cm^2急性UVA照射后1、6和12 h,细胞增殖活力均降低(F值分别为1 335、1 649、2 774、均P 〈 0.05)。MDC法标记细胞自噬囊泡,与未照射组比较,5、10、20 J/cm^2慢性照射均可上调细胞自噬水平(F = 748.62,P 〈 0.05),而5、10、30、60 J/cm^2急性照射后1、6和12 h对细胞自噬水平无明显影响(F值分别为0.014、0.004、0.002,均P > 0.05)。5、10和20 J/cm^2慢性照射组LC3-I向LC3-II转化(LC3-II/LC3-I)均增加(t 值分别为9.002、21.772、18.33,均P 〈 0.05),细胞自噬水平上调。与未照射组比较,5、10、30、60 J/cm^2急性照射后1、6和12 h,细胞LC3-I向LC3-II转化均无明显变化(F值分别为0.13、0.27、0.06,均P > 0.05),对细胞自噬水平无明显影响。 结论 慢性UVA照射可上调HSF自噬水平,急性UVA照射HSF自噬无明显变化。 郑云鹏 陈旭 黄丹 徐松 顾恒关键词:紫外线 自噬 成纤维细胞 细胞增殖 儿童高免疫球蛋白E综合征四例并文献复习 被引量:1 2020年 回顾性分析总结2010年1月至2019年7月于郑州大学第一附属医院住院的4例儿童高IgE综合征(HIES)的临床资料,患儿均出生后6个月内反复发生皮肤和呼吸道感染。1例患儿并发严重的二尖瓣重度关闭不全伴心肌梗死,1例患儿并发肾脓肿,3例患者并发复发性肝脓肿,其中1例口服复方新诺明治疗后获得了缓解。对于反复出现不明原因感染的患儿应尽早行HIES相关基因筛查,明确诊断后可给予针对性抗感染治疗。 钱丽 李冬芹 郑云鹏 宋朋翀关键词:高IGE综合征 心脏异常