赵立平
- 作品数:95 被引量:178H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>
- 抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途
- 本发明公开了抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途。本发明分泌抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC No.3543。通过EL1SA和Western-blot方法鉴定证明:本发明单...
- 郭巍相文华才琳赵立平闫妍黄文强
- 文献传递
- 我国马流感病毒不同分离株生物学
- 相文华杨建德尹训南王晓钧崔尚金曲连东贾斌赵立平薛飞朱远茂吕晓玲褚桂芳沈荣显
- 本项目分离到了青海马流感病毒株并采用病毒分离鉴定、血清学、病理学、动物感染试验、反转录-聚合酶链式反应、核酸序列比较分析等综合性手段,对该病毒株进行了深入的研究,证明该毒株为H_3N_8。经过基因组进行比较研究发现,该毒...
- 关键词:
- 关键词:马流感分离株生物学特性
- 中国华南、华中、东北和西北地区马动脉炎病毒(EAV)感染马血清流行病学调查被引量:6
- 2012年
- 马病毒性动脉炎(EVA)是一种由马动脉炎病毒(EAV)引起马属动物主要通过呼吸系统和生殖系统传播的传染病,是危害养马业及赛马业的重要疾病之一。本试验应用纯化EAV全病毒为抗原建立EAV-IgG间接ELISA方法与西班牙INGEZIM-ARTERITIS试剂盒分别检测华南、华中、东北和西北地区共计383份马血清样品。其结果为:华南地区赛马动脉炎阳性率为26%,华中地区赛马动脉炎阳性率为0,东北地区役用马动脉炎阳性率为8.26%,西北地区役用马动脉炎阳性率为7.55%。鉴于此,有必要加强EVA检测,掌握EVA在我国分布,以有效的预防和控制本病传播。
- 李红梅侯玉杰时成龙郭巍胡兰赵立平相文华
- 关键词:赛马马动脉炎病毒流行病学调查
- 马传染性贫血琼扩抗原生产工艺的改进被引量:2
- 2005年
- 赵立平许井君朱远茂相文华薛飞杨建德王晓钧吕晓玲木拉提沈荣显
- 关键词:传染性贫血琼扩抗原生产工艺传染性贫血病毒
- 中国株EIAV S2基因逆向突变感染性克隆的构建及体外感染性评价被引量:3
- 2009年
- 以中国株EIAV的驴强毒株EIAVDV115与疫苗株EIAVFDDV15的S2基因变化规律为依据,利用反向遗传技术对EIAV弱毒疫苗株全基因组感染性克隆pFDDV3-8的S2基因区进行逆向突变,构建了含有强毒株EIAVDV115S2基因区内4个稳定点突变的克隆质粒pFDDVS2r1-3-4-5,将该质粒转染FDD后进行体外继代盲传,经RT-PCR、逆转录酶活性、间接免疫荧光等检测后,显示经EIAV克隆质粒pFDDVS2r1-3-4-5转染的FDD盲传3代后,可在转染的FDD细胞培养物的上清液中检测到EIAV逆转录酶活性;该细胞培养物经RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈EIAV阳性;在电镜下可观察到典型EIAV粒子。证明已成功拯救经EIAVS2基因逆向突变后的衍生病毒vpFDDVS2r1-3-4-5。比较vpFDDVS2r1-3-4-5衍生病毒与亲本克隆衍生病毒的复制动力学,表明前者的复制比后者略滞后。以上结果提示,对疫苗株S2基因的突变未明显影响EIAV的体外复制。
- 高旭姜成刚韩秀娥赵立平沈荣显相文华周建华
- 关键词:马传染性贫血病毒S2基因感染性克隆
- 马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究 Ⅲ.马传贫弱毒LP继代细胞冻干疫苗保存期及对马免疫期试验
- 1992年
- 马传贫弱毒LP继代细胞疫苗冻干后置于-40℃及冷库保存18个月,其毒价为10^(-7)/ml,与冻干前湿苗的毒价一样。用冻干疫苗免疫的马其免疫期可达25个月。
- 董君平王振漪彭达春沈荣显赵立平吕晓玲
- 关键词:马传贫疫苗免疫
- 重组猪戊型肝炎病毒ORF2区主要抗原域的原核表达及鉴定被引量:3
- 2008年
- 目的:在大肠杆菌中表达猪戊型肝炎病毒ORF2区主要结构蛋白,并对其进行血清学鉴定。方法:通过RT-PCR技术从一份猪粪中扩增并克隆戊型肝炎病毒主要的结构基因片段,将该片段插入pET-32a表达载体,在原核系统中融合表达蛋白,Western blot和间接ELISA方法分析该蛋白的抗原性。结果:SDS-PAGE分析结果表明,获得45kD的目的蛋白,该重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,而不与阴性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。结论:本研究获得了猪戊型肝炎病毒重组抗原,可与HEV阳性血清产生特异性的结合反应,可以作为诊断用的重组蛋白,为研制敏感、特异的HEV诊断试剂盒,行之有效的HEV基因工程疫苗及为HEV感染的预防和临床治疗提供资料。
- 于婧曲娟娟于敏赵立平相文华
- 关键词:原核表达重组抗原BLOT
- 马流感病毒(A/equine/Qinghai/1/94)核蛋白基因的序列测定及同源性分析被引量:4
- 2003年
- 根据已发表的马流感病毒核蛋白基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,经反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)成功扩增出了我国马流感病毒 (A/Equine/Qinghai/ 1/ 94 )核蛋白基因 ,将该片段连接到PGEM_T_EASY载体并转化DH5α ,提取阳性菌落的质粒经EcRo1酶切和PCR鉴定其大小为 1.5kb左右 ,对其测序并进行分析发现 ,与A/Equine /Kentucky/2 / 86、A/Equine/Miami/ 1/ 6 3等关系较近 ,同源率为 93.3%~_97.4 % ,而与我国马流感吉林A/Equine/Jilin/ 1/ 89株关系较远 ,同源率仅为 84 .6 %。
- 杨建德薛飞王晓钧朱远茂赵立平吕晓玲沈荣显相文华李景鹏
- 关键词:马流感病毒NP基因同源性分析核蛋白基因
- 区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法
- 本发明公开了一种区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法,包括:(1)从感染了待检测毒株的马外周血白细胞中提取DNA;(2)以该DNA为模板,以P1/P3为引物进行第一轮PCR扩增;(2)以P2/P3为引物进行...
- 周建华相文华耿庆华郭巍姜成刚赵立平吕晓玲
- 文献传递
- 马传染性贫血病毒弱毒株LTR点突变型嵌合感染性克隆的构建被引量:1
- 2007年
- 马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)长末端重复序列(Long terminal repeat,LTR)是基因组中高度变异区之一,EIAV LTR的变异对于指导病毒的复制和病毒致病性具有重要的生物学意义。为了阐明我国马传染性贫血病毒弱毒疫苗毒力致弱的分子机制,由马传贫强毒至弱毒致弱过程中不同代次毒株LTR序列的分析,以驴胎皮肤弱毒株疫苗全长感染性克隆pLGFD3-8为父本,选取LTR R区的TAR起始碱基,poly(A)附加位点,采用反向遗传操作对其位点进行PCR体外定点突变,将弱毒序列构建的逆向点突变型全基因克隆转染到驴胎皮肤细胞(FDD)并在FDD上传代,通过逆转录酶活性(RT)检测、RT-PCR方法及real-time RT PCR检测并验证其感染性。检测结果为构建的逆向点突变型感染性克隆在FDD上被拯救,其衍生病毒感染的FDD上出现明显的细胞病变;细胞培养上清可检测到RT酶活性和RT-PCR阳性;电镜下可见大量典型的EIAV颗粒pLGFD-M点突变型嵌合克隆衍生病毒与其父本克隆衍生病毒pLGFD3-8复制水平相似。此结果为进一步深入研究LTR对马传染性贫血病毒复制水平和毒力的影响奠定了基础。
- 左咏梅吕晓玲赵立平李庆章郝艳红沈荣显相文华王晓钧
- 关键词:马传染性贫血病毒定点突变嵌合病毒