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前列腺癌患者外周血中前列腺癌抗原3基因和前列腺特异性抗原基因联合检测的意义被引量：1: 2009年; 目的评价外周血前列腺癌抗原3基因（prostate cancer antigen3，PCA3mRNA）和前列腺特异性抗原基因（prostate specific antigen，PSAmRNA）联合检测对前列腺癌（PCa）及对其微转移诊断的价值。方法用双重荧光实时定量逆转录（dFQ—RT）-PCR对49例PCa和71例前列腺增生（BPH）患者外周血PCA3mRNA和PSAmRNA进行定量检测，通过受试者工作特征（ROC）曲线评价其在PCa诊断和微转移监测中的价值。结果PCa组外周血PCA3mRNA含量明显高于BPH组[2362（〈30—7421）拷贝／ml比〈30拷贝／ml，Z=-6．66，P〈0．01]，而PSAmRNA含量也明显高于BPH组[3425（908—36639）拷贝／ml比〈200拷贝／ml，Z=-6．40，P〈0．01]；PCa组外周血PCA3mRNA和PSAmRNA的阳性率随临床分期增高而增加[B期：均为30．0％（3／10），C期：60．0％（9／15）和86．7％（13／15），D期：91．7％（22／24）和91．7％（22／24）；X^2分别为13．534和16．451，P均〈0．01]，同时也随Gleason评分增高而增加[2—4分：20．0％（1／5）和40．0％（2／5）；5～7分：66．7％（12／18）和72．2％（13／18）；8～10分：84．6％（22／26）和92．3％（24／26）x^2分别为8．895和8．015，P均〈0．05]；ROC曲线显示，当PCA3mRNA和PSAmRNA临界值分别为846拷贝／ml和280拷贝／ml时，诊断PCa敏感度分别为69．4％（34／49）和81．7％（40／49），特异度分别为90．1％（64／71）和77．5％（55／71）；而联合检测时其敏感度可增至85．7％（42／49），但特异度下降为76．1％（54／71）。PCA3mRNA诊断PCa微转移的敏感度和特异度分别为90．9％（20／22）和84．7％（11／13）。结论外周血PCA3mRNA和PSAmRNA检测是PCa诊断的良好指标，而联合检测可弥补PCA3mRNA敏感度低和PSAmRNA特异度低的不足，而更有利于PCa诊断；PCA3mRNA可能为PCa微转移诊断的良好指标。; 林晓梅许刚吴伟陈伟陶志华翁志梁陈凤萍吴秀玲陈晓东李澄棣; 关键词：前列腺肿瘤肿瘤转移抗原肿瘤前列腺特异抗原逆转录聚合酶链反应

尿液跨膜丝氨酸蛋白酶2基因和ETS转录因子家族成员相关基因融合体在前列腺癌诊断中的价值被引量：2: 2009年; 目的评价尿液跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）基因和ETS转录因子家族成员相关基因（ERG）融合体与前列腺特异性抗原（PSA）mRNA比值测定在前列腺癌诊断中价值。方法建立TMPRSS2和ERG基因融合体（TMPRSS2：ERG）mRNA及PSAmRNA荧光定量逆转录（FQ—RT）-PCR检测方法，TMPRSS2：ERGmRNA／PSAmRNA比值以2^-△ct。进行计算。同时，用该方法检测107例前列腺良性增生（BPH）患者和99例前列腺癌（PCa）患者尿液中的TMPRSS2：ERGmRNA／PSAmRNA比值，并分析该指标对PCa的诊断价值及与PCa临床分期、Gleason评分和PSA水平间的关系。结果PCa组TMPRSS2：ERGmRNA／PSAmRNA比值明显高于BPH组（0．101比0．000；U=2290．500，P〈0．01）；但其在PCa不同临床分期、Gleason评分、PSA组之间的差异均无统计学意义（X^2值分别为3．293、0．002、1．745，P均〉0．05）。TMPRSS2：ERGmRNA／PSAmRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．784（95％C1：0．707～0．860），当以3．0×10^-5。为临界值时，其诊断PCa的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为75．8％（75／99）、94．4％（101／107）、92．6％（75／81）、80．8％（101／125）和85．4％（176／206）；但其敏感度在PCa不同临床分期、Gleason评分、PSA组之间的差异均无统计学意义（X^2值分别为3．572、2．278、3．707，P均〉0．05）。结论尿液TMPRSS2：ERGmRNA／PSAmRNA比值在PCa诊断中具有较好的特异度和敏感度，有望成为PCa联合诊断的候选指标，但不能作为PCa病情监测和判断预后的指标。; 毛易捷何晶晶许刚戴美洁陈伟陈占国周武吴伟吴秀玲陶志华; 关键词：前列腺肿瘤丝氨酸内肽酶类癌基因蛋白质类逆转录聚合酶链反应

前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因异常甲基化检测及临床意义被引量：7: 2009年; 目的:检测前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因异常甲基化,探讨其甲基化与前列腺癌临床病理特征间的关系。方法:采用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation specific polymerase chain reaction,NMSP)法对57例前列腺癌组织和35例良性前列腺增生组织进行甲基化检测,分析其甲基化的发生与前列腺癌临床病理特征间的关系。结果:前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因甲基化检出率显著高于良性前列腺增生组织(GSTP1:61.4%vs 2.9%;DAPK:43.9%vs 8.6%;均P<0.01)。GSTP1基因甲基化率在不同Gleason评分间具有明显差异(χ2=11.53,P=0.001),而在不同年龄、前列腺特异性抗原(PSA)和临床分期之间差异却无显著性(χ2=0.111,1.662和1.975,均P>0.05);DAPK基因甲基化率在不同年龄、PSA、Gleason评分和不同临床分期之间均无明显差异(χ2=0.071、0.002、1.290和2.309,P均>0.05)。结论:GSTP1和DAPK基因异常甲基化与前列腺癌的发生与发展相关,可有助于前列腺癌的诊断。; 何晶晶毛易捷许刚吴伟陶志华沈默吴秀玲陈占国周武; 关键词：前列腺肿瘤甲基化

雄激素非依赖性前列腺癌细胞株BCL2和GRB10基因启动子区甲基化研究被引量：1: 2013年; 目的探讨基因甲基化在雄激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer,AIPC)转化过程中可能的作用。方法采用重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite genomic sequencing PCR,BSP)联合TA克隆测序检测雄激素依赖性前列腺癌(androgen-dependent prostate cancer,ADPC)细胞株LNCaP和雄激素非依赖性前列腺癌细胞株LNCaP-AI(androgen independent)中生长因子受体结合蛋白10(growth factor receptor-bound protein 10,GRB10)和B细胞性淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukaemia-2 gene,BCL2)的甲基化状态。结果 GRB10基因在LNCaP-AI细胞和LNCaP细胞中的甲基化率分别为9.6%、7.4%;BCL2基因在LNCaP-AI细胞和LNCaP细胞中的甲基化率分别为14.7%、25.3%,这两个基因在LNCaP细胞和LNCaP-AI细胞的甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GRB10和BCL2基因的异常表达与基因甲基化无明显相关,而二者是否参与到前列腺癌激素非依赖性到转化过程以及具体机制有待进一步研究。; 许刚秦婷婷; 关键词：雄激素非依赖性前列腺癌 TA克隆

爱普列特对老年大鼠前列腺增生组织中微血管的影响被引量：2: 2009年; 目的探讨新型5α-还原酶抑制剂爱普列特对老龄雄性SD大鼠前列腺增生组织的微血管的影响及作用机制。方法将70只已增生老龄雄性SD大鼠随机分为爱普列特大剂量组（20只）、小剂量组（20只）、非那雄胺组（20只）及对照组（10只），并分别采用免疫组化SP法和SABC法检测、对比各组大鼠前列腺增生组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和CD34的表达情况。结果爱普列特大剂量组、小剂量组及非那雄胺组MVD值（435±2．20、6．25±129、4．90±129）及eNOS（72．27±4850、163.89±91．40、144．82±8078）均明显低于对照组（8．00±298、293．58±1160）（均P〈0.05）；而且爱普列特大剂量组MVD值明显低于小剂量组（P〈0.05），eNOS明显低于小剂量组及非那雄胺组（P〈0．05）。结论爱普列特对大鼠前列腺增生组织中血管的生成具有明显的抑制作用，其可能是通过下调eNOS及CD34的表达来实现的。; 吴伟蔡冰许刚陈伟李澄棣陶志华; 关键词：爱普列特 CD34

氟他胺联合去雄激素环境诱导的雄激素非依赖性前列腺癌细胞模型的建立被引量：6: 2009年; 采用氟他胺联合去雄激素环境联合诱导培养的方法在体外建立一株雄激素非依赖性前列腺癌细胞系。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;采用CCK-8法测定细胞生长率;流式细胞技术检测细胞周期和Bcl-2、Bax的表达变化。结果显示,第1～20代实验组细胞形态瘦长,第30代后细胞大部分呈扁平状,同时呈聚集生长,而对照组细胞形态始终呈长梭形;不同代数的实验组LNCaP细胞在氟他胺浓度为5.0×10-6mol/L的去雄激素培养液中的细胞生长率总体呈上升趋势;氟他胺和去雄激素环境对实验组LNCaP细胞的细胞周期均无明显影响,而对照组LNCaP细胞的生长受氟他胺和去雄激素环境影响而受到抑制;实验组第60代LNCaP细胞Bcl-2平均荧光强度明显高于对照组,而Bax平均荧光强度与对照组间无显著差异。结果表明LNCaP细胞在氟他胺和去雄激素环境下能形成雄激素非依赖性前列腺癌细胞,这为其发病机制的研究提供了合适的实验对象。; 许刚毛易捷陈兵华何晶晶陶志华林晓梅陈占国沈默; 关键词：雄激素非依赖性氟他胺前列腺癌

雄激素非依赖性前列腺癌细胞中差异甲基化基因的初步筛选被引量：2: 2013年; 应用全基因组DNA甲基化芯片(Illumina Infinium HumanMethylation27 BeadChip)杂交技术以及转录组RNA测序技术,检测了雄激素依赖性前列腺癌(androgen-dependent prostate cancer,ADPC)细胞株LNCaP和雄激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer,AIPC)细胞株LNCaP-AI(androgen independent)中的差异甲基化基因。发现与LNCaP细胞株相比,LNCaP-AI细胞株有990个CpG位点表现为高甲基化,涉及855个基因;2 305个CpG位点表现为低甲基化,涉及1 970个基因。结合转录组mRNA表达结果,筛选出6个超甲基化基因:FAM111B、RAB36、PCDH7、COL6A2、IGF1R、GULP1;8个低甲基化基因:EPHA3、TM4SF1、IGFBP5、FAM105A、RASD1、ITPR2、CYP27B1、UBE2E3。这些差异甲基化基因涉及钙离子信号通路、Wnt信号通路等多个信号通路,参与了细胞的基因表达、信号传导、细胞通讯、细胞运动、细胞黏附以及血管生成等功能,为探讨这些差异甲基化基因在前列腺癌雄激素非依赖性转化过程中发挥的作用奠定了基础。; 秦婷婷许刚季丽丽陶志华; 关键词：雄激素非依赖性前列腺癌 DNA甲基化转录组测序

前列腺癌标本库的初步建立及其应用价值被引量：3: 2011年; 目的有计划地建立前列腺癌标本库，摸索科研标本库建立和管理的合理操作流程，为系统开展前列腺癌研究打好基础。方法采集前列腺癌患者初诊和治疗随访过程中及前列腺增生患者的静脉血及尿液标本，处理得到各类标本保存于一80℃冰箱。获取患者新鲜组织标本，保存于液氮，并收集肿瘤组织石蜡标本保存。结果标本库共计纳入184例病理确诊的前列腺癌患者、294例前列腺增生患者及3例PIN患者，各类标本均按预期方案处理及保存。以标本库工作为基础，课题组进行了大量的科研工作，取得了一定成果。结论前列腺癌标本库建立的流程已基本成熟，初步建立的标本库能为各项研究提供标本和相关资料来源。; 沈默陶志华陈伟吴秀玲许刚胡王强张晓霞孔凡慧; 关键词：前列腺癌标本库数据库

前列腺癌组织中多基因异常甲基化检测及临床意义被引量：2: 2009年; 目的探讨前列腺癌组织中RARβ2、GSTP1和DAPK基因异常甲基化，与前列腺癌临床病理特征间的关系，硬其在前列腺癌诊断中价值。方法采用巢式甲基化特异性PCR（nested methylation specific polymerase chain reaction，NMSP）法对57例前列腺癌组织和35例良性前列腺增生（BPH）组织进行甲基化检测；分析其甲基化的发生与前列腺癌临床病理特征间的关系，以及在前列腺癌诊断中价值。结果前列腺癌组织中RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化检出率显著高于BPH组织（RARβ2：52．6％对0％；GSTP1：61．4％对2．9％；DAPK：43．9％对8．6％；均P〈0．01）。RARβ2基因甲摹化率在前列腺癌不同Gleason评分和不同临床分期之间差异有统计学意义（4～7分对8～10分：34．8％对64．7％，B、C期对D期：37．0％对66．7％，x^2=4．927和x^2=5．004，P=0．026和P=0．025）；GSTP1基因甲基化率在不同Gleason评分间差异有统计学意义（4～7分对8～10分：43．5％对73．5％．x^2=11．530，P=0．001），而在不同临床分期之间差异无统计学意义（B、C期对D期：51．9％对70．0％，x^2=1．975，P=0．16）；DAPK基因甲基化率在不同Gleason评分和不同临床分期之间差异均无统计学意义（4～7分对8～10分：39．1％对50．0％．B、C期对D期：33．3％对53．3％，x^2=1．290和x^2=2．309，均P〉0．05）。GSTP1基因诊断敏感度最高为61．4%（35／57），特异度为97．1％（34／35）；RARβ2基因特异度最高为100％（35／35），敏感度为52．6％（30／／57）；DAPK基因的诊断敏感度和特异度分别为43．9％和91．4％（25／57和32／33）。而RARβ2、GSTP1和DAPK基因甲基化联合检测能明显提高前列腺癌诊断敏感度，但诊断特异度却有所下降。结论RARβ2、GSTP1和DAPK基因异常甲基化与前列腺癌的发生与发展相关，可作为前列腺癌的诊断有效指标之一。; 何晶晶毛易捷许刚吴伟陶志华沈默吴秀玲陈占国周武陈伟; 关键词：前列腺肿瘤基因 DNA甲基化

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许刚

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