藤原滋树
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：日本高知大学更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 斑马鱼总RNA提取和纯化被引量：8
- 2007年
- 采取异硫氰酸胍法从斑马鱼的3个样品中提取和纯化RNA,结果表明,RNA A260分别为0.587、0.719、0.151。A260/A280比值分别为1.89、1.92、1.82。电泳条带也清晰可见,可以用于进一步的分子生物学研究。
- 谢保胜藤原滋树
- 关键词：斑马鱼RNA提取异硫氰酸胍法
- 斑马鱼促性腺激素释放激素基因的克隆与表达被引量：3
- 2009年
- 目的克隆斑马鱼促性腺激素释放激素(GnRH)基因,构建重组质粒pQE30-GnRH并获得表达蛋白。方法从斑马鱼脑组织提取总RNA,应用RT-PCR方法获得斑马鱼GnRHcD-NA。将该cDNA插入质粒pQE30中,并使其在大肠杆菌RB791中表达。经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达情况。结果斑马鱼GnRHcDNA长为207bp,编码的GnRH前体为69个氨基酸残基。与鲤鱼、鲫鱼、拟鲤、黑头软口鲦等淡水鲤科鱼类的氨基酸序列同源性比较,分别为74.4%,69.8%,73.3%和73.3%。电泳结果显示一新的分子量约为14.4 kDa的特异蛋白带。结论本研究所克隆的斑马鱼GnRH基因属于GnRH-Ⅱ。构建斑马鱼GnRH原核表达质粒不仅获得大量的GnRH蛋白,还可对该蛋白做进一步分离纯化以及生物活性方面的研究。
- 谢保胜段瑞君藤原滋树
- 关键词：斑马鱼促性腺激素释放激素克隆基因表达
