蔡志强 作品数:8 被引量:32 H指数:4 供职机构: 石河子大学医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
体外Cajal样细胞c-kit基因mRNA在高糖环境下表达变化及意义 被引量:8 2010年 目的:观察体外高糖环境下Cajal样细胞(interstitial cells of Cajal-like,ICCs)c-kit mRNA表达变化。方法:胶原酶消化法原代分离培养豚鼠膀胱ICCs,加入含葡萄糖浓度分别为5mmol/L、15mmol/L、30mmol/L培养基培养24h、48h、72h后,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测高糖环境下c-kit基因mRNA表达水平的变化。结果:RT-PCR电泳经分析显示15mmol/L、30mmol/L组ICCs c-kit mRNA表达较5mmol/L组降低(P<0.01),72h组较24h组、48h组表达降低。结论:高糖环境造成ICCs c-kit基因mRNA表达水平降低,可导致ICCs的SCF/c-kit信号通路异常,ICCs功能及结构障碍,可能是糖尿病膀胱病变的发病机制之一。 蔡志强 丁国富 李云飞 范勇洪 王勤章关键词:C-KIT基因 高糖 豚鼠膀胱Cajal样细胞在高糖环境中的形态学变化 被引量:3 2009年 目的:观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞形态学变化。方法:应用酶解法分离培养豚鼠膀胱Cajal样细胞,分为无糖组、正常对照组(葡萄糖浓度5mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度分别为15、30、60mmol/L),通过光学倒置显微镜及c-kit抗体染色后激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。结果:葡萄糖浓度分别为30、60mmol/L组较无糖组、正常对照组(5mmol/L)及15mmol/L组细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05),蛋白标记后显示蛋白染色部位减少,有核着色迹象。结论:高糖环境可导致Cajal样细胞的形态异常,数量减少,可能引起其功能学的改变,提示其可能是糖尿病膀胱病变的的影响因素。 蔡志强 王勤章 丁国富 李云飞 范勇洪关键词:高糖环境 糖尿病 高糖环境对豚鼠膀胱ICC样细胞c-kit mRNA及蛋白的表达影响 目的:观察体外高糖环境培养的豚鼠膀胱cajal样间质细胞c-kit基因mRNA及蛋白的表达变化,探讨高糖环境对cajal 样间质细胞及SCF/c-kit信号通路传导的影响,为下一步细胞功能学的逆转及恢复细胞表型等研究提供... 蔡志强关键词:蛋白表达 CAJAL样间质细胞 膀胱病变 文献传递 豚鼠糖尿病性膀胱病逼尿肌中c-kit mRNA和蛋白的表达变化及意义 被引量:9 2010年 目的:检测豚鼠糖尿病性膀胱病(DCP)逼尿肌中酪氨酸蛋白激酶生长因子受体(c-kit)mRNA和蛋白的表达水平,探讨c-kit表达与DCP的关系及其发病机制。方法:60只豚鼠随机分成对照组20只,实验组40只,实验组采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病豚鼠模型,2组豚鼠饲养10周后运用尿动力学检测并将实验组筛选出DCP组和糖尿病性非膀胱病(NDCP)组,应用RT-PCR、激光共聚焦显微镜技术分别检测各组膀胱组织c-kit mRNA和蛋白的表达。结果:DCP组c-kit mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)及NDCP组(P<0.05),相对平均吸光度值分别为4.65±0.47、5.66±0.54、5.54±1.28。糖尿病性膀胱病组c-kit蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)与NDCP组(P<0.01),c-kit蛋白荧光值分别为548.69±48.51、844.67±59.24、856.52±53.03。结论:豚鼠DCP逼尿肌中c-kit mRNA、c-kit蛋白表达减少,导致c-kit信号通路异常,从而使Cajal样细胞在膀胱中的功能减弱而导致逼尿肌功能障碍发生DCP,因此c-kit表达异常可能是DCP的发病机制之一。 李云飞 丁国富 蔡志强 范勇洪 王勤章关键词:CAJAL细胞 糖尿病膀胱病 C-KIT 糖尿病豚鼠膀胱Cajal样间质细胞形态学变化及意义 被引量:14 2009年 目的观察糖尿病豚鼠膀胱Cajal样间质细胞形态学变化,探讨糖尿病膀胱功能改变原因。方法用链脲佐菌素单次注射建立豚鼠糖尿病模型,建模成功4周后,行尿动力学检查,采用组织冷冻切片、酪氨酸蛋白激酶受体单克隆抗体间接免疫荧光检测及透射电镜技术观察膀胱中Cajal样间质细胞变化。结果与对照组相比,糖尿病豚鼠膀胱最大逼尿肌压显著降低,最大膀胱容量及膀胱顺应性显著明显增高。免疫荧光检测显示逼尿肌中KIT阳性细胞与逼尿肌组织面积百分比均明显小于对照组。电镜下可见Cajal样间质细胞内细胞器变性、减少,胞质广泛溶解,核周间隙增宽,与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散。结论糖尿病豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的数量减少和结构破坏可能是造成膀胱功能障碍的重要原因之一。 王勤章 纪世琪 朱国栋 李云飞 蔡志强 李应龙 王江平 丁国富关键词:糖尿病 膀胱 CAJAL样间质细胞 尿动力学 豚鼠膀胱Cajal样间质细胞类型及其与钙离子振荡特性的关系 被引量:7 2010年 目的 探讨豚鼠膀胱组织中Cajal样间质细胞(ICC)形态学类型特点及其与钙离子振荡特征的关系.方法 取豚鼠膀胱制作冰冻切片,体外培养膀胱ICC.免疫荧光染色激光共聚焦显微镜下观察ICC形态学特点,根据细胞不同形态类型及添加2-氨基乙氧基双苯萘酯(2-APB)干预剂将体外培养膀胱ICC分4组:二聚体ICC组(n=10)、单体ICC组(n=20)、2-APB抑制二聚体ICC组(n=10)、2-APB抑制单体ICC组(n=20).应用Fluo-4AM标记细胞内钙离子浓度含量及在2-APB抑制二聚体ICC组、2-APB抑制单体ICC组加入2-APB,共聚焦显微镜下观察记录钙离子振荡功能.结果 二聚体ICC组钙振荡频率(13.4±0.8)次/min及振幅38.5±8.7明显高于单体ICC组钙振荡频率(7.5±0.6)次/min及振幅10.5±3.9(P<0.05),加入高浓度2-APB后,2-APB抑制二聚体ICC组钙振荡频率(8.7±1.5)次/min及幅度15.5±8.2明显低于二聚体ICC组(P<0.05),而2-APB抑制单体ICC组钙振荡频率(8.5±0.5)次/min及幅度9.2±4.6与单体ICC组差异无统计学意义(P>0.05).结果 豚鼠膀胱中存在单体和二聚体2种不同形态类型的ICC,单体ICC自发性钙振荡波较低,二聚体ICC自发性钙振荡波具有高兴奋性,二聚体ICC的特有结构可能是ICC高兴奋性钙波形成的结构基础. 王勤章 李云飞 丁国富 范勇洪 蔡志强关键词:膀胱 间质细胞 高糖环境对豚鼠膀胱ICCs细胞超微结构的影响 被引量:4 2009年 目的:观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)超微结构,探讨糖尿病膀胱(diabetic cystopathy,DCP)的发病机制。方法:采用酶消化法原代培养,透射电镜观察5、10、15mol/L葡萄糖浓度下培养24、72h的ICCs超微结构。结果:随糖浓度增高培养时间延长,ICCs内细胞器明显减少,线粒体大小不等,数量减少,肿胀、空泡样改变甚至溶解,内质网扩张、空泡样变,胞质广泛溶解,突起消失。结论:高糖环境对豚鼠膀胱ICCs超微结构造成显著影响,这种结构破坏可能是造成DCP发病的重要原因之一。 范勇洪 丁国富 王勤章 李云飞 蔡志强关键词:CAJAL间质细胞 高糖环境 超微结构 糖尿病膀胱 高糖环境对豚鼠膀胱ICCs细胞形态及电生理的影响 被引量:1 2009年 目的:研究高糖环境下豚鼠膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)形态及细胞内钙离子荧光的改变,探讨糖尿病膀胱(diabetic cystopathy,DCP)的发病机制。方法:采用酶消化法原代培养,激光共聚焦技术观察5、10、15mol/L葡萄糖浓度下培养24、72h的ICCs,每浓度/时间取30个细胞测量其长度,再从中随机选10个细胞,以200ms/张图片的速度进行扫描,获得每个时间点细胞内钙离子荧光强度值。结果:糖浓度增高培养时间延长,ICCs内钙离子荧光值升高(P=0.00),只有15mol/L/24h降低(P=0.00);ICCs细胞长度缩短(P=0.00),只有10mol/L/72h细胞长度增长(P=0.00)。结论:高糖环境对豚鼠膀胱ICCs形态学及电生理学造成显著影响,这种改变可能是造成DCP发病的重要原因之一。 范勇洪 丁国富 王勤章 李云飞 蔡志强关键词:CAJAL间质细胞 高糖环境 钙离子 糖尿病膀胱