蒋磊 作品数:35 被引量:92 H指数:6 供职机构: 中南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 建筑科学 环境科学与工程 生物学 更多>>
过表达MIPU1降低阿霉素所致人胚胎肾HEK293细胞的凋亡 2014年 目的探讨过表达MIPU1对阿霉素(Doxorubicin,DOX)所致细胞凋亡的影响及其可能的分子机制,为预防DOX抗肿瘤治疗过程中的毒副作用提供新的思路。方法 1)MTT实验观察DOX处理下过表达MIPU1对细胞存活率的影响;2)Hoechst染色和流式细胞术分析过表达MIPU1对DOX所致细胞凋亡的影响;3)RT-PCR和Western blot分析过表达MIPU1对DOX所致Bcl-2、P53和Bax在mRNA水平和蛋白水平上表达变化的影响。结果过表达MIPU1后,细胞存活率明显升高(P<0.05 vs p EGFP+DOX),凋亡率显著下降(P<0.01 vs p EGFP+DOX),P53和Bax的表达显著下降(P<0.05 vs p EGFP+DOX),而Bcl-2的表达则明显增多(P<0.05 vs p EGFP+DOX)。结论过表达MIPU1能降低DOX引起的HEK293细胞凋亡,可能与抑制P53和Bax的表达同时促进Bcl-2的表达有关。 时春丽 蒋磊 蒋磊关键词:阿霉素 BAX BCL-2 热休克反应对氧化应激所致nucleolin裂解的影响 被引量:3 2004年 观察热休克反应对氧化应激 (0 .5mmol/LH2 O2 )诱导细胞凋亡发生时nucleolin(C2 3)裂解的影响并探讨其机制。方法 :采用caspase 3活性定量分析及免疫印迹技术检测氧化应激诱导的原代心肌细胞、RAW 2 6 4 .7巨噬细胞及K5 6 2白血病细胞凋亡及C2 3的裂解 ;通过热休克反应观察热休克反应对C2 3裂解的影响。结果 :0 .5mmol/LH2 O2处理细胞 2hcaspase 3活性显著升高 ,12h达高峰。免疫印迹结果显示上述各种细胞的C2 3蛋白均发生了裂解 (有 80kD裂解片断出现 ) ,而且最早出现裂解片段的时间都在H2 O2 处理 30min到 1h左右 ;同时热休克反应通过诱导HSP70 ,HSP2 5等应激蛋白表达而显著减少氧化应激所致C2 3的裂解。结论 :氧化应激诱导凋亡发生的同时也引起C2 3的裂解 ;热休克反应显著抑制氧化应激所致C2 3的裂解 。 王慷慨 蒋磊 易宇欣 刘可 鄂顺梅 唐道林 王建设 石永忠 王秋鹏 肖献忠关键词:热休克反应 氧化应激 CASPASE-3 H2O2 片段 大鼠缺血-再灌注损伤心肌中HSP70相互作用蛋白质组的研究 目的:心肌缺血再灌注损伤时,从分子伴侣角度研究大鼠缺血-再灌注损伤心肌中HSP70的相互作用蛋白质组,揭示其相互作用网络及其与心肌保护的关系。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min及松解1 h构建大鼠心肌缺血-再灌注... 罗琪 蒋磊 陈广文 肖献忠核仁素对LPS诱导的白细胞介素1β释放的影响 被引量:8 2010年 目的:探讨核仁素在脂多糖(LPS)所致炎症模型中的表达及其对LPS所致的白细胞介素1β(IL-1β)释放的影响。方法:小鼠腹腔注射LPS(15mg/kg)建立内毒素血症模型,LPS(500μg/L)处理建立RAW264.7细胞炎症模型,采用免疫印迹观察核仁素在炎症模型中的表达。利用瞬时转染技术抑制或增加RAW264.7细胞内核仁素表达后,LPS处理,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养基中IL-1β的含量。结果:在内毒素血症小鼠的肺组织和RAW264.7细胞炎症模型中,110kD核仁素表达上调,80kD核仁素片段表达减少。与转空载体对照组比较,核仁素过表达组LPS所致的IL-1β释放明显增加(P<0.05);与正常细胞组和随机寡核苷酸组比较,核仁素低表达组LPS所致的IL-1β释放明显减少(P<0.05)。结论:在LPS所致的炎症模型中,110kD核仁素表达上调,80kD核仁素片段表达减少;核仁素促进LPS所致的IL-1β释放。 张彬 肖献忠 张文辉 蒋磊 蒋碧梅关键词:核仁素 白细胞介素1Β RAW264.7细胞 小鼠 热休克蛋白70对过氧化氢所致乳鼠心肌细胞核仁损伤的保护作用 被引量:24 2002年 为探讨氧化应激时体外培养的新生Wistar大鼠心肌细胞核仁损伤以及热休克蛋白 70对损伤核仁的保护作用 ,用 0 .5mmol L过氧化氢处理原代培养的心肌细胞 0、30、6 0min ,采用甲苯胺兰染色核仁及电镜技术观察核仁结构的改变 ;并通过热休克预处理及反义技术诱导或阻断热休克蛋白 70的表达 ,观察其对核仁损伤的保护作用。结果发现 ,光镜下过氧化氢损伤组心肌细胞核仁染色颗粒数增多 ,电镜下核仁结构松散、核仁组份分离。热休克预处理导致心肌细胞中热休克蛋白 70表达明显增加 ,并使过氧化氢所致心肌细胞核仁损伤明显减轻。免疫组织化学显示过氧化氢可引起热休克蛋白 70从胞浆到胞核 ,再到核仁的移位。热休克蛋白 70反义寡核苷酸很大程度上能阻断热休克预处理对心肌细胞核仁损伤的保护作用。结果提示 ,过氧化氢可导致体外培养的新生大鼠心肌细胞核仁结构损伤 ,热休克蛋白 70高表达及其向核仁的移位对上述损伤具有明显保护作用。 王慷慨 邓恭华 肖卫民 赵振宇 蒋磊 刘梅冬 肖献忠关键词:核仁 心肌细胞 过氧化氢 热休克蛋白70 HIF-1对H9c2心肌细胞新基因Mipu1表达的影响及其机制研究 目的:研究缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)对大鼠胚胎心肌细胞株H9c2细胞新基因Mipul表达的影响及其机制。方法:分别以氯化钴(CoCl_2)处理、人HIF-1α全长... 雷坚 王慷慨 刘小柳 刘瑛 王桂良 蒋磊 刘梅冬 肖献忠新基因MIP2的克隆和特性分析 2008年 目的克隆1个大鼠心肌缺血-再灌诱导表达上调的新基因MIP2,并分析其相关特性。方法采用生物信息学方法,克隆了1个大鼠心肌缺血-再灌诱导表达上调的新基因MIP2,分析了新基因的若干特性;采用PCR从cDNA文库中克隆MIP2的开放阅读框。结果MIP2定位于大鼠染色体1q42.12,含14个外显子和13个内含子,开放阅读框(ORF)为1497bp,编码498个氨基酸。在其编码蛋白的N-端含1个CTLH结构域,C-端有5个WD重复序列;MIP2的开放阅读框经测序证实与预测的完全一样;多组织膜RNA印迹证实了MIP2转录本的存在,且显示该基因在心与骨骼肌表达最高,其次是脾和睾丸,在其他组织表达较低或无表达。结论成功克隆了1个大鼠心肌缺血-再灌诱导表达上调的新基因MIP2。 蒋磊 王慷慨 袁灿 陈广文 刘可 王桂良 肖献忠关键词:新基因 生物信息学 克隆 考虑蠕变效应的红粘土边坡稳定性分析与动态监测评价 湖南郴州地处山区和丘陵地区,近年来,在以相山大道、郴资桂公路改扩建工程为代表的市政项目的建设过程中,经常遇到滑坡以及路堑工程边坡在工后运营期的失稳问题。边坡是个开放的体系,在外界因素的共同作用下(如降雨、人工开挖等),边... 蒋磊关键词:蠕变效应 红粘土 边坡稳定性 动态监测 Mipu1对大鼠促凋亡蛋白Bax表达与心肌细胞凋亡的影响 目的:探讨Mipu1对促凋亡蛋白Bax表达及心肌细胞凋亡的影响。方法:分离纯化Mipu1蛋白,体外观察其与bax启动子的结合;采用ChIP在体检测Mipu1与bax启动子在细胞内的结合;采用报告基因观察Mipu1对bax... 蒋磊 王浩 时春丽 王桂良 冯衍生 屈顺林 刘小柳 肖献忠关键词:促凋亡蛋白 心肌细胞凋亡 BAX 心肌缺血相关基因Mipul的转录因子特性及其转录抑制作用研究 Mipul(zinc finger protein667,ZFP667)是本室首先发现的一个大鼠心肌缺血-再灌注诱导表达上调蛋白,本研究对其作为转录因子的功能及其抗心肌细胞凋亡作用进行初步探讨。经生物信息学分析发现,Mi... 蒋磊关键词:染色质免疫沉淀 文献传递