葛保胜
- 作品数：95 被引量：86H指数：6
- 供职机构：中国石油大学（华东）更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程医药卫生化学工程更多>>
- 趋化因子受体CXCR4b在大肠杆菌中的高效表达、增溶及纯化
- 2010年
- 膜蛋白在细胞分化、信号转导等生理活动中发挥着重要作用,然而膜蛋白结构与功能的研究却受到高质量蛋白制备的严重制约。将斑马鱼趋化因子受体CXCR4b基因克隆到pMAL-p4x表达载体中,在大肠杆菌TB1中表达麦芽糖结合蛋白(MBP)-CXCR4b融合蛋白。通过系统优化其发酵表达条件,实现了CXCR4b的过量表达。最佳表达条件为:宿主菌选用大肠杆菌TB1,TB培养基,诱导剂IPTG浓度为0.5mmol/L,诱导时机为对数中后期。通过对10种不同表面活性剂的筛选,发现DM、FC-14和Brij35等表面活性剂对CXCR4b有较好的增溶效果。利用Ni2+亲和色谱和S200凝胶色谱两步纯化,得到CXCR4b的纯度可达90%以上。圆二色谱检测显示纯化的CXCR4b呈典型的α螺旋结构。
- 孙海翔葛保胜许耀
- 关键词：G蛋白偶联受体纯化表面活性剂
- 一种高活性人趋化因子的制备方法及用途
- 本发明公开了一种高活性人趋化因子的制备方法及用途，包括如下步骤：步骤1：根据NCBI数据库中Eotaxin-1的氨基酸序列，对其密码子进行了优化，人工合成目的基因；步骤2：通过设计引物在其N端引入一个或多个His标签、T...
- 葛保胜孙婷婷江小勇王明清杨秋霞黄方
- 一种与金属离子具有更强结合力的蛋白纯化标签及其应用
- 本发明涉及一种能与金属离子具有高结合力的亲和色谱蛋白纯化标签m‑HDn‑Tag，该m‑HDn‑Tag蛋白纯化标签为将传统含有m个组氨酸纯化标签(m‑His‑Tag)中某个位点(n)的氨基酸突变成天冬氨酸(D)后得到的一种...
- 葛保胜李皓然陈瑶陈泽文黄方
- 几种重组别藻蓝蛋白的抗氧化活性被引量：5
- 2007年
- 藻胆蛋白是某些藻类特有的捕光色素蛋白,其中天然别藻蓝蛋白、藻蓝蛋白的抗氧化活性已经被证明。实验以2,2-盐酸脒基丙烷(AAPH)为自由基生成者,应用藏红花素退色反应为检测清除氢过氧自由基的方法,探讨了在大肠杆菌(Escherichia coli)中表达并纯化的带有6×His(6×组氨酸)标签和带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的重组别藻蓝蛋白及其α、β亚基的抗氧化活性。结果表明,带有His标签的6×Hisα-APC、6×Hisβ-APC和6×His-APC均显示出一定的清除氢过氧自由基的能力,其中6×Hisβ-APC清除氢过氧自由基的IC50值可达到27.2 mg/L,Ka/Kc(氢过氧自由基与重组别藻蓝蛋白和藏红花素反应的速度常数比)达到1.24,大于带有色素基团的天然APC清除氢过氧自由基能力(IC5057.5 mg/L);而带有MBP标签的重组别藻蓝蛋白亚基MBPα-APC和MBPβ-APC和MBP-APC(rAPC)则无明显的清除能力。结果首次证实了脱辅基蛋白具有清除氢过氧自由基能力,因而在天然藻胆蛋白中脱辅基蛋白是清除自由基的贡献者之一,这为进一步研究重组别藻蓝蛋白的抗肿瘤机理提供了线索。
- 韩璐葛保胜林秀坤秦松
- 关键词：重组别藻蓝蛋白清除自由基藏红花素
- Combinational biosynthesis of novel dual-functional phycobiliproteins and its application in early diagnosis of liver cancer
- The development of fluorescent tools with high fluorescence quality and efficient targeting is of great import...
- 吝晓君王祥法葛保胜黄方
- 关键词：PHYCOBILIPROTEINSSTREPTAVIDIN
- 文献传递
- 一种固定化仿生酶的制备及其在烟道气二氧化碳捕集中的应用
- 本发明利用仿生的原理，合成了一种具有天然碳酸酐酶活性的仿生材料，并将其应用于烟道气二氧化碳的捕集。其特征在于先在常温常压的条件下水相合成固定化仿生酶ZIF‑8，然后对烟道气进行净化降温处理，降温后将含有二氧化碳的烟道气通...
- 于道永孙世轩相勇王义琛王桂志龙洋洋王小强葛保胜黄方
- 一种宽吸收光谱重组光合蛋白分子及其构建方法
- 本发明公开了一种宽吸收光谱重组光合蛋白分子，由重组叶绿素结合蛋白、藻胆蛋白融合蛋白与叶绿素a在体外进行结合得到，首先，利用分子生物学和基因工程的手段，结合藻胆蛋白色基体内组合催化技术，构建叶绿素结合蛋白、全色基藻胆蛋白融...
- 葛保胜于倩侯琪琪
- 文献传递
- 一种检测肝素钠中多硫酸软骨素类杂质的方法
- 本发明公开了一种检测肝素钠中多硫酸软骨素类杂质的方法，采用KRKC和GSH两种多肽作为稳定剂合成表面带有正电荷具有荧光特性的金纳米簇作为荧光探针，利用所述荧光探针分别与肝素钠标准品溶液和含有多硫酸软骨素类杂质的肝素钠溶液...
- 王晓娟马锡琦黄方葛保胜夏永清孙怡鑫
- 一种高效部分液循环式微藻养殖用固碳补碳反应器
- 本发明公开了一种高效部分液循环式微藻养殖用固碳补碳反应器，包括：反应器、进液管；进液管的出口端伸入反应器的内部，且置于反应器的中下部；进液管入口端的管径大于出口端的管径；反应器的底部开设气体进口，上部开设气液出口；气液出...
- 葛保胜郁亮尹永浩孙新祖陈树林
- 文献传递
- 一种用于肝癌早期检测的试剂盒及其制备方法
- 本发明公开了一种用于肝癌早期检测的试剂盒及其制备方法，试剂盒包括荧光酶标板、样品稀释液、洗涤液、阴性对照、阳性对照、抗肝癌标志物的单克隆抗体、生物素标记的抗肝癌标志物的单克隆抗体和链霉亲和素‑藻胆蛋白荧光探针。本发明用于...
- 葛保胜王祥法黄方迟海霞
- 文献传递
