童华
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属中山医院耳鼻喉科更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNAi沉默miRNA-224-5p对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的通过慢病毒载体介导的RNA干扰技术,来探讨沉默miRNA-224-5p对人喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)Hep-2细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体,将重组miRNA-224-5p-RNAi-LV3转染喉鳞癌Hep-2。设为干扰组(miRNA-224-5p-siRNA,SI组)、阴性对照组(NC组)和空白对照组(BC组),分别采用聚合酶链反应方法检测miRNA-224-5p的表达情况,用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况、Transwell侵袭实验检测细胞侵袭情况。结果 miRNA-224-5p-RNAi-LV3可显著降低miRNA-224-5p的表达,转染后Hep-2细胞增殖能力显著降低,细胞侵袭能力明显减弱,细胞周期及细胞凋亡均未见明显影响。结论 RNAi沉默miRNA-224-5p可以抑制Hep-2细胞增殖,并降低其侵袭能力。
- 李俊王建中黄新生白广平童华周雷刘建平
- 关键词：微RNAS慢病毒载体
- 前体脑源性神经营养因子抑制大鼠螺旋神经节神经元的存活和神经突再生
- 2014年
- 本文旨在研究前体脑源性神经营养因子(precursor brain-derived neurotrophic factor,proBDNF)对螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)生长的影响。取新生5天Sprague Dawley(SD)大鼠处死,分离出含有螺旋神经节的蜗轴,将其消化、吹打后用培养液重悬,接种于多聚-D-赖氨酸/层粘连蛋白包被过的8孔腔式载玻片,37°C培养4 h获得贴壁牢固的原代SGNs。将SGNs随机分为对照组、BDNF组(10 ng/mL BDNF处理)、C10组(10 ng/mL proBDNF处理)、C50组(50 ng/mL proBDNF处理)、C100组(100 ng/mL proBDNF处理),无血清培养48 h后行βIII tubulin荧光抗体标记染色,荧光显微镜下观察SGNs的存活数目和神经突再生情况。结果显示,C50组和C100组的SGNs存活数目低于对照组(P<0.001),且C10组、C50组和C100组的SGNs存活数目均低于BDNF组(P<0.001)。根据SGNs的形态,可将其分为无突起和有突起两类。C10组、C50组、C100组的无突起SGNs比例均高于对照组,差异有统计意义(P<0.001)。另外在添加20μmol/L的特异性c-Jun氨基末端激酶(c-Jun Nterminal kinase,JNK)抑制剂SP600125后,C50组的SGNs存活数目提升至(91.5±8.2)/孔,高于没有使用SP600125的C50组(P<0.001)。以上结果说明,proBDNF减少体外培养SGNs的存活数目,并抑制SGNs神经突的出芽生长;使用特异性JNK抑制剂可以部分减轻proBDNF对SGNs存活的抑制作用。
- 童华周雷刘建平高丽沈纳黄新生
- 关键词：螺旋神经节
- 喉鳞癌中microRNA-197表达水平的研究被引量：3
- 2013年
- 目的:检测喉鳞癌细胞株Hep-2中microRNAs(miRNAs)的表达谱,并测定喉鳞癌组织中miRNA-197(miR-197)的表达水平。方法:采用miRNAs芯片技术检测喉鳞癌细胞株Hep-2、正常人支气管上皮细胞株HBEAs-2B中miRNAs的表达,得到miRNAs表达谱。根据miRNAs芯片结果,挑选Hep-2中表达显著上调的miR-197,并采用实时定量逆转录聚合酶链反应(realtime quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)验证miR-197在20例喉鳞癌组织及10例癌旁正常组织中的表达。结果:miRNAs芯片结果表明,Hep-2细胞株中有166个miRNAs上调,如miR-197、miR-133b等;47个miRNAs下调,如miR-519d、miR-20b等。RT-PCR检测结果显示,miR-197在喉鳞癌组织中表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。结论:miR-197在喉鳞癌中表达显著上调,可能作为喉鳞癌的特异性miRNA在喉鳞癌的发生发展过程中有重要作用。
- 李俊王建中黄新生白广平童华
- 关键词：MICRORNAS喉鳞癌芯片
