祁卫东
- 作品数：29 被引量：94H指数：6
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- 发文基金：镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 下调miR-10a表达对人胰腺癌细胞AsPC-1迁移和侵袭的影响
- 2013年
- 目的 探讨miR-10a表达对人胰腺癌AsPC-1细胞迁移和侵袭力的影响及其作用机制.方法 构建针对miR-10a的小干扰RNA（miR-10a-siRNA）,转染处理人胰腺癌AsPC-1细胞,同时设阴性对照siRNA（NC-siRNA）组和空白对照组.采用荧光实时定量PCR法检测3组细胞中miR-10a的表达水平,划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭能力,ELISA法检测各组癌细胞培养上清液中基质金属蛋白质酶13（MMP-13）含量.结果 对照组、NC-siRNA组和miR-10a-siRNA组AsPC-1细胞miR-10a表达水平分别为1.05±0.08、1.03 ±0.06、0.02±0.01,穿膜细胞数分别为（150±2.6）、（145±2.2）、（62±1.8）个,培养上清中MMP-13表达量分别为（108.5±2.8）、（107.8±2.5）、（35.8±1.5） pg/ml,miR-10a-siRNA组均显著低于对照组和NC-siRNA组,差异均有统计学意义（P值均＜0.01）.对照组、NC-siRNA组和miR-10a-siRNA组AsPC-1细胞的迁移后间距分别为（385 ±15）、（395±13）、（736±18）μm,miR-10a-siRNA组显著大于对照组和NC-siRNA组,差异有统计学意义（P值均＜0.01）.结论 下调miR-10a表达可抑制胰腺癌AsPC-1细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与MMP-13表达下调有关.
- 张恒彭辉勇满昌峰徐娟祁卫东蒋鹏程范钰
- 关键词：微RNA细胞运动肿瘤浸润
- RASSF1A基因在胃腺癌和癌前病变中的表达及意义被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨RASSF1A与CyclinD1在胃癌发生发展中的作用.方法:采用RT-PCR检测胃正常组织、腺瘤组织、不典型增生组织各20例及胃腺癌组织40例中RASSF1A及CyclinD1mRNA的表达,并Western blot法检测RASSF1A蛋白表达.结果:胃腺癌组RASSF1A的表达低于不典型增生、良性腺瘤及正常组织组(37.5%vs80.0%,95.0%,100.0%,均P<0.05),而CyclinD1的表达高于不典型增生、良性腺瘤及正常组织组(77.5%vs25.0%,10.0%,5.0%,均P<0.05).胃癌组织中,RASSF1A及CyclinD1mRNA表达均与病理分级有关(χ2=4.422,8.935,均P<0.05);两者之间表达呈负相关(r=-0.448,P<0.05);RASSF1A蛋白表达与mRNA表达一致.结论:RASSF1A与CyclinD1两种蛋白的异常表达在胃癌的发生发展中可能具有协同作用,二者联合检测能为胃癌的早期临床诊断和治疗提供有利的生物学信息.
- 蒋鹏程马圭孟鑫祁卫东高振军
- 关键词：胃肿瘤基因RASSF1ACYCLIND1
- 预置改良双套管治疗贲门癌、直肠癌术后吻合口漏的临床研究被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨预置改良双套管治疗贲门癌、直肠癌术后吻合口漏的临床效果。方法:28例直肠癌前切除术后吻合口漏患者,预置改良双套管持续引流11例,传统引流17例;42例贲门癌吻合口漏患者,预置双套管组15例,传统引流27例。比较两组吻合口漏后是否需要再次手术治疗有无差异。结果:(1)直肠癌术后吻合口漏中,两组在是否需要再次手术治疗比较有显著差异(P<0.05)。(2)贲门癌根治术吻合口瘘两组在是否需要再次手术治疗比较无显著差异(P>0.05)。结论:预置改良双套管治疗直肠癌术后吻合口漏可以显著减少再次手术治疗的几率、减轻患者痛苦,利于患者康复。
- 王维新成德文祁卫东
- 关键词：吻合口漏
- RNAi沉默中期因子基因表达对胃癌细胞黏附和侵袭力的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨中期因子(midkine,MK)基因小干扰RNA对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:培养人胃癌BGC-823、HGC-27、MGC-803及SGC-7901细胞株,以荧光实时定量PCR方法检测中期因子基因mRNA表达;筛选出中期因子表达最高者。采用中期因子基因小干扰RNA转染胃癌细胞株,分别以荧光实时定量PCR和免疫荧光方法观察中期因子基因mRNA和蛋白水平,然后以四唑蓝(MTT)比色法检测细胞黏附性,以Boyden方法检测癌细胞侵袭力。结果:4株胃癌细胞中,中期因子均有不同程度的表达,以胃癌BGC-823细胞最高;以MK siRNA转染胃癌BGC-823细胞后,癌细胞中期因子基因mRNA和蛋白水平明显下降,且呈浓度依赖性;转染组细胞黏附数量明显下降,细胞侵袭力明显下降。结论:中期因子基因在胃癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染胃癌细胞,可抑制胃癌细胞黏附和侵袭能力。
- 祁卫东蒋鹏程张恒马圭范钰
- 关键词：胃癌RNA干扰
- 长链非编码RNA KCNMB2-AS1在胃癌中的表达及机制研究被引量：6
- 2020年
- 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)KCNMB2-AS1在胃癌(gastric cancer,GC)组织和血浆中的表达水平、临床意义及其对胃癌细胞生物学功能的影响和可能机制。方法实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测82例配对胃癌及癌旁对照组织、31例患者和31例健康体检者血浆KCNMB2-AS1的表达;分析KCNMB2-AS1表达量与临床病理特征的相关性。通过细胞计数、克隆形成、Transwell实验及流式细胞术观察敲减KCNMB2-AS1后胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的变化。QRT-PCR检测敲减KCNMB2-AS1对肿瘤相关基因表达水平的影响。结果 KCNMB2-AS1在胃癌组织和血浆中显著高表达,其表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期及预后密切相关。血浆KCNMB2-AS1表达水平诊断胃癌的ROC曲线下面积为0.865。敲减KCNMB2-AS1抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡,间质标志N-cadherin、Fibronectin 1和转录因子Twist1、Slug、ZEB1表达下调。结论 KCNMB2-AS1在胃癌组织及血浆中均高表达,其高表达与疾病进展及不良预后相关。血浆KCNMB2-AS1表达水平对诊断胃癌具有一定价值。敲减KCNMB2-AS1抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导胃癌细胞凋亡并抑制EMT过程。
- 唐银炳陆佳伟谢黎张伟亚邹晨祁卫东马圭张文波蒋鹏程
- 关键词：胃癌长链非编码RNA上皮间质转化
- 槲皮素对人胃癌细胞侵袭和MMP-2表达的影响被引量：12
- 2012年
- 目的:观察槲皮素(Quercetin,Que)对人胃癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法:采用不同浓度的槲皮素处理胃癌BGC-823细胞后,以软琼脂集落培养试验检测癌细胞锚着不依赖性增殖,以Boyden小室模型方法检测癌细胞侵袭能力,采用荧光实时定量PCR检测癌细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metallopeptidase-2,MMP-2)基因mRNA水平,以Western blot方法检测癌细胞MMP-2基因蛋白水平变化.结果:不同浓度的胃癌BGC-823细胞经槲皮素处理后,恶性增殖和侵袭能力均明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.005,P<0.005).槲皮素处理组MMP-2基因mRNA和蛋白水平均明显下调,且呈时间和浓度依赖性,即随着作用时间的延长和槲皮素作用浓度的增加,MMP-2的mRNA和蛋白水平逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001).结论:槲皮素可明显抑制胃癌BGC-823细胞侵袭能力,其机制可能与下调MMP-2基因表达有关.
- 王晓燕张尤历张恒祁卫东范钰
- 关键词：胃肿瘤槲皮素基质金属蛋白酶-2
- Bim-1基因在胃癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨Bim-1基因在胃腺癌细胞株、胃癌组织和癌旁组织以及胃癌患者外周血中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:收集80例胃癌患者的癌组织和癌旁组织,培养胃腺癌细胞株(SGC-7901,BGC-823,AGS),采用RT-PCR和实时PCR的方法检测Bmi-1基因的表达情况。另外同时收集Bim-1基因阳性胃癌患者外周血标本以及健康体检者外周血标本各20例,用淋巴细胞分离液(Ficoll)分离获得单个核细胞,采用巢式PCR和实时PCR的方法检测其Bmi-1基因的表达情况。采用蛋白质印迹法验证胃癌组织和对应的癌旁组织以及胃癌患者及健康体检者血单个核细胞中Bim-1蛋白的表达情况。结果:胃腺癌细胞株(SGC-7901,BGC-823,AGS)中Bim-1均高表达;胃癌组织中Bim-1表达(85%)明显高于癌旁组织(30%)(P<0.05);胃癌患者外周血单个核细胞Bim-1基因的阳性率为60%,显著高于健康体检者(P<0.05)。胃癌组织和癌旁组织中Bim-1的蛋白水平存在差异,而在外周血中未见明显差异。结论:Bim-1基因在胃腺癌细胞株以及胃癌组织中高表达,胃癌患者外周血单个核细胞Bim-1的阳性率高于健康体检者,通过检测Bim-1基因可为胃癌的临床诊断及其靶向治疗提供新途径。
- 祁卫东陈锁成王胜许文荣许晓蒙孙靖
- 关键词：胃癌RT-PCR实时PCR
- RNA干扰下调假基因Cripto-3表达对大肠癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：7
- 2013年
- 目的 观察小干扰RNA（siRNA）下调假基因Cripto-3（Cr-3）对人大肠癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 构建Cr-3 siRNA（S1、S2和S3）,分别以3个siRNA转染大肠癌SW-620细胞后,采用荧光实时定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测筛选出效果最好的siRNA.SW-620细胞分为3组：空白对照组（con-a）、空载质粒对照组（con-b）和Cr-3 siRNA组（siRNA）,其中,siRNA组以Cr-3 siRNA转染处理.用噻唑蓝（MTT）方法检测癌细胞增殖,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,并作统计学分析.结果 S1、S2和S3均能下调Cr-3 mRNA的表达,有效率分别为83.5％、61.6％和42.8％,说明S1效果最好.以S1转染大肠癌SW620细胞株后,MTT结果显示,72 h con-a、con-b和siRNA组相对增殖率分别为（0.927 ±0.037）％、（0.922 ±0.035）％、（0.663 ±0.018）％ （P ＜0.05）；Transwell结果显示,con-a、con-b和siRNA组穿膜细胞数分别为（38 ±4）、（40±3）和（8±1）个（P＜0.05）.结论 假基因Cr-3在大肠癌细胞增殖侵袭中起着重要的作用；采用RNA干扰下调Cr-3表达可抑制大肠癌细胞增殖和侵袭.
- 范钰满昌峰徐娟彭辉勇张恒祁卫东蒋鹏程
- 关键词：大肠肿瘤RNA干扰
- 表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、侵袭和cripto蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的观察表没食子儿茶素没食子酸醋(EGCG)对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法将人胃癌BGC823细胞分为两组,实验组加入20、40、80μmol/L的EGCG处理,以RPMI1640代替EGCG处理细胞作为空白对照组,采用划痕试验法检测癌细胞迁移能力,以Transwell法检测癌细胞侵袭能力,用免疫荧光方法检测癌细胞cripto基因蛋白水平变化。结果实验组细胞迁移距离、细胞穿过滤膜个数、cripto基因蛋白阳性率明显低于对照组,且均呈剂量依赖性,P均<0.05。结论 EGCG可明显抑制胃癌BGC823细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与下调cripto基因表达有关。
- 朱祥祁卫东蒋鹏程马圭范钰
- 关键词：胃肿瘤胃癌
- 腹腔镜在胃癌D2根治术中应用价值探讨
- 目的:探讨腹腔镜在胃癌D2根治术的应用价值。方法:回顾分析同期150例(2010-05~2014-08)LAGD2以及同期150例OG(传统开腹胃癌手术)。对两组患者术中及术后情况、淋巴结清扫数目、并发症等进行比较分析。...
- 瞿彩兴蒋鹏程桂林祁卫东范钰
- 关键词：腹腔镜胃癌D2
- 文献传递
