石楠
- 作品数：32 被引量：120H指数：5
- 供职机构：河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金河北省教育厅博士基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 新的系统发育标记及其应用被引量：17
- 2003年
- 系统发育标记是阐明个体间遗传关系的基因片段 ,为了区别遗传关系接近的分类单元 ,有许多新的系统发育标记被应用 ,配合其它分类手段的使用 ,为多相分类的研究注入了新的活力。
- 石楠张利平
- 关键词：RNASEPRNA基因GYRBGAP
- 谷氨酰胺转氨酶在Pichia pastoris GS115中的表达及其发酵条件响应面法优化被引量：1
- 2020年
- 为了将筛选得到的吸水链霉菌107.3的谷氨酰胺转氨酶基因在毕赤酵母GS115中表达,并通过优化发酵条件来提高重组菌株酶的表达量,本试验构建了由吸水链霉菌前肽pro、kex2酶切位点、成熟酶mTGase 3部分组成的融合基因,电转至毕赤酵母GS115中进行表达;采用Plackett-Burman(PB)设计和响应面法(RSM)在摇瓶水平研究了重组毕赤酵母的发酵条件(接种量、诱导温度和时间、初始pH值和甲醇浓度)。结果表明:吸水链霉菌的TGase基因在毕赤酵母GS115中得获得成功表达,酶活力为0.3 U/mL;通过PB试验设计确定了影响产酶的显著性因素为诱导初始pH、甲醇浓度和接种量。进一步选择该3个显著因素进行RSM中心组合试验,确定了最优的产酶条件为:接种量OD600为6、pH 7、甲醇浓度2.0%、诱导温度23℃、诱导时间72 h。优化发酵条件后,重组菌株产TGase酶活力可达1.1 U/mL,是初始酶活的3.6倍。本研究构建的MTG异源表达体系为MTG生产和分子改造提供了平台。
- 于凡刘双陈海清王红静马雯石楠檀建新
- 关键词：谷氨酰胺转氨酶毕赤酵母响应面法吸水链霉菌
- 重叠延伸PCR克隆三孢布拉霉carRA基因及其功能活性检测系统的构建被引量：3
- 2011年
- 三孢布拉氏霉菌CarRA蛋白,既有番茄红素环化酶功能活性又有八氢番茄红素合成酶功能活性,为了对CarRA蛋白进行双功能活性分析,及探测CarRA蛋白的番茄红素环化酶功能活性位点,构建了在大肠杆菌体内通过颜色互补检测两种酶活性的系统。通过重叠延伸PCR的方法克隆得到了carRA基因,并构建原核表达载体pET28a-carRA,与携带crtI/crtB/crtE基因簇的质粒pAC-LYC共转化BL21(DE3),验证番茄红素环化酶功能活性;与以pAC-LYC为基础构建的携带crtI/crtE基因簇的质粒pAC-LYC△(crtB)共转化BL21(DE3),验证八氢番茄红素合成酶功能活性。通过颜色互补的初步鉴定,再以HPLC对代谢产物进行分析,明确了实验中的CarRA蛋白功能活性检测系统的可靠性,为定点突变番茄红素环化酶活性位点而不影响八氢番茄红素合成酶功能活性提供了筛选模型。
- 汤晖石楠于淼刘龙刘静贾颖牛宏彦张利平
- 关键词：重叠延伸PCR八氢番茄红素合成酶
- 多杀菌素产生菌株航天育种效果研究被引量：17
- 2008年
- [目的]探索多杀菌素诱变育种的有效途径。[方法]对多杀菌素经"实践八号"育种卫星搭载后的菌株进行稀释涂布分离并对分离后的菌株进行筛选和发酵测定,计算多杀菌素总效价。[结果]搭载后的刺糖多孢菌SP1,经大量筛选得到2株高产且遗传性状相对稳定的菌株HY463和HY466,多杀菌素总效价分别达到147.51μg/ml和95.33μg/ml,产量分别比出发菌株SP1提高288%和151%。对搭载后的菌株进行稀释涂布分离发现,菌落形态各异,有草帽状、中间凹状、放射线状和宝塔状,并且以草帽状的菌落居多,且不同形态的突变菌株发酵水平也参差不齐。[结论]与UV6、0Co等其他诱变方法相比,空间搭载诱变更能使刺糖多孢菌的产素能力得到较大的提高,是选育多杀菌素高产菌株的有效方法。
- 陈继红张利平郭立格石楠
- 关键词：多杀菌素刺糖多孢菌空间诱变育种
- 红酵母系统发育及番茄红素的测定被引量：2
- 2008年
- [目的]介绍了红酵母分离纯化的方法,菌株系统发育分析及发酵产物番茄红素的测定。[方法]从土壤及落花样品中分离纯化出7株红酵母,对其进行18S rDNA序列分析,并用高效液相色谱法对7株野生菌株的胞内色素产物进行了初步分析鉴定。[结果]18SrDNA序列分析可初步鉴定这7株菌分别属于红冬孢酵母菌属和红酵母属。用高效液相色谱测定7株菌种胞内抽提物中的番茄红素含量,发现仅有菌株06944的胞内抽提物中含有番茄红素。将菌株06944发酵产番茄红素的HPLC图谱与番茄红素标准品的对比,可初步鉴定所筛出的菌株06944产番茄红素,产量为2.96μg/ml。[结论]菌株06944为红冬孢酵母属,无致病性,可直接作为工业生产菌种。
- 赵山山石楠张利平
- 关键词：红酵母系统发育番茄红素高效液相色谱
- 微生物学研究型设计性实验教学改革与实践被引量：14
- 2018年
- 生命科学及生物产业的迅速发展对高校学生实践能力和创新能力的培养提出了更高要求。为了提高生物技术和生物工程专业学生的实践能力和科研创新能力,我们在微生物学实验教学中开展了研究型设计性实验教学改革,并针对研究型设计性实验项目的内容特点及其在教学过程中存在的常见问题,总结出一套较为完善的教学设计方式和过程管理模式。为期12年的实践表明,开展研究型设计性实验教学对于促进学生的专业学习,提高其实践能力及科研创新能力作用显著。研究型设计性实验教学是具有推广意义的教学新模式。
- 吕志堂张秀敏赵丽坤石楠李景晨
- 关键词：微生物学
- 黏细菌93431次级代谢产物的分离纯化及活性测定
- 2012年
- 目的从黏细菌发酵产物中寻找抗乳腺癌活性物质。方法采用分析型高效液相色谱和制备型高效液相色谱对黏细菌93431菌株发酵产物的甲醇浸提液进行分析与分离,采用MTT法,以人乳腺癌细胞株MCF-7、人胚肺成纤维细胞株MRC作为实验模型,对提取的各组分活性进行测定。结果从黏细菌93431菌株的发酵产物中分离得到4种组分,其中93431-1在质量浓度100μg/mL、作用24 h时,对MCF-7细胞的抑制率达51.65%,对MRC细胞的抑制率为17.54%。结论黏细菌93431菌株中93431-1对MCF-7细胞有良好的抑制作用,且对MRC细胞毒性较小。
- 刘斌王鸿鹏陈川张利平石楠汤辉郭立格
- 关键词：黏细菌MCF-7细胞
- 具杀虫活性放线菌的筛选与产物的初步研究
- 2009年
- 利用几丁质酶抑制化合物筛选模型,对本实验室保藏的500株放线菌进行了筛选,获得阳性样品229份;其中57%的样品对卤虫有不同程度的致死效果。选择致死效果较强的样品进行了薄层层析分析,最终筛选到了6株菌株,其发酵液抽提样品中含有几丁质酶抑制剂。
- 石楠杨润蕾张利平
- 关键词：放线菌杀虫活性
- 复合凝固剂制备彩色嫩豆腐工艺优化被引量：5
- 2019年
- 为确定凝固剂谷氨酰胺转氨酶(TGase)与葡萄糖内酯(GDL)联合应用于彩色嫩豆腐制作时的较佳条件,通过响应面法对制备条件进行了优化。用彩色蔬菜汁作为豆腐的天然染料添加到豆浆中,分别以彩色嫩豆腐的弹性和凝聚性为主要响应值,建立了复合凝固剂浓度和点浆温度的响应面模型。结果表明,相对于复合凝固剂的浓度,点浆温度对于彩色嫩豆腐的质地影响更大;构建的响应面模型可靠,可以用于预测彩色嫩豆腐的弹性和凝聚性。根据响应面模型确定的制备彩色嫩豆腐的优化条件为:TGase添加量1.4g/L,GDL添加量1.7g/L,点浆温度53℃。采用感官评定和质构分析方法,对比了实验条件下制备的彩色嫩豆腐与市售内酯豆腐口感和质地差异,彩色嫩豆腐均优于内酯豆腐。
- 石楠石楠陈海清张莹莹郭凯元刘双董兵马艳丽檀建新
- 关键词：凝固剂谷氨酰胺转氨酶凝聚性
- 0.2%Tu-2制剂对肉兔肠道消化酶活性及生长性能的作用被引量：1
- 2015年
- 研究了0.2%Tu-2制剂对肉兔肠道消化酶活性及生长性能的影响,进一步探讨酶对肉兔的作用机理,为该制剂的生产和应用提供试验依据。选用体格健壮、体重基本相同的35日龄肉兔120只,随机平均分成对照组和试验组两组。对照组自始至终饲喂基础日粮,试验组35-59日龄在基础日粮中添加0.2%Tu-2制剂,然后停止添加Tu-2制剂。观察并记录肉兔粪便中4种消化酶活性变化规律和生长情况。结果表明,添加0.2%Tu-2制剂后,肉兔粪便中纤维素酶、蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶的平均酶活力比对照组提高幅度分别为36.65%、31.81%、20.99%、23.08%。平均增重提高16.40%,料重比降低14.15%。但当停饲Tu-2制剂后,试验组中肉兔各项指标又逐渐接近对照组。由此可以说明,Tu-2制剂可以改善肉兔肠道内生态环境,提高肉兔肠道多种消化酶活性,增加饲料转化率,改善肉兔的生长性能。
- 顾雅君刘建荣石楠温秀荣王世英
- 关键词：肉兔消化酶
