王艳丽
- 作品数：10 被引量：65H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种提高小麦成熟胚再生率的培养基及其根癌农杆菌转化方法
- 本发明公开了一种提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法及其专用培养基。本发明所提供的提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法，包括下述步骤：1)将小麦种子灭菌后在无菌水中浸泡15－18小时，将浸泡后的小麦种...
- 叶兴国殷桂香王艳丽陶丽莉徐明星徐惠君杜丽璞王道文辛志勇
- 文献传递
- 主要农作物转基因研究现状和展望被引量：29
- 2006年
- 近15年来,大豆、水稻、玉米、小麦等主要农作物转基因研究取得了较大进展,几乎各种遗传转化方法在这些作物上都取得了成功,尤其是农杆菌介导法,不仅在难转化的双子叶作物大豆上取得了成功,而且在单子叶作物水稻、玉米、小麦上先后取得了突破。同时,将一些与重要性状如抗虫、抗病、抗除草剂、抗逆、品质改良、发育调控、营养吸收等改良有关的外源基因转入了主要农作物。转基因大豆、玉米、棉花、油菜已经大面积种植,产生了极大的经济效益。2004年全球转基因作物的种植面积达到了8100万公顷。对大豆、玉米、水稻和小麦等主要农作物转基因研究进展和产业化现状进行了综述,并对主要农作物转基因研究中存在的问题进行了分析。
- 叶兴国王艳丽丁文静
- 关键词：主要农作物转基因研究
- 农杆菌敏感小麦基因型的筛选研究
- 农杆菌介导的遗传转化在很多植物上的应用都非常成功,而对主要粮食作物小麦来说仍然还比较困难。尽管从1997年Cheng等利用农杆菌介导法首次获得小麦转基因植株以来,国内外相
- 王艳丽叶兴国杜丽璞徐惠君
- 关键词：小麦基因型筛选农杆菌幼胚幼穗GUS基因
- 文献传递
- 农杆菌敏感小麦基因型的筛选及其转化(英文)被引量：22
- 2005年
- 利用C58c1农杆菌菌株(其携带的pPTN290质粒载体上含有nptⅡ基因和GUS基因)为供体材料和小麦幼胚为受体材料,对我国35个春小麦基因型进行了农杆菌敏感性研究和转化研究。组织化学染色结果表明,PM97034、P187、巴140105、扬麦158、新春9号和克丰6号等基因型农杆菌感染后GUS,基因瞬时表达率达到了15.0%～30.0%,显著高于模式基因型Bobwhite。其余幼胚分别在含10～25mg/LG418培养基上诱导愈伤组织和分化植株,抗性再生植株经ELISA检测、PCR检测、叶片离体退绿检测、XGluc染色检测和Southernblot检测,最终从新春9号、PM97034和Bobwhite获得了转基因植株,转化效率分别为3.3%、2.0%和1.1%,新春9号和PM97034的农杆菌转化效率高于Bobwhite。Southernblot检测结果同时表明,外源基因在多数转基因植株中表现为单拷贝整合。T1代植株ELISA检测结果和PCR检测结果表明,外源基因在个别株系中的分离符合孟德尔遗传规律,而在多数株系中的分离偏离了孟德尔遗传规律。阳性植株与阴性植株分离比经χ2c适合性检测,表明外源基因在多数株系中的遗传符合3∶1分离规律。本文首次对不同小麦基因型进行了农杆菌敏感性和转化效率研究,筛选到新春9号和PM97034两个对农杆菌比较敏感且转化效率比较高的基因型,可望广泛用于小麦转基因研究。
- 叶兴国王艳丽康乐杜丽璞徐惠君
- 关键词：小麦农杆菌转化基因型筛选分子检测
- 一种提高小麦成熟胚再生率的培养基及其根癌农杆菌转化方法
- 本发明公开了一种提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法及其专用培养基。本发明所提供的提高小麦成熟胚再生率的根癌农杆菌介导的转化方法，包括下述步骤：1)将小麦种子灭菌后在无菌水中浸泡15-18小时，将浸泡后的小麦种...
- 叶兴国殷桂香王艳丽陶丽莉徐明星徐惠君杜丽璞王道文辛志勇
- 文献传递
- 克服根癌农杆菌介导小麦幼胚褐化的转化方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的转化小麦幼胚的方法及其专用培养基。本发明所提供的根癌农杆菌介导的转化小麦幼胚的方法，包括下述步骤：1)将小麦幼胚接种于预培养的培养基中，24-26℃的培养温度下黑暗培养4-7天；2)用目的...
- 叶兴国陶丽莉王艳丽殷桂香任贤魏亦勤杜丽璞徐惠君陈孝辛志勇
- 文献传递
- 高羊茅和黑麦草农杆菌介导转化体系的研究被引量：13
- 2007年
- 利用C58C1农杆菌菌系(携带的表达载体上含GUS基因和nptII基因)感染4个草坪草品种追寻者、爱神特、腾跃和守门员成熟胚来源的愈伤组织,共培养后部分愈伤组织进行X-Gluc组织化学染色检测,其余愈伤组织在含G41810～25mg/L的MS改良培养上先后筛选抗性愈伤组织和分化抗性再生植株,对移栽成活的144棵抗性再生植株分别进行了ELISA检测、PCR检测和组织化学染色检测。愈伤组织阶段X-Gluc染色检测结果表明,4个草坪草品种GUS基因瞬间表达率8.6%～46.9%,爱神特愈伤组织对农杆菌侵染最为敏感,其次是腾跃和守门员,追寻者最不敏感;ELISA检测结果表明,45株呈现阳性,证明nptII基因已转入草坪草并已表达;PCR检测结果与ELISA检测结果一致,表明nptII基因确实已经整合到了草坪草基因组中,且没有发生沉默现象;转基因植株X-Gluc染色检测结果表明,GUS基因在43株中得到了稳定表达,在2株中发生了沉默现象。4个草坪草品种抗性再生植株分化率0%～43.5%,转化率0%～21.5%。结果还表明,GUS基因瞬间表达率与稳定转化率在草坪草上很不一致,不能作为衡量基因型转化效果的指标。
- 王艳丽叶兴国董芳乔卫华陶丽莉李晓璐许兴
- 关键词：草坪草分子检测
- 小麦成熟胚再生体系及基因枪转化的初步研究被引量：4
- 2005年
- 以小麦品种晋麦2148的成熟胚为外植体,消毒后用解剖刀刨碎,接种于MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+2mg·L-12,4D+8g·L-1琼脂糖的培养基中诱导愈伤组织,将诱导3周的成熟胚愈伤组织接种到胚状体成熟培养基(MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+0.2mg·L-1IAA+8g·L-1琼脂糖)中培养4-8周,然后转接到再生培养基(1/2MS+VB5+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂糖)中进行再生成苗.接种1200块成熟胚,得到1123块愈伤组织,最终形成258株再生苗,再生率为21.5%.在建立了再生体系的基础上,用基因枪介导法将GUS基因导入成熟胚愈伤组织,Xgluc染色表明,GUS基因已经在小麦成熟胚愈伤组织中表达.将100块愈伤组织用Xgluc染色,29块愈伤组织出现肉眼可见的蓝色小点.
- 林德书王艳丽庄振宏鲁国东叶兴国王宗华
- 关键词：成熟胚基因枪转化GUS基因体成熟再生苗再生率
- 克服根癌农杆菌介导小麦幼胚褐化的转化方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的转化小麦幼胚的方法及其专用培养基。本发明所提供的根癌农杆菌介导的转化小麦幼胚的方法，包括下述步骤：1)将小麦幼胚接种于预培养的培养基中，24－26℃的培养温度下黑暗培养4－7天；2)用目的...
- 叶兴国陶丽莉王艳丽殷桂香任贤魏亦勤杜丽璞徐惠君陈孝辛志勇
- 文献传递
- 基于小麦成熟胚培养的农杆菌转化研究
- 自 Vasil 等1993年利用基因枪介导法、Cheng 等1997年利用农杆菌介导法首次获得小麦转基因植株以来,小麦转基因技术日趋成熟,研究重点已经从利用标记基因、报告基因建立小麦转化体系,过渡到了利用功能基因转化改良...
- 王艳丽叶兴国王道文
- 关键词：小麦农杆菌胚培养
- 文献传递
