王盈 作品数:22 被引量:89 H指数:5 供职机构: 上海市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 科技部基础研究重大项目前期研究专项 上海市医学重点学科(专科)建设项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
EIAV减毒疫苗免疫后马外周血单个核细胞中IFN-γ的转录 被引量:5 2006年 目的:探讨马传染性贫血病毒(Equineinfectiousa-nemiavirus,EIAV)驴白细胞减毒疫苗(DLV)免疫马后,外周血单个核细胞(PBMC)中IFN-γmRNA转录水平与免疫保护应答的关系,揭示DLV的免疫保护机制。方法:应用分子克隆及实时定量RT-PCR技术,建立马PBMC中IFN-γmRNA转录水平的定量检测方法,在不同时间点定期观察4组(疫苗免疫组、阴性对照组、强毒株阳性对照组及EIAV自然感染组)12匹马PBMC中IFN-γmRNA的转录水平及分布特征,同时监测体温变化等指标。疫苗株免疫动物8个月后,用EIAV强毒株攻击,观察攻击前后IFN-γmRNA转录水平的变化。结果:疫苗免疫马在免疫期内,PBMC中IFN-γmRNA转录的量显著高于阴性对照组及自然感染组(P<0.01)。免疫后用EIAV强毒株攻击,IFN-γ转录的量继续升高,4匹免疫马均获得完全保护;强毒株阳性对照组IFN-γmRNA转录的量随疾病的进展波动,发热期明显下降。结论:本研究首次证明,EIAV减毒疫苗可诱导马PBMC中IFN-γ基因高效转录,其转录水平与DLV的免疫保护密切相关。此结果在分子水平为阐明DLV的免疫保护机制提供了新的实验依据。 王盈 张晓燕 魏丽丽 吴东来 王晓钧 相文华 沈荣显 邵一鸣关键词:马传染性贫血病毒 转录 马传染性贫血病毒LTR的研究进展 被引量:2 2004年 马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)引起马属动物以贫血,持续感染,反复发热为特征的一种急性烈性传染病.与人免疫缺陷病毒(HIV-1)同属反转录病毒科慢病毒属的重要成员,二者在基因组结构,复制方式和相似的蛋白种类及功能,传播方式和致病机理方面具有极高的相似性.近年来,随着HIV研究的展开带动了EIAV分子生物研究的发展,EIAV是慢病毒系统中结构最为精确的病毒,为研究人艾滋病提供了绝好的试验模型. 魏丽丽 王晓钧 王盈 李景鹏 相文华 沈荣显关键词:传染性 贫血病毒 LTR PD-1/PD-L1信号通路在抗病毒免疫中的研究进展 被引量:5 2010年 程序性死亡因子-1(PD-1)和相应配体PD-L1的组织分布特点及传递的抑制信号在抗原特异性T细胞的活化、增殖及效应过程中发挥着重要作用。PD-1与PD-L1在慢性病毒感染过程中有着不同程度的表达,其表达水平与病毒载量及效应T细胞的活化程度相关,对PD-1/PD-L1的阻断可以改善效应T细胞的功能,控制疾病进展。 肖健 王盈关键词:PD-1 PD-L1 信号转导 慢性病毒感染 MAL表达对HIV感染者疾病进展的影响及相关机制研究 被引量:2 2020年 目的研究T淋巴细胞成熟相关蛋白(MAL)对HIV感染者疾病进展的影响,并探索其相关分子机制。方法利用流式细胞术检测MAL在HIV感染不同阶段T细胞上的表达,分析MAL表达水平与疾病进展的相关性;通过细胞系和体外刺激模型研究MAL对细胞因子分泌、细胞增殖的影响;利用细胞系模型检测MAL对HIV病毒包装的影响。结果MAL表达水平与HIV感染者CD4^+T细胞绝对数和CD4^+T/CD8^+T比值呈显著正相关,高CD4^+T细胞组MAL的表达显著高于低CD4^+T细胞组;MAL敲除下调T细胞IL-2分泌,对细胞增殖影响不明显;MAL过表达对病毒总量无影响,但可提高HIV在细胞内的感染效率。结论本研究发现MAL表达水平与HIV感染者疾病进展呈显著负相关,其下调表达可抑制IL-2分泌,从而影响T细胞活性;MAL过表达可提高HIV的感染效率,机制有待进一步研究。 董原 林怡 周磊明 肖健 王盈关键词:HIV-1 疾病进展 T淋巴细胞 HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1水平增高与其活化状态正相关 被引量:12 2016年 目的分析人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD8+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD38、人白细胞抗原DR(HLA-DR)及KI-67抗原(ki67)的表达水平,探讨HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1表达水平与免疫活化和免疫耗竭的关系及意义。方法收集HIV-1感染者87例,健康志愿者22例,密度梯度法分离外周血单个核细胞;采用流式细胞术分析其CD8+T细胞PD-1、CD38、HLA-DR、ki67的表达水平;观察用抗PD-L1 m Ab阻断PD-1/PD-L1通路后CD8^+T细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平变化。结果 HIV-1感染者CD8^+T细胞PD-1表达水平显著高于健康对照组;CD8^+T细胞PD-1水平与病毒载量呈正相关,与CD4^+T细胞数呈负相关;CD8^+T细胞PD-1与CD38、HLA-DR表达呈正相关,与ki67表达无相关性;体外阻断PD-1/PD-L1通路后TNF-α、IFN-γ的表达量增加。结论 HIV-1感染者外周血CD8^+T细胞PD-1表达增加;PD-1过表达与HIV感染过程中CD8^+T细胞功能受抑、免疫耗竭及疾病进程相关;体外阻断PD-1/PD-L1通路可恢复CD8^+T细胞功能。 肖健 刘显 郁晓磊 董原 王绪琴 冷静 杨荣阁 王盈关键词:免疫活化 马传染性贫血病毒自然感染马LTR序列分析 被引量:1 2005年 我国从 2 0世纪 70年代开始使用EIAV弱毒疫苗后 ,在全国范围内基本控制了马传贫的发生 ,我们从现地少数EIAV琼扩阳性马外周血中扩增并克隆了二株EIAV前病毒 5’LTR序列 ,并与国内外毒株 5’LTR序列进行了比较分析 ,发现中国EIAVLTR特有的特异性细胞转录因子结合基序 ,同时发现PEA2位点不是强毒特有的基序 ,在弱毒中亦发现该基序。 魏丽丽 王晓钧 王盈 李景鹏 相文华 沈荣显关键词:马传染性贫血病毒 长末端重复序列 HIV-1感染者CD4+CD25^nt/hi CD127^lo调节性T细胞PD-1表达水平与疾病进展的关系 被引量:7 2009年 目的:阐明HIV-1感染者外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)表面PD-1的表达水平与疾病进展的关系。方法:选取108名未经治疗的不同进展期的HIV-1感染者和27名健康人对照,采集静脉血,用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离获得PBMC,加入PerCP-CD4抗体、FITC-CD25抗体、PE-CD127抗体和APC-PD-1抗体,经细胞表面四色染色、流式细胞术(FCM)分析Treg表面PD-1的表达;另将50 L全血加入Trucount绝对计数管,采用Multitest CD3/CD8/CD45/CD4试剂盒检测CD4+T细胞绝对数;分离静脉血血浆,NucliSens EasyQ测定血浆HIV-1病毒载量;实验数据采用SPSS14.0统计学软件分析处理。结果:HIV-1感染者Treg表面PD-1表达水平显著高于健康人(5.33%±2.24%vs1.72%±0.65%,P<0.01);AIDS期(7.87%±2.23%)明显高于进展期(5.21%±1.72%,P<0.05)和新近感染者(3.22%±1.01%,P<0.05);HIV-1感染者Treg表面PD-1表达水平与血浆中的HIV-1病毒载量和CD4+T细胞绝对数密切相关。结论:首次证实HIV-1感染者外周血中Treg表面PD-1表达增加,且表达水平与病程进展相关。该结果为进一步揭示HIV-1感染中Treg的效应机制、探索新的免疫治疗方案提供了理论及实验依据。 曹清华 薛以乐 王盈关键词:HIV-1 CD4+CD25+调节性T细胞 CD127 PD-1 EIAV弱毒疫苗免疫马外周血单核细胞IL-2表达水平的研究 2005年 目的:通过定量监测马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗免疫马外周血单核细胞(PBMC)IL -2表达水平的变化特征,探讨EIAV弱毒疫苗的免疫保护机制。方法:用实时定量RT- PCR技术建立了马外周血PBMCIL- 2表达水平的定量检测方法。在不同的时间点定期对4组(疫苗免疫组、健康对照组、强毒攻毒组和EIAV自然感染组) 1 2匹马的外周血PBMCIL -2表达水平进行了检测,同时观察了临床症状及体温变化等指标。疫苗株免疫动物8个月后用强毒攻毒,观察了攻毒前后IL -2表达水平的变化。结果:( 1 )疫苗免疫马外周血PBMCIL- 2的表达量显著高于健康对照组及自然感染组(P <0 .0 1 ) ,且免疫后攻毒IL 2继续升高,4匹疫苗免疫马均获得完全保护;( 2 )强毒攻毒对照组IL 2表达量随疾病进展波动,发热期明显下降。结论:首次证明EIAV弱毒疫苗可诱导马外周血PBMC表达高水平的IL -2 ,提示IL- 2在疫苗的免疫保护应答中发挥了重要作用;IL -2表达水平还与EIAV感染后的疾病进展密切相关。 王盈 魏丽丽 张晓燕 吴东来 相文华 王晓钧 吕晓玲 沈荣显 邵一鸣关键词:马传染性贫血病毒 弱毒疫苗 外周血单核细胞 白细胞介素2 实时定量RT-PCR 痘病毒的研究进展 被引量:1 2003年 猪痘(SwP)首先由Spinola报道于欧洲,以后由McNutt等报道于北美.SwP呈世界性分布,其发生通常与猪的饲养卫生条件欠佳和集约化开放式饲养管理有关. 魏丽丽 王盈 宋岩 李景鹏 相文华关键词:痘病毒 病原学 流行病学 分子生物学 发病机理 症状 马传染性贫血病弱毒疫苗诱导细胞因子的研究 王盈关键词:细胞因子 实时定量RT-PCR