王改丽
- 作品数：16 被引量：29H指数：3
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 羔羊外周血单个核细胞转化MTT比色法最佳检测条件的筛选被引量：6
- 2011年
- 为了建立羔羊外周血单个核细胞转化检测的MTT比色法,对影响MTT比色法的3个主要因素(包括刺激原、细胞浓度、培养时间)进行了探索性的研究。结果表明,MTT法检测的最佳条件为:植物血凝素(PHA)浓度为10μg/mL,细胞密度为1×107个/mL;或者刀豆蛋白A(ConA)浓度为40μg/mL,细胞密度为2×107个/mL。反应条件以37℃培养48 h为佳。
- 张冰冰赵魁贺文琦王栋臧德跃陈克研王改丽高丰
- 关键词：羔羊外周血单个核细胞MTT
- 吉林省2006-2010年羊传染性脓疱病的流行病学调查及分析被引量：9
- 2011年
- 为了解近年来羊传染性脓疱病在吉林省的流行情况,本试验采用PCR方法对2006-2010年间采自吉林省9个不同市县85个养羊户疑似羊传染性脓疱病毒(ORFV)感染的628份痂皮样本(背部、乳房、四肢以及尾根等部位皮肤)进行羊传染性脓疱病毒核酸的检测,在各市县不同年龄不同品种羊的皮肤痂皮样本中均检测到一定程度的ORFV,平均阳性率为24.36%(153/628),其中以1～6月龄羔羊的阳性检出率最高。应用间接ELISA方法对同期采集自上述地区羊群中的2 160份血清样本进行ORFV抗体检测,其中有852份呈现ORFV抗体阳性反应,平均阳性率为39.44%(852/2 160)。以上结果表明,ORFV在吉林省大部分地区羊群中的感染已经非常普遍。
- 郭良兴赵魁赵广海贺文琦袁洁陆慧君王改丽苏高莉高丰
- 关键词：PCRELISA流行病学
- 猪A型塞内卡病毒、猪水泡性口炎病毒二联灭活疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种猪A型塞内卡病毒、猪水泡性口炎病毒二联灭活疫苗及其制备方法，属于动物二联灭活疫苗技术领域。解决了现有技术中缺少有效的防治猪A型塞内卡病毒病、猪水泡性口炎病毒病两种疾病联苗的问题。本发明的猪A型塞内卡病毒、猪...
- 兰云刚姚来顺王炳量高飞曹泽昭王改丽贺文琦宋德光高丰
- 宿主细胞CyPB基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2015年
- CyPB作为亲环蛋白(cyclophilins,CyPs)家族成员之一,是环孢菌素A、K506、雷帕霉素等免疫抑制药物在细胞内的主要结合蛋白。本课题组前期利用抑制性消减杂交技术对羊传染性脓疱病病毒(orf virus,ORFV)感染MDBK前后宿主细胞差异基因进行筛选时发现,正向文库中CyPB显著上调表达,但其在ORFV侵染过程中的作用尚不清楚。为了进一步明确CyPB对ORFV侵染复制的影响,根据从GenBank中获取的牛源CyPB基因编码区全长651bp基因序列,设计1对针对牛源CyPB基因的特异性引物,利用RT-PCR方法扩增获得CyPB基因全长基因序列。将获得的CyPB基因连接至PET-32a载体,转化到BL21菌株中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析可见在25 000处有与预期大小一致的蛋白条带。上述结果表明,本研究成功诱导表达纯化出His-CyPB融合蛋白,该结果将为针对牛源CyPB蛋白功能的研究提供重要的物质基础。
- 毕经影宋德光张頔黄后双王春霞王改丽田忠华高丰赵魁
- 关键词：原核表达纯化
- 和厚朴酚在制备治疗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染药物中的应用
- 本发明涉及一种和厚朴酚在制备治疗猪血凝性脑脊髓炎病毒感染药物中的应用，属于医药技术领域。本发明具体通过对体外猪血凝性脑脊髓炎病毒感染细胞模型和体内猪血凝性脑脊髓炎病毒感染小鼠模型试验进行研究，结果显示和厚朴酚在体内外均能...
- 兰云刚贺文琦曹泽昭陆慧君王炳量赵越王改丽宋斯伟高丰
- ORFV感染宿主细胞的mRNA表达谱变化及其诱导细胞自噬机制的研究
- 羊传染性脓疱病毒（Orf virus，ORFV）是痘病毒科副痘病毒属的代表种，具有嗜上皮性，绵羊、山羊以及人发生感染后通常在口、唇等部位皮肤出现丘疹、脓疱等损伤性病变，因此该病又俗称为“羊口疮”（Orf）。Orf作为一种...
- 王改丽
- 关键词：羊传染性脓疱病毒自噬信号转导
- 水疱性口炎病毒糖蛋白基因的真核表达及其初步应用
- 2014年
- 为验证水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)糖蛋白与半乳糖凝集素1(lectin galactoside-binding soluble 1,LGALS1)之间的相互作用,本研究将VSV-G全基因插入至真核表达载体pEF1α-IRES-DsRed-Express2中,构建了真核表达质粒pEF1α-VSV-G。在DNA转染试剂的作用下,将pEF1α-VSV-G转染至BHK-21细胞中,转染后24h经荧光显微镜观察即可见细胞内有红色荧光信号。提取细胞蛋白后经Western-blotting检测,证明VSV-G蛋白成功表达。将表达的蛋白与LGALS1共同用于免疫共沉淀试验,Western-blotting检测结果说明表达的蛋白可以用于蛋白相互作用的研究。本试验为深入开展VSV-G蛋白受体的研究奠定了基础。
- 王丽王改丽兰云刚赵魁贺文琦高丰宋德光
- 关键词：水疱性口炎病毒G蛋白真核表达
- 靶向S基因siRNA抑制猪血凝性脑脊髓炎病毒在N2a细胞中的复制被引量：3
- 2011年
- 以猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)的S糖蛋白基因作为靶基因,设计并体外转录合成2对小干扰RNA(siRNA),分别为SS1和SS2。将SS1和SS2分别转染小鼠成神经瘤细胞(N2a)并在转染后接种HEV,48h后通过间接免疫荧光、血凝试验、TCID_(50)测定以及荧光定量PCR等方法对SS1和SS2抑制HEV在N2a细胞中增殖的效果进行了研究。结果显示,转染细胞感染HEV48 h后,SS1和SS2干扰组细胞出现的绿色荧光明显少于对照组,血凝效价分别是对照组的1/18和1/32,病毒感染滴度分别是对照组的1/28和1/103,两干扰组的HEV基因组的拷贝数分别是对照组的76%和84%。以上结果表明,SS1和SS2均对HEV在N2a细胞中的复制具有不同程度的抑制作用,其中以SS2的抑制作用最为显著。该项试验研究结果不仅为HEV致病机制的研究奠定基础,同时可为抗HEV新型药物及抗病育种新靶点的设计奠定分子生物学基础。
- 兰云刚赵魁王改丽李明谦贺文琦陆慧君陈克研岳占碰高丰
- 关键词：S基因SIRNA
- 便于刚断奶小鼠进食的实验用食糜放置器
- 本实用新型公开了一种便于刚断奶小鼠进食的实验用食糜放置器，包括鼠笼、以及集成于鼠笼内的食糜放置组件；食糜放置组件具有靠近鼠笼底部的取食体、以及与取食体连接的食糜筒；食糜筒通过安装组件悬挂于鼠笼内，且取食体通过食糜筒和安装...
- 兰云刚陆慧君贺文琦王真真刘雪丽曹泽昭王改丽宋斯伟高丰
- 绵羊IFN-γ和IL-2基因SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法的建立及应用被引量：5
- 2010年
- 为探讨传染性脓疱病毒感染后机体的细胞免疫应答,从分子水平对传染性脓疱病毒的免疫机制进行了深入探讨。首先针对Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2以及管家基因GAPDH的mRNA序列分别设计了1对特异性引物,扩增相应的基因片段并构建含有相应基因序列的重组质粒,以所构建的重组质粒作为阳性标准品,建立了用于IFN-γ、IL-2及GAPDH检测的SYBR GreenⅠreal-time PCR方法。该方法线性关系良好,IFN-γ、IL-2和GAPDH标准曲线的相关系数均达0.99以上;敏感性高,初始模板的检出下限均达1×103copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性融解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%。应用该方法对传染性脓疱病毒感染羔羊外周血白细胞中的IFN-γ、IL-2 mRNA的表达水平进行了检测。结果表明,建立的real-time PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,可用于绵羊Th1型细胞因子的检测及定量分析。
- 张冰冰赵魁宋德光臧德跃王栋贺文琦陈克研王改丽高丰
- 关键词：TH1型细胞因子荧光定量聚合酶链反应
