王克强 作品数:76 被引量:154 H指数:9 供职机构: 泰山医学院附属医院 更多>> 发文基金: 泰安市科技发展计划项目 山东省高等学校科技计划项目 山东省医药卫生科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 机械工程 生物学 更多>>
MAPK/ERK特异性抑制剂对结核杆菌低分子多肽抗原活化γδΤ细胞的影响 被引量:2 2016年 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)特异性抑制剂PD98059对结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)活化γδΤ细胞的影响。方法分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用佛波醇酯+离子霉素(PMA+IM)、MtbAg刺激PBMC,流式细胞术检测处理0、6、12、24、48和72 h后γδΤ细胞CD69的表达。浓度为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入MtbAg(MtbAg组)、PMA+IM(PMA+IM组)处理24 h,流式细胞术检测活化γδΤ细胞CD69的表达;Mtb-Ag组继续培养10 d后收集细胞计数细胞总数、检测γδΤ细胞比例并计算γδΤ细胞的绝对数量。结果使用PMA+IM处理6 h,γδΤ细胞CD69表达达高峰;使用Mtb-Ag处理24 h,γδΤ细胞CD69表达达高峰。处理后同一时点两组γδΤ细胞CD69表达比较,差异均具有统计学意义(均P〈0.05)。使用终浓度分别为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入Mtb-Ag、PMA+IM处理24 h,流式细胞术检测显示Mtb-Ag组γδΤ细胞CD69表达分别为(79.0±0.8)%、(75.0±0.7)%、(54.0±0.5)%和(17.0±0.2)%,而PMA+IM组γδΤ细胞CD69表达均在98%以上;MtbAg组继续培养10 d后,细胞总数由培养前的1.5x106分别增殖到(10.3±2.5)x106、(9.5±2.1)x106、(5.8±1.8)x106和(2.1±0.5)x106,γδΤ细胞数分别增殖到(6.2±0.9)x106、(5.0±0.8)x106、(2.1±0.5)x106和(0.4±0.1)x106。结论 Mtb-Ag可以通过MAPK/ERK信号转导通路特异性活化γδΤ细胞。 王克强 侯彦强 冉张申 吴家锋 殷殷 魏丽 李清华 李湘奇关键词:酶抑制剂 FSCE用于乳腺肿瘤术中诊断的研究 2004年 目的:探讨快速染色刮取涂片细胞学检查用于乳腺肿瘤术中快速诊断。方法:采用FSCE对90例乳腺肿瘤术中送检快速检查标本进行刮取涂片细胞学诊断,再与快速病理诊断对照,看其是否相吻合,最后与常规病理检查相比较,看其准确率。结果:FSCE制片全过程不超过1min,准确率98.7%,其中60例恶性肿瘤无一例假阳性,29例良性肿瘤无一例假阴性,1例未确诊者为粘液腺癌。结论:该方法用于乳腺肿瘤术中快速诊断,其时间快,设备简单,操作方便,准确率高,未见假阳性和假阴性。 薛士中 吴家锋 王克强关键词:乳腺肿瘤 术中诊断 病理检查 结核性腹膜炎合并海蓝组织细胞增生症1例 2001年 海蓝组织细胞(Sea blue histiocyte,简称SBH)由Sawitsky等人在1954年首先描述,此种细胞与高雪细胞和尼曼一匹克细胞同属于泡沫细胞,为组织细胞内腊样质(Ceroid)或神经鞘磷脂(Sphingomyelin)和神经鞘糖脂(Glycosphingolipids)的过度贮积。骨髓内SBH增生症,国内外已有不少报道,但骨髓外组织检出SBH国外报道较少,仅见右从肝.脾,肺中检了的报道. 王严 崔玉峰 王克强关键词:海蓝组织细胞增生症 结核性腹膜炎 髓内 检出 泡沫细胞 鞘磷脂 HBV DNA与PreS1以及ALT联合检测乙型肝炎的临床意义 被引量:10 2009年 目的分析HBVDNA与PreS1以及ALT在乙型肝炎患者血清中的检测情况,分析其相互关系,评价其联合检测的价值。方法采用荧光定量PCR法检测HBVDNA,同时用ELISA方法检测PreS1蛋白、动力学方法检测ALT,并分析其相互关系。结果HBeAg阳性组中HBVDNA、PreS1检出率分别为97.1%、94.3%(x^2=0.17,P〉0.05)。HBsAg+、抗HBe+和抗HBc+组中HBVDNA、PreS1的检出率分别为47.4%、73.7%,表明部分HBeAg阴性、抗HBe+患者仍有病毒复制。HBsAg+、抗HBc+组巾HBVDNA、PreS1的检出率分别为65.8%、89.5%,而ALT在这3组中的异常率差异无统计学意义(x^2分别为2.18、1.93、0.03,均P〉0.05),说明血清ALT虽对肝细胞损害极为敏感但缺乏特异性。ALT异常组中HBVDNA和PreS1检出率分别为78.6%、86.3%,两者相关性较高(x^2=2.64,P〉0.05),ALT正常组中HBVDNA和PreS1检出率差异有统计学意义(x^2=9.68,P〈0.01)。PreS1与HBVDNA检出率不一致,可能是PreS1和HBVDNA检测所表达的意义并不完全一致。结论HBVDNA、PreS1以及ALT在乙型肝炎患者血清中所表达的意义各有侧重,在实际工作中应联合检测,互相补充,这样对乙型肝炎患者的诊断与治疗会有更高的临床价值。 孟令国 李和楼 赵建香 王克强 杨洪云 葛建华关键词:DNA 临床实验室技术 脂氧素A4对内毒素休克大鼠生存率及血浆炎性因子水平的影响 被引量:1 2013年 目的探讨脂氧素A4(LXA4)对内毒素休克大鼠生存率及血清炎性因子TNF-α、IL-10、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法雄性Wistar大鼠30只随机分成对照组(A组)、内毒素(LPS)休克组(B组)和LXA4干预组(C组),每组10只。观察大鼠存活时间,并检测各组血浆TNF-α、IL-10、MDA及SOD的水平。结果 LXA4干预能明显延长内毒素休克大鼠的存活时间;与A组比较,B组血清TNF-α、IL-10及MDA水平显著升高(P<0.01),SOD水平明显下降(P<0.01);C组血清TNF-α、MDA水平较B组显著降低(P<0.01),IL-10及SOD水平明显上升(P<0.01)。结论 LXA4可降低内毒素休克大鼠促炎细胞因子水平,促进抗炎细胞因子的产生,减轻细胞的脂质过氧化损伤。 亓云法 许会彬 王克强关键词:脂氧素类 内毒素 休克 炎性因子 8例骨髓外局部组织检出海蓝组织细胞分析 被引量:1 2008年 李继广 王克强关键词:海蓝组织细胞 细胞分析 神经鞘磷脂 泡沫细胞 磷脂酰肌醇3激酶特异性抑制剂LY294002对结核杆菌低分子多肽抗原激活γδT细胞的影响 被引量:5 2015年 目的观察磷脂酰肌醇3激酶(P13K)特异性抑制剂LY294002对CD3单克隆抗体(CD3mAb)活化的T细胞及结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)激活γδT细胞的影响,探讨P13K在CD3mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的78T细胞TCR途径信号转导中作用。方法分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用CD3mAb、佛波醇酯+离子霉素(PMA+IM)、Mtb-Ag刺激PBMC,采用流式细胞术检测CD3’T细胞和78T细胞0、6、12、24、48h和72h的CD69分子的表达情况。PBMC经LY294002(0、0.4、2、10~tmol/L)处理后再刺激培养,用EIA试剂盒检测CD3mAb和PMA+IM刺激组CD3’T细胞白细胞介素(IL)一2的含量;经CD3PE和CD69FITC、v6PE和CD69FITC双染后,检测LY294002对CD3mAb活化T细胞和Mtb.Ag活化的γδT细胞增殖的影响,并计数培养扩增10d的细胞数量。结果用CD3mAb刺激24hCD3’T细胞和γδT细胞CD69的表达均达高峰(均在56%左右),用PMA+IM刺激6h,均达高峰(均在99%左右),用Mtb-Ag刺激24h,亦均达高峰,但CD3^+T细胞和γδT细胞CD69的表达分别为(16.0±0.0)%和(75.2±0.7)%,3组同时间点CD3^+T细胞CD69的表达之间差异均有统计学意义(均P〈0.05),而78T细胞CD69的表达在PMA+IM刺激组高于CD3mAb刺激组和Mtb-Ag刺激组(均P〈0.05),后两组差异则没有统计学意义(均P〉0.05)。用LY294002终浓度分别为0、0.4、2、10μmol/L处理的样本,CD3mAb刺激组CD3^+T细胞CD69的表达分别为(52.0±0.5)%、(46.3±0.4)%、(33.2±0.4)%和(19.1±0.0)%;Mtb-Ag刺激组78T细胞CD69的表达分别为(66.2±0.6)%、(58.4+0.5)%、(38.1±0.3)%和(19.3±0.1)%。0、0.4、2、10μmol/LLY294002处理CD3+T细胞后,CD3mAb刺激组IL-2的含量分别为(561.1±86.2)、(477.0±75.5)、(280.3±53.9)、(36.0±8.7)ng/L,PMA+IM刺激组为� 王克强 侯彦强 段衍超 陈岱韻 吴家锋 刘晶 王雅姝 李清华关键词:T细胞 1-磷脂酰肌醇3-激酶 化学比色法测定血清碳酸氢根的研究 被引量:3 2006年 目的建立一种新的血清碳酸氢根(HCO3-)测定方法。方法应用自配试剂建立两步终点测定法,可满足全自动和手工半自动测定,并对该方法进行方法学评价。结果该法比色液吸收峰556~558 nm,线性范围1~50 mm o l/L,批内CV 2.56%,批间CV 3.55%,回收率96%~103%,与血气分析仪(X)相关良好,Y=0.48+0.989X,r=0.982(n=40),脂血、溶血、黄疸标本对结果无影响,健康人静脉HCO3-浓度x-±s=25.76±2.26 mm o l/L。结论该法操作简便,结果准确,试剂稳定,成本低廉,适合各级医院常规和急诊使用。 刘瑞锁 张本文 王克强 郝学梅 赵辉 晁储璋关键词:化学比色法 二氧化碳分压 结核杆菌低分子多肽抗原再次刺激其活化的T细胞对诱导γδT细胞CD69分子再次表达的影响 被引量:9 2014年 目的 观察结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)再刺激Mtb-Ag活化的T细胞(Mtb-AT细胞)诱导γδT细胞CD69分子的再表达的情况.方法 分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用Mtb-Ag刺激PBMC,采用直接免疫荧光染色法通过CD3PE/CD69FITC、γδPE/CD69FITC细胞双染检测γδT细胞0、6、12、24、48和72 h CD69分子的表达情况.PBMC经Mtb-Ag刺激活化扩增培养至10 d后再次加入Mtb-Ag,经培养0、6、12、24、48和72 h后收集细胞,再次检测CD69分子的表达情况.结果 培养0、6、12、24、48和72 h后,Mtb-Ag初次刺激γδT细胞后CD69分子的表达分别为0.91%、15.1%、35.2%、75.2%、59.4%和50%.再次刺激培养0、6、12、24、48和72 h后,γδT细胞CD69分子的表达分别为1.7%、72.3%、73.5%、50.3%、45.6%、41.7%.结论Mtb-Ag初次刺激γδT细胞表达CD69分子约在24 h达高峰,随后快速下降;Mtb-Ag再次刺激Mtb-AT细胞诱导γδT细胞CD69分子的再表达,6h时CD69分子达高峰,可维持到12 h.这为寻求γδT细胞迅速活化、CD69分子的迅速表达奠定了方法学基础. 王克强 侯彦强 王晓红 姜倩 晋红梅 朱莉 朱蓓 韩国新关键词:ΓΔT细胞 血清前白蛋白及总胆汁酸检测在肝硬化患者中的临床应用 2012年 目的探讨血清前白蛋白(PA)及总胆汁酸(TBA)检测在肝硬化患者中的临床应用。方法严格按照Child-pugh评分标准进行评分将80例肝硬化患者分为A、B、C组,20例健康体检者作为对照组,分别检测血清PA、TBA水平,并同时检测肝硬化不同病因的血清PA、TBA水平,比较其差异。结果血清PA和TBA水平在Child-pugh A、B、C级各组之间两两比较差异有显著性;而PA在A级与B、C级之间差异有非常显著性(P<0.01),TBA在C级与A、B级之间差异有非常显著性(P<0.01)。同时也显示肝硬化病因不同血清PA、TBA也有差别。结论血清PA、TBA能敏感地反映肝硬化程度,有助于病情及预后判断。 刘文龙 王克强关键词:肝硬化 前白蛋白 总胆汁酸