王光路
- 作品数：11 被引量：13H指数：3
- 供职机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 一株耐冷冻面包酵母菌株及其基因无痕敲除方法
- 本发明公布了一株耐冷冻面包酵母菌株及其构建方法，具体是通过无痕敲除基因NTH1构建的耐冷冻面包酵母BY-14AΔU，保藏编号CGMCC No.7379。无痕基因敲除方法构建耐冷冻面包酵母，是通过融合PCR和酵母整合质粒Y...
- 肖冬光王光路董建张翠英
- 文献传递
- 中性海藻糖酶基因缺失对面包酵母耐冷冻性的影响被引量：4
- 2014年
- 研究了中性海藻糖酶基因(NTH1和NTH2)对面包酵母耐冷冻性的影响。通过分析中性海藻糖酶基因缺失突变株和亲本菌株(BY6-9α)的生长曲线、生物量、比生长速率、中性海藻糖酶酶活力、胞内海藻糖含量、胞内海藻糖降解速率、冷冻存活率、冷冻前产气量、比发酵力、冷冻后产气量和相对发酵力,结果表明,中性海藻糖酶基因对酵母生物量、比生长速率、胞内海藻糖含量和比发酵力均无显著影响,而相对于亲本菌株(BY6-9α),TL-101(nth1)和TL-201(nth1 nth2)的胞内海藻糖降解速率分别减慢了9.22%和15.60%,冷冻后CO2产生量分别提高了63.04%和65.22%,-20℃冷冻28 d后冷冻存活率分别提高了91.06%和103.01%,冷冻后相对发酵力分别提高了95.95%和116.04%,这充分说明敲除NTH1基因能明显改善酵母菌株的耐冷冻特性,而且酵母的耐冷冻特性与胞内海藻糖降解速率呈负相关。TL-102(nth2)的耐冷冻特性与亲本菌株无显著差异,说明单敲NTH2基因对酵母耐冷冻性无显著影响。
- 谭海刚董健王光路许海艳肖冬光
- 关键词：酵母冷冻发酵
- 合成利巴韦林的关键酶嘌呤核苷磷酸化酶的原核表达及活性分析
- 2009年
- 目的:在枯草芽孢杆菌中表达嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)并分析其活性。方法:将PNPase的编码基因deoD克隆入pDG148表达载体,构建原核穿梭型表达载体pDG148-deoD,采用电转化方法将表达载体转入枯草芽孢杆菌WB600后诱导表达重组PNPase;研究重组PNPase的活性。结果与结论:获得的重组PNPase活性较对照提高了193.9%,其最适催化条件为65℃、pH7.5、500μmol/L底物浓度和1%1,2,4-三氮唑-3-羧甲酰胺;对重组菌的发酵条件进行了初步优化,IPTG诱导6h后在发酵液中添加0.5%的Tween-80能大幅度提高重组PNPase的酶活力。
- 邢晨光吴飞王光路谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词：嘌呤核苷磷酸化酶原核表达活性分析利巴韦林
- 微生物酶法生产利巴韦林研究进展被引量：1
- 2011年
- 本文介绍了利巴韦林理化性质、应用和主要生产方法,重点介绍了最具工业化发展潜力的微生物酶法生产原理及最新研究进展。
- 夏俊刚王光路谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词：利巴韦林
- 利巴韦林(病毒唑)发酵培养基的正交优化被引量：1
- 2009年
- 以枯草芽孢杆菌TM903为出发菌株通过正交设计实验研究了葡萄糖、TCA(三氮唑甲酰胺)、MnSO4、KH2PO4对TM903发酵生产利巴韦林的影响,初步确定了利巴韦林生产菌TM903的最佳发酵工艺条件。利用优化培养条件配制发酵培养基,进行摇瓶发酵试验,发酵60h产量可达4.21g/L。
- 邢晨光王光路宋翔陈宁
- 关键词：枯草芽孢杆菌发酵工艺利巴韦林正交设计
- 一种基于途径分析的利巴韦林工程菌构建策略
- @@ 利巴韦林为广谱抗病毒药物，对DNA和RNA病毒均有抑制作用，是一种优良的抗病毒药。临床上用于治疗流行性感冒、小铁腺病毒肺炎、病毒性肝炎、呼吸道合胞病毒感染、急性角膜炎、结膜炎、流行性出血热、带状疱疹等。目前国内发酵...
- 邢晨光邓培生吴飞王光路陈宁
- 关键词：利巴韦林工程菌发酵法
- mal62基因高表达对工业面包酵母发酵力的影响被引量：3
- 2012年
- 【目的】构建高麦芽糖利用能力的面包酵母菌株,以期提高面包酵母在不加糖面团中的发酵力,增加经济效益的同时减少成本消耗。【方法】克隆工业面包酵母BY-14的麦芽糖酶基因mal62,以PGK1强启动子和终止子为调控元件,以酵母-大肠穿梭型质粒Yep-C为载体,构建重组表达质粒Yep-CPM,并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BY-14,经筛选鉴定获得酵母转化子BYCPM。进行转化子的酶活力、mal62基因表达水平及发酵力测定,检测目的基因的功能性表达。【结果】工业酵母转化子BYCPM的最大麦芽糖酶活力比对照菌提高15%-52%,发酵力提高40%,比发酵力提高5.6%。【结论】转化子BYCPM具有更高的麦芽糖酶活力和更强的抗葡萄糖阻遏能力。并且在不加糖面团中,转化子具有更高的发酵力,可以在更短的时间内获得更大的产气量且消耗更少的碳源。
- 孙溪张翠英董建王光路吴鸣月肖冬光
- 关键词：麦芽糖酶面包酵母发酵力
- 一株耐冷冻面包酵母菌株及其基因无痕敲除方法
- 本发明公布了一株耐冷冻面包酵母菌株及其构建方法，具体是通过无痕敲除基因NTH1构建的耐冷冻面包酵母BY-14AΔU，保藏编号CGMCC No.7379。无痕基因敲除方法构建耐冷冻面包酵母，是通过融合PCR和酵母整合质粒Y...
- 肖冬光王光路董建张翠英
- 文献传递
- 假交替单胞菌XM2107嘌呤核苷磷酸化酶基因克隆表达、重组蛋白纯化及酶学性质被引量：4
- 2010年
- 【目的】嘌呤核苷磷酸化酶(PNP,EC.2.4.2.1)在酶法合成核苷类药物及中间体中具有广泛应用。本文研究的目标是,获得极地嗜冷菌假交替单胞菌Pseudoa lteromonas sp.XM2107嘌呤核苷磷酸化酶编码基因,并对该酶酶学性质进行研究,以考察该酶在核苷类中间体及药物合成中的潜在应用价值。【方法】利用同源序列PCR技术从Pseudoa lteromonas sp.XM2107基因组DNA中扩增出其编码嘌呤核苷磷酸化酶基因,测序获得编码序列。将该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中进行重组表达以及金属螯合层析纯化,对其酶学性质进行初步研究。【结果】经过测序获得了该酶编码基因序列,全长702 bp,共编码233个氨基酸,大小为25 kDa,Genbank登录号为GQ475485。酶学性质研究发现,该重组酶最适反应温度为50℃,最适酶促反应pH为7.6(25 mmol/L磷酸盐缓冲液),最适酶促反应底物为肌苷(Km值0.389 mmol/L,37℃),且对底物腺苷和鸟苷也有磷酸解活性,在普通温度下具有较高催化活性和较好热稳定性。【结论】来源于Pseudoa lteromonas sp.XM2107的嘌呤核苷磷酸化酶在普通温度条件下具有较高的催化活性及良好热稳定性性质,在核苷类中间体和药物合成中具有较广泛的应用价值。
- 王光路夏俊刚谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词：假交替单胞菌嘌呤核苷磷酸化酶酶学性质
- 游离高表达Mal62基因对面包酵母耐冷冻性的影响
- 2012年
- 通过测定胞内海藻糖积累量、冷冻前后相对发酵力以及存活率的变化,对比游离高表达麦芽糖酶基因(Mal62)的突变株BYCPM与亲本BY14的海藻糖合成能力,研究Mal62基因游离高表达与酵母耐冷冻性之间的关系。结果表明,Mal62基因游离高表达与酵母耐冷冻性有一定的相关性,突变株耐冷冻性改善,其在烘焙产业中具有潜在商业价值。
- 孙溪张翠英董建吴鸣月王光路肖冬光
- 关键词：微生物海藻糖面包酵母存活率
