牛旭晖
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 大肠杆菌乙酸羟基酸合酶的结构生物学研究
- <正>在组成蛋白质的二十种氨基酸中,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸三种称为支链氨基酸。在自然界的各种生物当中,植物、藻类、真菌、细菌和古细菌能够自身合成支链氨基酸,但是动物不能自身合成,需要从外界摄入。因此,参与支链氨基酸合成...
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- 文献传递
- 大肠杆菌乙酰羟基酸合酶Ⅰ调控亚基IlvN的结晶及其与配体缬氨酸的共结晶(英文)被引量:1
- 2012年
- 乙酰羟基酸合酶(acetohydroxyacid synthase,AHAS)是生物体内支链氨基酸合成通路中的第一个通用酶,它是目前市售多种除草剂的靶标.AHAS通常由分子质量较大的催化亚基和分子质量较小的调控亚基组成.催化亚基结合催化必需的辅基(FAD、ThDP和Mg2+);调控亚基可以结合终产物(缬氨酸、亮氨酸或异亮氨酸)作为负反馈信号调节全酶的活性.大肠杆菌中AHAS有3个同工酶,每种同工酶都由催化亚基和调控亚基组成.大肠杆菌ilvN基因编码了AHAS同工酶Ⅰ的调控亚基.ilvN基因克隆到pET28a表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中得到可溶性的大量表达.表达的蛋白质通过镍离子亲和层析和分子筛层析得到纯化.为了对调控亚基的调节机理有深入了解,对IlvN蛋白进行结晶并对蛋白质与其配体缬氨酸进行共结晶.IlvN蛋白晶体衍射能力为2.6魡,IlvN与缬氨酸共结晶的晶体衍射能力为3.0魡.
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