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潘求真: 作品数：54 被引量：147H指数：6; 供职机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

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ORFV-DNA Polymeras基因RNAi-siRNA片段筛选鉴定: 羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)引起的一种羊属动物接触性皮肤传染病,也是人畜共患传染病之一.根据0RFv与宿主细胞相互作用的特点，本研究选定ORFV胞内复制的关键基因DNA poiymera...; 于永忠王金珍张欣媛李珊珊潘求真崔玉东; 关键词：羊口疮病毒靶向基因; 文献传递

提高教师素质,培养合格人才被引量：1: 2004年; 提高教师素质,培养大学生的创新意识和创新能力,造就出一大批具有创新精神和实践能力的高素质的人才,是历史赋予教育工作者的重任。因此,建设高素质的教师队伍,是全面推进素质教育的保证。; 潘求真; 关键词：教师素质教师队伍教育工作者

利用多重PCR技术快速鉴定小鼠的性别被引量：2: 2010年; 为了快速鉴定小鼠的性别,试验根据GenBank及参考文献针对小鼠设计了2对引物IL3-1、IL3-2和SRY-1、SRY-2进行多重PCR,对15日龄小鼠胚胎进行了性别鉴定。结果表明:雄性样品扩增出了544 bp和402 bp 2条片段,而雌性样品只能扩增出1条544 bp的片段。; 潘求真冯国兴郑晓亮马国达; 关键词：多重PCR 性别鉴定细胞小鼠

山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体的构建: 2012年; 为了构建在哺乳动物细胞中表达的山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体,试验根据克隆到T载体上的山羊TLR2测序结果,设计1对不含终止子的引物,将山羊TLR2 PCR产物连接到pEGFP-N1载体上,用磷酸钙法转染293T细胞,并在荧光显微镜下观察。结果表明:重组质粒经酶切和测序鉴定正确,且在293T细胞中表达;融合蛋白发出绿色荧光,表明TLR2-EGFP主要分布在细胞膜上。说明试验成功地构建了pEGFP-TLR2-N1绿色荧光蛋白融合载体。; 潘求真冯国兴李姗姗张弘韬崔玉东连正兴; 关键词：山羊绿色荧光蛋白基因表达

沉默羊传染性脓疱皮炎病毒DNA聚合酶基因的RNAi载体的构建: 2012年; 为了构建用于沉默羊传染性脓疱皮炎病毒(Orf virus,ORFV)DNA聚合酶基因的2种载体,试验选择病毒复制所必需的DNA聚合酶基因作为干扰靶基因,并设计靶基因的扩增引物,经PCR扩增后测序;随后,与Check2载体分别经PmeⅠ和NotⅠ双酶切,酶切后连接产生Check2-靶基因(Check2-D)重组质粒;然后,利用公用网站按照RNAi序列设计的原则,设计RNAi靶点序列并合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经XhoⅠ和HpaⅠ酶切后的pll3.7载体连接产生pll3.7-shRNA质粒;最后,利用磷酸钙法进行pll3.7-shRNA质粒和Check2-D质粒共转染293T细胞,利用双荧光检测系统试剂盒检测其RNA干扰效果。结果表明:成功构建了pll3.7-shRNA质粒和Check2-靶基因重组质粒,干扰效果最好,可达到91.0%。; 李姗姗潘求真崔玉东连正兴; 关键词：DNA聚合酶基因 RNA干扰

鸡类囊胚获得及其生物学特性研究被引量：5: 2005年; 鸡胚是研究胚胎发育、组织分化、基因表达与调控良好的实验模型, 是动物功能基因组学研究的重要材料. 实验选取白来航蛋鸡所产新鲜种蛋, 采用纸环法收集胚盘, 机械打碎后进行悬浮培养, 获得了哺乳动物囊胚样结构, 命名为类囊胚. 体外培养12～24 h是类囊胚发育的高峰期, 其直径显著增加近1倍. FBS可促进类囊胚的发育, 而卵黄在12 h前对类囊胚发育没有明显影响, 但到24 h时可促进类囊胚的贴壁生长. 经碱性磷酸酶(AKP)染色初步显示类囊胚中含有大量碱性磷酸酶活性的胚胎干细胞, 胚胎干细胞特异性表面标志SSEA-1免疫荧光染色后呈阳性, 进一步肯定了类囊胚中ES细胞的存在, 最终从贴壁类囊胚中分化出神经样和成纤维样等多种类型细胞. 由此可以得出: 悬浮培养鸡胚盘细胞可以形成含有胚胎干细胞的、类似哺乳动物囊胚样的结构, 并能保持其内胚胎干细胞的特性和分化潜能.; 李佳潘求真李俊英韩红兵孙书锋杨君徐曙光田亮连正兴杨宁李宁; 关键词：基因表达与调控鸡类细胞特异性组织分化 ES细胞分化潜能

绵羊和山羊抑肌素基因的基因组结构和序列分析被引量：10: 2003年; 提取文登奶山羊和多赛特绵羊的基因组DNA,依据绵羊、奶牛、猪的抑肌素基因外显子区序列同源性设计并合成PCR引物进行扩增,将所获得的DNA片段克隆进行序列测定,绵羊和山羊内含子Ⅰ的序列同源性为98.2％,内含子Ⅱ的序列同源性为98％,内含子Ⅱ中的重复序列明显多于内含子Ⅰ。DNA序列的聚类分析结果与生物进化过程吻合,说明内含子Ⅱ的复杂程度高于内含子Ⅰ,且进化保守性很强,所测定的序列已在GenBank登录。; 潘求真陈慧勇连正兴李宁吴常信; 关键词：绵羊基因组结构内含子外显子生长转化因子 PCR方法

绵羊IL-6启动子的克隆及pIL6-TLR4载体构建被引量：2: 2017年; 为生产抗病转基因绵羊,并确保转基因羊的安全性。克隆绵羊IL-6启动子序列,以IL-6为启动子构建TLR4过表达载体,转染绵羊成纤维细胞验证功能。用1μg·L-1的LPS刺激转染后的绵羊成纤维细胞,利用q PCR技术和ELISA方法检测受LPS刺激后的成纤维细胞TLR4 m RNA表达量和TLR4蛋白表达量。结果表明,转染后的TLR4 m RNA表达量在2、4、24、48 h显著高于对照组(P<0.05),其中2、4、24 h极显著高于对照组(P<0.01),TLR4蛋白表达量始终高于对照组。说明p IL6-TLR4过表达载体构建成功。; 宗炎阚童童潘求真王静宜连正兴; 关键词：转基因绵羊

山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体的构建: 目的构建在哺乳动物细胞中表达的山羊TLR2绿色荧光蛋白融合表达载体。方法根据克隆到T载体上的山羊TLR2测序结果，设计一对不含终止子的引物，将山羊TLR2 PCR产物连接到pEGFP-NI载体上，用磷酸钙法转染293T细...; 潘求真冯国兴李姗姗张弘韬崔玉东连正兴; 关键词：山羊绿色荧光蛋白基因表达