游娟
- 作品数：23 被引量：25H指数：3
- 供职机构：广东药学院基础学院更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 羧基肽酶E(CPE)在人乳腺腺癌中的表达和功能(英文)被引量：3
- 2013年
- 目的观察乳腺腺癌中羧基肽酶E(carboxypeptidase E,CPE)介导的神经内分泌肽加工和表达。方法使用RT-PCR、免疫组化、ELISA和Western blot等方法,比较CPE和生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)基因和蛋白质水平在42例乳腺癌和21例癌旁正常组织中的表达。结果乳腺癌组织中的CPE基因表达水平为1 024±237,而癌旁正常组织中CPE基因表达水平为805±83(P<0.01)。与乳腺癌旁正常组织比较,癌组织中CPE蛋白质显示了较高的表达(P<0.01)。乳腺癌组织中的GHRH基因表达水平为1 522±457,而癌旁正常组织中为1 067±437,差异有统计学意义(P<0.01)。与乳腺癌旁正常组织比较,癌组织中GHRH蛋白表达被上调(P<0.01)。结论癌组织中CPE和GHRH高表达提示癌细胞中存在较强的由CPE酶介导的神经内分肽转录后加工能力。
- 刘换新周东游娟张娟辉唐松山唐柏山
- 关键词：人乳腺癌
- 尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶Agacutin的亚基的拆分和氨基酸残基测序被引量：5
- 2009年
- 目的测定Agacutin两个相近亚基的N端15个氨基酸残基序列,酶分子的2个亚基需拆分以获得亚基单肽链并测序。方法通过生物化学方法获得高纯化Agacutin,经SDS-PAGE电泳分离、亚基胶条回收及PVDF膜电转移技术等方法制备了可供鉴定和测序的单亚基样品,后者通过Edman降解法,测定了亚基N端15个氨基酸残基序列。结果大亚基(16kDa)的序列为:DCSSGWSSYEEHQYY,小亚基(15kDa)序列为DSSGWSSYEGHEYYV。结论测序结果经NCBI数据库检索发现,Agacutin为新的蛇毒类凝血酶。
- 唐松山唐治华李红枝游娟
- 关键词：尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶
- 昆虫病原斯氏线虫SY-5对重组Cip晶体蛋白的营养利用(英文)
- 2012年
- 【目的】初生型Photorhabdus luminescens细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为其共生的昆虫病原异小杆线虫提供营养。探索非共生的斯氏线虫对Cip蛋白的营养利用情况。【方法】在已构建重组Cip蛋白大肠杆菌表达体系的基础上,建立重组菌细胞与无菌斯氏SY-5线虫共培养系统,检测线虫的生长发育情况。【结果】Cip蛋白对目标线虫生长有显著支持作用:发育为成虫的比例达到65%-82%,雌虫的怀卵率为80%-95%,平均怀卵量为30-50粒,并显著降低各虫态的死亡率。【结论】Cip蛋白不仅为共生的异小杆线虫提供营养,亦能为斯氏线虫所利用。
- 游娟黄建林曹莉韩日畴
- 关键词：斯氏线虫营养利用
- 昆虫病原线虫和共生细菌培养系统中噬菌体的检测被引量：2
- 2003年
- 本文利用紫外照射、温度、pH、盐度诱导五株溶源性共生菌株Xenorhabdus和,同时测定斯氏和异小杆属线虫Steinernema carpocapsae A24,S.carpocapsae ALL,S.feltiae English,S.feltiae SN,Heterorhabditis bacterophora H06在体外培养过程中是否存在感染共生细菌的噬菌体。结果未发现噬菌斑,说明实验菌株在实验诱导条件下以及昆虫病原线虫固体培养系统中不可能诱发噬菌体的危害。
- 游娟韩日畴吴振强
- 关键词：昆虫病原线虫共生细菌噬菌体生物杀虫剂
- 地下和蛀干害虫病原线虫的系统研发和应用
- 韩日畴邱礼鸿陈书龙丘雪红颜珣马娟曹莉游娟许再福李秀花韩秀英陈镜华张中润赵瑞华张丽坤等
- 为控制作物病虫害，中国占全球7％的耕地中每年施用了约占全球25％的化学农药，特别是用于对付国际公认难防治的地下和钻蛀性害虫。滥用高毒农药对食品、环境和贸易造成了严峻挑战。昆虫病原线虫具有广泛寄主范围；能主动搜寻害虫；可规...
- 关键词：
- 关键词：病虫害防治
- 类凝血酶Agacutin的质量标准的研究
- 2009年
- 为研究止血活性的Agacutin的质量标准,通过鉴别试验、人血浆和牛纤原凝结活性、HPLC、SDS-PAGE、鲎试剂和其它体内试验等方法,研究了Agacutin的酶活性,纯度,分子量,内毒素,异常毒性,过敏试验和出血毒性等质量标准指标。结果显示,HPLC法纯度平均为98%,SDS-PAGE电泳显示了异二聚体和31733±1157 Da的全分子量。1单位酶的人血浆和牛纤原凝结时间为60±20 s和188±20 s.0.25 KU的异常毒性和过敏剂量、0.2 KU/0.2 ml出血毒测试、低于10 EU/KU内毒素的热源测试、磷脂酶A、L一氨基酸氧化酶和磷酸酶活性等显示了阴性反应。根据实验结果,初步确定了Agacutin的质量指标:正相HPLC纯度≥95%,SDS-PAGE为异二聚体和全分子量31±2 kDa,1单位酶的人血浆和牛纤原凝结时间为60±20 s和188±20 s,内毒素<10 EU/KU,异常毒性和致敏剂量为0.25单位,出血毒剂量0.2单位/0.2 ml.
- 唐松山赵尔耀王晓华李艳芳游娟王庆华
- 关键词：尖吻蝮蛇蛇毒止血剂
- 重组昆虫病原细菌Cip蛋白基因工程菌发酵条件的初步研究
- 2012年
- 昆虫病原细菌产生两种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为新型的生物农药——昆虫病原线虫提供必需的营养。在已构建原核表达载体pET-15b-cipA和pET-15b-cipB的基础上,研究了这两种重组载体在不同宿主菌中的表达情况,重组菌的生长特性,摇瓶培养时表达重组Cip蛋白工程菌的发酵条件。结果显示:以E.coli BL21(DE3)为宿主菌,在LB培养基中培养至OD600为0.8～1.0时,1 mmol/L IPTG诱导8 h,CipA和CipB的表达量可达30.9%和32.6%,重组质粒具有良好的分离稳定性和结构稳定性。
- 游娟黄建林曹莉韩日畴
- 关键词：基因工程菌发酵
- 分枝犁头霉WL511热稳定α-半乳糖苷酶基因克隆及序列分析被引量：1
- 2011年
- 构建并筛选耐热分枝犁头霉cDNA文库获得639 bp热稳定α-半乳糖苷酶基因片段,并以5′-RACE和3-′RACE技术获得上下游片段1817 bp和1092 bp,拼接得α-半乳糖苷酶全长序列2228 bp,其完整开放读码框为2142 bp,编码713个氨基酸,G+C含量43%;产物预测等电点5.2,预测相对分子质量81000。该基因(GenBank No.DQ234280)属α-半乳糖苷酶36家族,与其他来源的α-半乳糖苷酶基因同源性较低,与链霉菌Streptomyces avermitilis MA-4680的α-半乳糖苷酶同源性最高为38%。
- 李荷游娟顾取良刘玉焕
- 关键词：克隆
- 昆虫病原细菌Cip蛋白多克隆抗体的制备被引量：1
- 2013年
- 昆虫病原发光杆菌属(Photorhabdus)细菌产生2种胞内晶体蛋白CipA和CipB,为其共生线虫的生长发育提供营养。基于Cip蛋白已在大肠杆菌原核表达系统中得到稳定且高水平表达,以纯化的重组Cip蛋白为抗原,免疫新西兰大耳兔制备多克隆抗体,ELISA测定2种蛋白抗血清效价,均可达到1∶6 400。Western blot分析显示,制备的抗体均可特异识别发光杆菌的胞内晶体蛋白。Cip蛋白多克隆抗体的制备为建立该类蛋白的免疫学检测方法奠定了基础。
- 游娟黄建林曹莉韩日畴
- 关键词：多克隆抗体
- 新型人生长激素释放激素类似肽的生物学活性研究
- 2014年
- 目的通过生长激素释放激素肽(GHRH)改构寻找新的人生长激素释放激素类似肽(hGHRH Analog)。方法以固相合成技术合成6种新型N端和(或)C端改构的GHRH类似肽Pro-Pro-hGHRH(1-44)、ProhGHRH(1-44)、1Pro-GHRH(2-44)、Pro-Pro-hGHRH(1-44)-Gly-Gly-Cys、Pro-hGHRH(1-44)-GlyGly-Cys和1Pro-GHRH(2-44)-Gly-Gly-Cys。用C18反相高效液相色谱法和电喷雾质谱法检验其纯度和精确分子量。通过大鼠垂体刺激实验测定这些肽的鼠生长激素和其他垂体激素的释放值。结果通过N端ProPro-或Pro-延伸,1Pro-代换,和(或)C端Gly-Gly-Cys延伸获得的新型人GHRH类似肽活性有明显结构-功能关系:Pro-Pro-延伸
- 陈飞唐松山游娟张娟辉周东
