段继惠
- 作品数:16 被引量:31H指数:3
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- 发文基金:国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目天津市科委基金更多>>
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- 原发性胆汁性肝硬化患者协同刺激分子PD-1的检测及临床意义
- :探讨原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者协同刺激分子PD-1的表达及其与疾病发病机制的关系. 方法:分别采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方...
- 段继惠刘晔华穆红唐志琴史瑞
- 关键词:原发性胆汁性肝硬化程序性死亡受体-1
- 微小RNA-106b在喉癌组织中的表达及对Hep-2细胞株增殖的影响被引量:3
- 2014年
- 喉鳞状细胞癌(LSCC)是头颈部常见的恶性肿瘤之一,对喉癌进行早期诊断,并在基因水平寻求新的治疗手段成为当前急需解决的问题.Ivanovska等[1]研究结果显示,微小RNA(miRNA,miR)-106b属于miR-106b~ 25基因簇,能够促进细胞周期进展,而抑制miR-106b则可逆转该作用.本研究旨在探讨miR-106b在喉癌组织和Hep-2细胞中的作用及机制.
- 段继惠孙萍王巍唐志琴穆红
- 关键词:HEP-2细胞喉癌组织细胞株增殖喉鳞状细胞癌基因水平
- miR-130b对宫颈癌细胞修复TNF-α诱导性基因组双链DNA断裂作用的影响及机制被引量:4
- 2019年
- 目的观察miR-130b对宫颈癌细胞修复基因组双链DNA断裂作用的影响,并探讨其机制。方法将宫颈癌细胞Siha分成6组,分别转染细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物1A(CDKN1A)基因过表达质粒pc DNA3. 1-CDKN1A(CDKN1A组)、pc DNA3. 1空载质粒(pc DNA3. 1组)、miR-130b mimics (miR-130b组)、miR-130b阴性对照核酸(NC组),共转染pc DNA3. 1-CDKN1A和miR-130b mimics (CDKN1A+miR-130b组)、pc DNA3. 1和miR-130b mimics (pc DNA3. 1+miR-130b组)。TNF-α刺激细胞,用彗星试验测定基因组DNA尾距,流式细胞术测定磷酸化组蛋白2A变异体(γ-H2AX)蛋白; Real-time PCR、Western blotting法检测CDKN1A mRNA及其蛋白。分别将pc DNA3. 1/EGFP、pc DNA3. 1/EGFP-CDKN1A-wtUTR(野生型)、pc DNA3. 1/EGFP-CDKN1A-mutUTR(突变型)与miR-130b mimics或NC共转染Siha细胞,测定报告基因荧光相对活性;以TNF-α和DNA损伤增强剂AZD2461刺激各组细胞,用流式细胞术测定细胞凋亡水平。结果与pc DNA3. 1组比较,CDKN1A组细胞DNA尾距、γ-H2AX蛋白表达水平降低(P均<0. 05);与NC组比较,miR-130b组细胞DNA尾距、γ-H2AX蛋白表达水平、细胞凋亡率升高,CDKN1A mRNA、蛋白表达水平下降(P均<0. 05);与pc DNA3. 1+miR-130b组比较,CDKN1A+miR-130b组细胞DNA尾距、γ-H2AX蛋白表达水平、细胞凋亡率下降(P均<0. 05);与共转染NC细胞相比,共转染miR-130b mimics使野生型细胞荧光相对活性降低(P <0. 05),而未改变突变型细胞荧光相对活性。结论 miR-130b通过直接靶定CDKN1A mRNA抑制其表达干扰宫颈癌细胞修复双链DNA断裂位点,从而促进细胞凋亡。
- 杨磊刘涛段继惠穆红
- 关键词:宫颈癌DNA修复
- 铁过载在肝病中的研究进展被引量:2
- 2019年
- 铁过载是由于铁在体内过多地沉积而导致人体某些结构损伤或功能出现障碍的一种病理状态。越来越多的研究表明铁过载对消化系统、心血管系统、内分泌系统等各大系统以及肝脏、肾脏、心脏等实质性的器官均有影响。近年来研究发现,铁过载对消化系统疾病的影响是不容忽视的。铁是人体不可或缺的微量元素,而肝脏正是机体贮存铁的主要部位。循环中的铁与转铁蛋白结合而被运输,当超过转铁蛋白的结合能力时,过量的铁沉积于肝脏会引起肝内炎症以及纤维组织增生,到后期可能会发展为肝硬化甚至肝癌。由此可见,探索铁过载在肝病诊治中有着极其重要的意义。
- 段继惠
- 关键词:铁过载铁代谢铁调素肝病
- microRNA-21对人喉鳞癌Hep-2细胞株增殖的影响
- 2016年
- 目的观察microRNA-21(miR-21)对Hep-2细胞株增殖的影响,探讨其与相关细胞周期蛋白间的关系。方法设3组:转染Pre-miR-21组、control miR组和空白对照组。应用lipofectamineTM2000,分别将50nmol/L的Pre-miR-21、control miR和脂质体转染处于对数生长期的Hep-2细胞。通过荧光定量PCR检测3组Hep-2细胞中miR-21的表达水平;采用Western blot法检测3组细胞中Cyclin D1蛋白、Ki67蛋白的水平;MTT法分析miR-21对各组Hep-2细胞增殖情况的影响。结果 miR-21、Cyclin D1蛋白和Ki67蛋白在Pre-miR-21组的表达水平分别为60.49±9.93、0.932±0.026和1.043±0.031,明显高于control miR组和空白对照组;转染Pre-miR-21能明显促进Hep-2细胞的增殖。结论 miR-21的异常表达可能通过激活Cyclin D1蛋白和Ki67蛋白表达促进喉癌组织异常增生及细胞癌变。
- 段继惠唐志琴穆红高强王巍
- 关键词:CYCLIND1蛋白KI67蛋白
- 肾移植受者感染人类细小病毒B19后对T淋巴细胞的影响被引量:3
- 2014年
- 近年来,国外多个肾移植中心报道人类细小病毒B19(HPVB19)的感染是患者术后严重贫血的主要原因,同时有可能导致移植肾的慢性损伤^[1]。本研究旨在观察肾移植受者感染人类细小病毒B19后对T淋巴细胞的影响。一、材料与方法1.一般资料:收集2010年5月至2013年3月因终末期肾病进行同种异体肾移植受者133例,其中男89例,女44例,中位年龄40(18~65)岁。活体供肾53例,尸体供肾80例,随访12个月。
- 段继惠穆红唐志琴白媛媛邹循锋
- 关键词:人类细小病毒B19肾移植受者T淋巴细胞严重贫血慢性损伤
- Musashi-1在非小细胞肺癌组织的表达及其对人肺腺癌细胞A549生物学行为的影响被引量:1
- 2016年
- 目的检测Musashi-1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,观察RNA干扰(RNAi)靶向下调Musashi-1基因表达对人肺腺癌A549细胞生物学功能的影响。方法应用免疫组织化学法检测54例NSCLC组织及配对癌旁组织Musashi-1蛋白表达水平,利用脂质体Lipofectamine'rM2000RNAiMax将Musashi-1小干扰RNA(siRNA)转染至人肺腺癌细胞A549中,采用反转录.聚合酶链反应(RT—PCR)及Westernblot法分别检测Musashi-1mRNA,3-连环蛋白(3-catenin)mRNA及其蛋白的表达;噻唑蓝(MTF)法检测细胞的增殖;划痕实验及Transwell侵袭小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果54例NSCLC组织中,Musashi-1表达率为68.5%,而癌旁组织中的表达率仅为13.0%,差异有统计学意义(x2=34.51,P〈0.05);siRNA干扰实验组Musashi—lmRNA和β-cateninmRNA的表达量分别为9.51±2.04和11.38±3.02,明显低于阴性对照组的17.51±2.13和25.08±2.91和空白对照组的16.38±2.08和26.07±3.04(P〈0.05)。siRNA干扰实验组Musashi-1和β-catenin蛋白的灰度值分别为0.401±0.015和0.304±0.021,明显低于阴性对照组(0.742±0.011和0.825±0.023)和空白对照组(0.796±0.010和0.810±0.024,P〈0.05)。生长曲线显示Musashi-1siRNA转染组细胞的增殖能力较阴性对照组及空白对照组明显减慢(P〈0.05);同时,转染细胞的侵袭和迁移能力较对照组细胞明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论下调Musashi-1在人肺腺癌细胞A549的表达后,细胞的增殖能力减弱,迁移及侵袭能力降低。
- 段继惠穆红李彦敏唐志琴
- 关键词:MUSASHI-1肺腺癌小干扰RNA
- 原发性胆汁性肝硬化患者协同刺激分子PD-1的检测及临床意义
- 目的探讨原发性胆汁性肝硬化(primary bil iarycirrhosis,PBC)患者协同刺激分子PD-1的表达及其与疾病发病机制的关系。方法分别采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方法,检测...
- 段继惠刘晔华穆红唐志琴史瑞
- 流式细胞术在子宫内膜疾病DNA分析中的应用
- 田仲萍黄繁嫱周奕琳刘丽唐志琴朱晓东梁雁段继惠
- 应用流式细胞术进行DNA含量测定和细胞周期时相测定是近年发展起来的新技术,是临床肿瘤学研究的最新发展之一。该课题应用此项技术比较了不同病变程度的子宫内膜石蜡包埋组织和新鲜组织DNA异位体率、DNA指数,S期细胞比例之间的...
- 关键词:
- 关键词:流式细胞术子宫内膜增殖症子宫内膜癌
- 抑制EZH2表达对宫颈癌细胞凋亡的影响及机制被引量:3
- 2019年
- 目的观察抑制人类Zest同源增强子(EZH2)表达对宫颈癌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法选择人宫颈癌细胞系Siha和C33A细胞,采用MTT法确定EZH2抑制剂3-去氮腺嘌呤(DZNep)在两种细胞中的半数抑制浓度(IC_(50))。将两种细胞分为DMSO组、1/2 IC_(50)组和IC_(50)组,分别以DZNep终浓度0、3、6μmol/L处理Siha细胞各组,以0、2、4μmol/L处理C33A细胞各组。培养48 h后收集各组细胞,采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡情况,采用Western blotting法检测EZH2蛋白、抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-X基因长片段(Bcl-xL)、促凋亡蛋白Bcl-2家族细胞凋亡相互作用因子(Bim)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达。结果在Siha、C33A细胞中,1/2 IC_(50)组、IC_(50)组早期凋亡率均高于DMSO组,IC_(50)组早期凋亡率均高于1/2 IC_(50)组(P均<0. 05)。IC_(50)组EZH2蛋白表达均低于1/2 IC_(50)组、DMSO组(P均<0. 05); IC_(50)组Bcl-xL蛋白表达均低于1/2 IC_(50)组、DMSO组,Bim和Caspase-3蛋白表达均高于1/2 IC_(50)组、DMSO组(P均<0. 05)。结论利用DZNep抑制宫颈癌细胞EZH2的表达后,能够诱导宫颈癌细胞早期凋亡,其机制可能与下调Bcl-xL蛋白表达并上调Bim和Caspase-3蛋白表达有关。
- 段继惠杨磊穆红唐志琴
- 关键词:宫颈癌细胞凋亡