杨飞 作品数:16 被引量:34 H指数:4 供职机构: 石河子大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
YWHAG基因CDS的克隆及其在梅山与杜洛克猪卵泡发育中的差异表达研究 被引量:4 2014年 本研究旨在探讨YWHAG(Tyrosine 3-monooxygenase/tryptophan 5-monooxygenase activation protein,gamma polypeptide)基因在猪卵泡发育中的表达规律及其与卵泡发育的关系。从猪卵泡组织中克隆YWHAG基因CDS(Coding region)区全序列,采用半定量RT-PCR和Real-time PCR方法检测YWHAG基因在不同组织中的表达谱信息,并进一步分析了该基因在梅山、杜洛克猪L、M2、M1、S各级别卵泡中的表达变化。结果显示:克隆得到了猪YWHAG基因780bp编码区全序列,通过与人、小鼠、牛YWHAG基因CDS区BLAST比对,其同源性分别为97.72%、96.68%和98.57%。YWHAG基因在肌肉、肝、脂肪、肺、心、脾、肾、子宫、输卵管、小肠、胃、卵巢、垂体、下丘脑等组织中均有表达,尤其在脂肪、小肠和大脑中表达较高。YWHAG基因在不同直径卵泡中的表达量的趋势均为M1卵泡和L卵泡最高,M2卵泡次之,S卵泡最低,并且在M1卵泡和L卵泡中的表达量显著高于M2卵泡和S卵泡(P<0.05)。YWHAG基因在梅山猪各级别卵泡中的表达量均高于杜洛克猪(P<0.05),并且在梅山猪S和M2卵泡的表达量分别极显著高于杜洛克猪(P<0.01),而在M1卵泡及L卵泡中的表达量无显著差异;结果提示,YWHAG基因可能参与猪卵泡发育中的凋亡过程,从而引起梅山与杜洛克猪在排卵数方面存在差异。 刘丽娟 鲁慧文 杨飞 徐梦思 黄涛 李大全关键词:卵泡 梅山猪 杜洛克猪 梅山与杜洛克猪中等卵泡之间差异表达基因的分离研究 黄涛 赵志超 杨飞 刘丽娟 孙敬礼 王宵燕 宋成 李大全关键词:差异表达基因 杜洛克 梅山猪与杜洛克猪中等卵泡差异表达基因的鉴定 被引量:12 2017年 本试验采用抑制性消减杂交技术构建了卵泡期第4天梅山猪和杜洛克猪中等卵泡M2组织差异表达的消减cDNA文库,从中筛选差异表达的基因,并通过实时荧光定量PCR对其进行验证,利用DAVID软件对差异表达的基因进行聚类分析。结果表明,从梅山猪和杜洛克猪M2卵泡消减文库中筛选得到了148和75个差异表达的ESTs,分别含有125和60个已知的基因。实时荧光定量PCR验证结果与筛选结果相符。GO功能分类注释到调控代谢、细胞循环、生物合成、胞内转运、类固醇雌激素受体和刺激等生物学过程。KEGG Pathway分析表明有6个基因参与TGF-beta信号通路,5个基因参与卵母细胞减数分裂信号通路,7个基因参与类固醇雌激素受体信号通路,推测TGF-beta信号通路中的基因可能调控猪卵泡的发育。研究结果为深入探讨卵泡发育机理和对繁殖性状影响的遗传机理奠定了基础。 赵志超 黄涛 杨飞 刘丽娟 孙敬礼 王宵燕 宋成义 李大全关键词:差异表达基因 卵泡 梅山猪 杜洛克猪 杜洛克与梅山猪大卵泡消减文库的构建 被引量:1 2014年 为了鉴定杜洛克猪相对于梅山猪在大卵泡中高表达的基因,本研究应用抑制性消减杂交技术成功构建了以梅山大卵泡c DNA为driver,杜洛克大卵泡c DNA为tester的消减c DNA文库。结果显示:以G3PDH和β-actin为指标检测文库的消减效率为25,从该文库中获取了350个有效的阳性克隆,PCR检测插入片段主要分布在150-750 bp。克隆测序得到74个有效的EST序列,GO分析表明主要与细胞信号、细胞结构、代谢、细胞分化、基因/蛋白质合成、细胞组织防护等功能相关。利用q PCR技术验证了ELTD1、Grb14、SNRPE、CSDE1、ALDH18A1、e IF4E、BMPR-IB等基因在梅山和杜洛克大卵泡中的表达模式。结果发现在两猪种的大卵泡间存在显著性差异。本研究有助于揭示影响猪卵泡发育和生殖数量控制的分子基础。 杨飞 黄涛 赵志超 刘丽娟 李大全 王宵燕 宋成义关键词:杜洛克 抑制性消减杂交 CDNA文库 梅山与杜洛克母猪发情前期卵巢组织差异表达基因的分离与鉴定 2012年 为了探讨梅山与杜洛克母猪卵巢差异表达基因对猪排卵与繁殖性状的影响,应用mRNA差异显示技术研究梅山猪与杜洛克猪卵巢中基因表达的差异性,分离9条在纯种梅山猪与纯种杜洛克猪卵巢中差异表达的表达序列标签(ESTs),并用半定量RT-PCR鉴定。通过BLAST比对发现,其中有3条EST与GenBank序列同源性较高。组织表达谱分析揭示了这些ESTs在梅山猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肌肉、脂肪、小肠、大脑、卵巢、子宫、脾脏、输卵管等各个组织中的表达有不同程度的差异。研究结果表明,梅山猪和杜洛克猪卵巢之间的不同基因差异表达的方向存在差异,这些差异表达的基因可能在某种程度上导致猪繁殖力的差异,进而为研究影响猪排卵数的分子机理调控网络打下基础。 赵志超 孙敬礼 黄涛 李大全 王宵燕 宋成义 刘丽娟 杨飞关键词:梅山猪 杜洛克猪 卵巢 组织表达谱 杜洛克与梅山猪卵泡中Grb14、eIF4E和SNRPE基因的差异表达研究 被引量:3 2012年 为了探讨梅山与杜洛克母猪卵泡中差异表达基因对猪排卵与繁殖性状的影响,对在前期试验中通过消减杂交技术得到的EST杜大5、杜大46、杜大35进行了分析。序列分析结果表明,EST杜大5、杜大46、杜大35分别代表了Grb14、SNRPE、eIF4E基因。组织表达谱分析结果表明,这些EST在各个组织中均有不同程度的表达,其中Grb14基因只在肝脏、肾脏和卵巢、输卵管、黄体、垂体等繁殖相关器官高表达。荧光定量分析结果表明,这些基因在杜洛克猪大卵泡中的表达量均高于在梅山猪大卵泡中的表达量,其中SNRPE、eIF4E基因达到显著水平,在两猪种其他各级别卵泡中也有不同程度的表达差异,其中Grb14在杜M2中的表达量达到梅M2的2.13倍,差异显著,eIF4E基因在杜M1的表达量是梅M1的0.46倍,差异极显著。在猪种内大卵泡L、中等卵泡M2、中等卵泡M1、小卵泡S的相对表达量也有不同程度的差异。这些差异表达的基因可能影响卵泡发育和成熟,为深入了解这些基因在卵泡发育中的作用奠定了基础。 赵志超 孙敬礼 黄涛 李大全 王宵燕 宋成义 刘丽娟 杨飞关键词:梅山猪 杜洛克猪 卵泡 组织表达谱 OPN基因多态性对猪产仔数的影响 杨飞 李志远 孙敬礼 李不学 杜军 郭启航关键词:长白猪 总产仔数 产活仔数 NCOA-1基因型对长白猪繁殖性能的影响 被引量:4 2014年 利用PCR-RFLP技术,检测101头长白猪NCOA-1基因多态性,并分析其与繁殖性状的关系。结果表明,NCOA-1基因AA、AB、BB基因型频率分别为0.500、0.335、0.165;NCOA-1基因中BB型在窝产仔数和窝产仔活数、初生窝重和断奶窝重与AA型、AB型有显著性差异(P<0.05)。 鲁慧文 赵志超 徐梦思 刘丽娟 杨飞 黄涛关键词:长白猪 繁殖 猪SKP1基因的克隆及其在梅山猪与杜洛克猪卵泡中的表达研究 被引量:3 2015年 为探索SKP1(S-phase kinase association protein 1)基因在猪卵泡中的表达规律,本试验从猪卵泡组织中克隆了猪SKP1基因CDS区全长序列,采用Real-time PCR方法检测SKP1基因在不同组织中的表达谱,进一步分析了该基因在梅山猪和杜洛克猪S卵泡、M1卵泡、M2卵泡、L卵泡中的表达。结果表明,经克隆测序,得到了猪SKP1基因492bp编码区全长序列,与羊、人、黑猩猩、牛、大鼠的同源性分别为93.10%、92.90%、92.29%、91.89%、89.86%。SKP1基因在各组织中均有不同程度的表达(肌肉、脂肪、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、十二指肠、卵巢、输卵管、子宫、子宫角、垂体、黄体、大脑、下丘脑),其中在子宫、脾脏、输卵管中表达量较高。SKP1基因的表达量在梅山猪S卵泡、M1卵泡和M2卵泡中的表达量均高于杜洛克猪,特别是在梅山猪M1卵泡和M2卵泡中SKP1基因的表达量极显著高于杜洛克猪(P<0.01),分别达到了2.39、2.82倍,而在L卵泡中的表达量却是杜洛克猪高于梅山猪,结果提示SKP1基因可能参与猪卵泡发育过程。 徐梦思 黄涛 刘丽娟 杨飞 鲁慧文 翟腾蛟 陈亚楠关键词:卵泡 表达量 TGFβ-SMAD信号通路基因在梅山猪与杜洛克猪不同级别卵泡中的表达分析 被引量:7 2016年 为探索TGFβ-SMAD信号通路基因在卵泡中的表达规律,采用Real-time PCR方法检测TGFβ-SMAD信号通路基因THBS1、DCN、LTBP1、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、SMAD2、SMAD3、SMAD4基因在梅山、杜洛克S、M1、M2、L卵泡中的表达量变化。结果表明:TGFβ配体1、2、3型及正向调控因子THBS1、LTBP1、负向调控因子DCN、受体TGFβRⅠ、TGFβRⅡ以及受体调控SMAD2、SMAD3和辅SMAD4都在梅山与杜洛克的中等卵泡中存在表达差异,TGFβ1基因、TGFβRⅠ基因在梅山猪各级卵泡中的表达量均极显著高于杜洛克(P<0.01)。研究提示,TGFβ-SMAD基因可能参与卵泡发育过程。 徐梦思 黄涛 刘丽娟 杨飞 翟腾蛟 马力鹏关键词:卵泡