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甜高粱蔗糖合酶表达与蔗糖积累的相关分析被引量：12: 2009年; 以甜高粱为原料生产酒精是一种有潜力的生物能源途径,了解甜高粱蔗糖积累机理对生物能源开发具有重要意义。以两个甜高粱品种为材料,利用Western blotting技术检测高粱叶片和茎秆中蔗糖合酶(sucrose synthase,SS)的表达,分析其与蔗糖积累的相关性。结果表明,甜高粱叶片和茎秆中的SS蛋白质表达量在发育早期(拔节期、抽穗期)较低,发育后期(开花期、灌浆期和腊熟期)明显升高,在开花期最高。同2个普通高粱品种相比,在发育后期2个甜高粱品种叶片和茎秆中SS的表达明显增加,且与茎秆中的蔗糖积累相关,推测这是甜高粱与普通高粱蔗糖含量差异的重要原因。试验结果为选育甜高粱品种和提高茎秆蔗糖含量提供了一条可能的策略。; 杨明刘丽娟李莉云王博常金华刘国振; 关键词：甜高粱蔗糖合成酶

一株枯草芽孢杆菌及其培养方法和应用: 本发明提供了一株枯草芽孢杆菌及其制备方法和应用，属于微生物技术领域。本发明提供的一株枯草芽孢杆菌G‑2(Bacillussubtilis)，保藏编号为CGMCCNo.21707。本发明提供的枯草芽孢杆菌G‑2具有良好的降...; 郭晓军郭威杨明孙悦龙田祖光刘浩朱宝成

秸秆木质纤维素降解菌株的筛选及其在青贮中的应用: 李红亚王全朱宝成李术娜王树香郭晓军张伟涛刘泽郭伟婷杨明蔡正; 该项目以产芽孢细菌作为纤维素降解功能菌，同时与产芽孢的木质素降解菌配伍组合成复合菌剂。一方面，该菌剂能有效破坏木质素对纤维素的屏蔽作用，从而保证青贮过程中菌剂对秸秆纤维素成分的降解，有效改善秸秆的木质纤维素化程度。另一方...; 关键词：; 关键词：木质纤维素发酵工艺复合菌剂

调控OsPR1a基因表达增强水稻抗白叶枯病的研究: 窦世娟刘国振李莉云杨明兰金苹魏健郭亚璐刘玉晴燕高伟; 成果以作物与病原菌互作为基础，研究水稻防御信号转导过程中，不直接识别病原物的下游病程相关基因OsPR1a的功能，以其找到非专化广谱抗病相关基因。该项目通过构建OsPR1a超表达和基因沉默转化载体，获得水稻转基因植株，积累...; 关键词：; 关键词：水稻基因表达

甜高粱蔗糖积累与茎秆中SPS表达的相关性研究被引量：14: 2009年; 【目的】以甜高粱为原料生产酒精作为替代能源近年来引起人们的广泛关注,本文试图通过检测蔗糖合成的关键酶-蔗糖磷酸合成酶(SPS)在高粱叶片(源)与茎秆(库)中的表达量,了解高粱体内SPS表达与蔗糖积累的关系,进而探讨蔗糖的代谢机理。【方法】以甜高粱和普通高粱为材料,利用Western blot技术对SPS的蛋白质表达进行检测。【结果】在高粱的生长发育过程中,茎秆中蔗糖含量、叶片和茎秆中SPS蛋白质表达量持续上升,灌浆期达到最高,腊熟期略有下降,它们之间的变化趋势基本一致,甜高粱茎秆蔗糖含量与叶片SPS蛋白质的表达相关系数为0.895,与茎秆SPS蛋白质的表达相关系数为0.781;甜高粱和普通高粱相比,其叶片中SPS表达量差别不明显,而甜高粱茎秆中SPS表达量明显高于普通高粱。【结论】蔗糖为高粱糖分的主要形式,蔗糖积累与叶片和茎秆中SPS的表达相关。在甜高粱中,蔗糖积累主要与茎秆中SPS的表达相关。; 杨明刘丽娟李莉云王博常金华刘国振; 关键词：甜高粱蔗糖磷酸合成酶 WESTERN BLOT

过表达OsMPK17激酶蛋白质增强了水稻的耐旱性被引量：4: 2020年; 促分裂原活化蛋白质激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)在真核生物中高度保守,在水稻逆境应答反应中也发挥着重要作用。本研究表达纯化了水稻OsMPK17蛋白质,制备了特异性抗体,对多种非生物逆境胁迫下的蛋白质样品进行免疫印迹分析,发现OsMPK17蛋白质在干旱胁迫下诱导表达,提示该蛋白质在干旱胁迫应答中发挥作用。对脱落酸和茉莉酸甲酯处理的离体叶片蛋白质分析发现,OsMPK17蛋白质表达丰度下降,提示该蛋白质的功能发挥可能受激素调控。为此,构建了过表达OsMPK17蛋白质的载体,转化水稻后筛选获得了OsMPK17蛋白质过表达的纯合株系。田间种植鉴定结果表明,转基因株系的株高变矮、穗长变短、结实率降低。种子萌发期拟旱(PEG-6000)处理条件下,过表达OsMPK17株系的种子长势明显比野生型好,根长与芽长均显著大于野生型。幼苗期失水试验表明,转基因植株的失水率低于野生型。在土培干旱胁迫后恢复浇水的试验中,过表达OsMPK17蛋白质的转基因水稻生长也好于野生型。综上,过表达OsMPK17蛋白质提高了水稻的耐旱性。本研究增进了对水稻OsMPK17基因功能的了解。; 马金姣兰金苹张彤陈悦郭亚璐郭亚璐燕高伟魏健窦世娟魏健窦世娟杨明; 关键词：水稻免疫印迹逆境胁迫过表达

水稻转录因子OsWRKY68蛋白质的表达特征及其功能特性被引量：7: 2019年; [目的]水稻中有近百个WRKY转录因子家族成员,其中很多与生长发育、生物与非生物逆境胁迫应答有关。河北农业大学生命科学学院分子生物学与生物信息学实验室(molecular biology & bioinformatics lab,MBB)前期发现OsWRKY68在水稻接种白叶枯病菌后诱导表达,本研究试图进一步探究 OsWRKY68的功能。[方法]采集水稻TP309不同生长发育时期的组织样品,包括萌发期、幼苗期、分蘖期、孕穗期和开花期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕、穗子、花药、颖壳和种子,以及非生物胁迫(4℃、44℃、48℃、淹、NaCl、PEG、恒光和恒暗)和激素处理(脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸和乙烯利)的叶片,提取总蛋白质,用水稻 OsWRKY68 蛋白质特异抗体,通过免疫印迹(western blot,WB)技术系统调查OsWRKY68蛋白质在水稻正常发育过程中不同时期、不同组织、非生物胁迫及激素处理条件下的表达特征。构建 RNAi 载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻 TP309,对转基因植株进行PCR和WB鉴定,观察OsWRKY68 RNAi 转基因植株的表型并测量其株高、分蘖数、穗长、小穗数和结实率等性状。[结果]调查OsWRKY68蛋白质的表达丰度,发现OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中基本呈组成型表达,且在大部分组织中表达丰度差异倍数不大,但在开花期的花药中OsWRKY68表达量高于成熟穗、穗轴和颖壳;在分蘖期和孕穗期的叶鞘中不表达,仅在开花期的叶鞘中表达;在孕穗期的幼穗中,随着幼穗长度的增加其表达丰度逐渐降低。调查水稻非生物胁迫和激素处理后OsWRKY68蛋白质的表达特征,发现盐胁迫后OsWRKY68蛋白质的表达丰度随时间延长持续下降,恒光处理后OsWRKY68蛋白质表达量持续上升,3 d 时明显出现一条分子质量较大的条带(记作 OsWRKY68+),且表达量逐渐增加,茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)和乙烯利(ethephon,ET)处理后同样也呈现 OsWRKY68+蛋白质丰度; 陈悦王田幸子杨烁张彤马金姣燕高伟刘玉晴周艳史佳楠兰金苹魏健窦世娟刘丽娟杨明李莉云刘国振; 关键词：水稻 WRKY转录因子免疫印迹 RNA干扰

干酪乳杆菌抗LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤作用及机制被引量：5: 2022年; 为探究干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)对LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)炎性损伤的缓解作用及机制,将10^(4),10^(5),10^(6)CFU/mL的干酪乳杆菌与奶牛乳腺上皮细胞共培养3h后加入1 mg/L的LPS继续培养8 h.使用荧光定量PCR和Western blot方法检测相关炎性因子mRNA和通路关键蛋白的表达量。结果显示,与对照组相比,10^(5),10^(6)CFU/mL的干酪乳杆菌预处理组显著降低了奶牛乳腺上皮细胞IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达(P<0.05),同时,10^(4),10^(5),10^(6)CFU/mL的干酪乳杆菌预处理显著降低了IкBα和p65蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。结果表明,干酪乳杆菌可以通过抑制奶牛乳腺上皮细胞NF-κB信号通路及相关炎性因子基因的表达,从而发挥抗炎作用。; 李可杨明田梦悦贾丽梁艳艳马玉忠; 关键词：干酪乳杆菌 LPS 奶牛乳腺上皮细胞抗炎作用

丹皮酚抗LPS诱导的乳腺组织及上皮细胞炎性损伤的作用研究: 奶牛乳房炎是养殖过程中常见且高发的疾病,常导致奶牛产奶量下降,饲养成本增加及奶牛淘汰率上升,严重影响奶牛业的发展。病原微生物感染是引起奶牛乳房炎的主要原因,兽医临床上主要通过抗生素来治疗奶牛乳房炎。随着抗生素的大量应用,...; 杨明; 关键词：丹皮酚乳腺上皮细胞炎症模型

一种户外开放式微藻培养体系优化被引量：2: 2021年; 【目的】建立可用于大规模培养的户外开放式微藻培养体系。【方法】设计一种微藻平面开放浅层培养(Flat,open and shallow,FOS,简称浮法)体系,以小球藻(Chlorella sorokiniana)为模式藻种,探讨温度、光照、pH值和培养基营养成分等因素在该培养体系中对小球藻生长的影响,开展900 L体系的户外培养试验。【结果】浮法体系主要由塑料袋和垫板组成,在该培养体系中的小球藻在20~40℃范围内均可生长,最适生长温度为30~35℃。小球藻生长有明显的照度依赖性,无光时几不生长,随着照度升高,生长速度加快,在较高的照度下表现有光饱和现象。以TAP为基础培养基,在碳源或氮源缺乏时小球藻几不生长。pH 7.5左右有利于小球藻生长。900 L体系的户外培养试验的生物量(干物质得率)为0.15 g/(L·d)。【结论】在此新型户外平面开放浅层微藻培养体系中,温度、照度、pH值及营养成分等对小球藻的生长均有不同程度的影响。该体系有成本低、操作简便、容易控制、自然资源利用率高等特点,有大面积推广潜力。; 周艳汪旭王蕴博徐海青王仕举窦世娟杨明李莉云刘国振; 关键词：微藻小球藻培养基生物量

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杨明

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