杨凤堂 作品数:19 被引量:53 H指数:4 供职机构: 中国科学院昆明动物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技基础条件平台建设计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
利用流式细胞分离法和DOP-PCR技术制备人与其他六种哺乳动物的染色体特异探针 流式细胞分离法是目前从中期细胞中大量获取染色体特异DNA常用的方法。利用流式细胞分离仪可根据各条染色体的AT/GC碱基对比例的不同和DNA含量的差异,把Hoechst33258和Chromomycin A3荧光染料处理过... 王金焕 佴文惠 苏伟婷 杨凤堂关键词:DOP-PCR 文献传递 利用染色体涂染方法建立人和白眉长臂猿(Hylobates hoolock)的比较染色体图谱 被引量:5 1997年 除人Y染色体外,本文采用生物素标记的人全部整条染色体特异探针与白眉长臂猿(Hylobates hoolock)有丝分裂中期分裂相进行染色体原位杂交即染色体涂染法以研究人和白眉长臂猿染色体之间的同源性。在白眉长臂猿18对常染色体上检测出了与人22对常染色体同源的59对染色体片段,确定了人和白眉长臂猿之间的精度较高的染色体连锁群。结果表明:自人与白眉长臂猿的祖先分歧以来,大量的染色体间重排(至少发生了39次易位)和染色体内的重排导致了二者核型的差异。根据杂交结果绘制了首份人和白眉长臂猿比较染色体图谱,并结合已有的人和白掌长臂猿(Hylobates lar)(2n=44)和合趾长臂猿(Hylobates syndactylus)(2n=50)的比较染色体图谱对长臂猿属的染色体进化作了初步的探讨。 余定会 杨凤堂 刘瑞清关键词:染色体图谱 白眉长臂猿 胎儿羊水细胞产前诊断及染色体荧光原位杂交 被引量:2 1995年 胎儿羊水细胞产前诊断及染色体荧光原位杂交朱宝生,杨凤堂,易淑君,余定会,章晓梅,杨秀珍,张云霞羊水细胞培养具有取材安全、嵌合体假阳性率低、结果可靠等优点,现仍然是国际上产前诊断胎儿染色体的主要方法[1]。但传统的染色体G显带技术不能识别某些复杂易位,... 朱宝生 杨凤堂 易淑君 余定会 章晓梅 杨秀珍 张云霞关键词:胎儿 羊水细胞培养 胎前诊断 荧光原位杂交 黑麂Y染色体的鉴别和Sry基因的克隆及定位 被引量:19 2001年 以流式细胞仪分离小麂(Muntiacus reevesi)Y染色体和黑麂(Muntiacus crinifrons)Y1,Y2,X+4和1号染色体,利用DOP-PCR技术富集了分离的各单条染色体。然后,将小麂的Y染色体的DOP-PCR产物经Cy3标记后直接作为涂染探针, 应用染色体涂染技术与雌雄黑麂的核型标本进行杂交,确认了黑麂真正的Y染色体为Y2染色体。再以黑麂的Y1,Y2,X+4和1号染色体的DOP-PCR产物为模板,用人的特异性的 SRY(sex determining region of the Y chromosome ) 基因引物对其进行扩增,结果表明黑麂只有Y2染色体出现了SRY扩增片段。然后扩增产物克隆和测序,比较它与人的同源性,初步把黑麂的Sry基因定位在Y2染色体上。最后提取雄性黑麂的基因组DNA,并用同一对引物对其进行扩增,亦得到Sry基因的片段,对此扩增片段进行克隆,测序,结果表明其与Y2染色体得到的Sry基因片段完全一样,与人SRY基因的同源性均为83%。 王毅 单祥年 张悦 刘宁生 鲁晓萱 佴文惠 王金焕 陈玉泽 杨凤堂 胡均 张文兴 徐春茂关键词:黑麂 染色体涂染 DOP-PCR SRY基因 偶蹄目 比较染色体涂色显示小熊猫(Ailurus fulgens)具有高度保守的核型 被引量:2 2002年 以狗的整条染色体特异探针 ,通过比较染色体涂色 (ComparativeChromosomePainting) ,建立了小熊猫和狗的比较染色体图谱。狗的 38条常染色体探针在小熊猫染色体上共检出 71个同源片段。其中狗的 18条常染色体每一条在小熊猫染色体上各有 1个同源片段 ,其余的 2 0条常染色体每一条在小熊猫染色体上各有 2至 5个同源片段。广泛的染色体结构重排造成了小熊猫与狗的核型差异 :至少需要经过 2 8次断裂 ,4 9次融合 ,4次倒位才能将狗的核型 (2n =78)“转变”为小熊猫的核型 (2n =36 )。结合已发表的狗与家猫的比较染色体图谱 ,我们推测 :小熊猫与家猫之间共存在 2 6个同源片段 ,二者的核型之间显示了较高的同源性。通过比较分析狗的染色体同源片段在小熊猫与家猫染色体上的分布和排列 ,可以看出 :4次染色体易位 ,2次倒位造成了小熊猫与家猫的核型差异。我们的工作进一步证实了利用基因组高度重排的物种 (如 :狗 )的染色体特异探针与核型保守的物种 (如 :家猫、水貂、小熊猫 )进行比较染色体涂色研究 ,不但可以准确快速地鉴别物种进化过程中所发生的染色体间的结构重排 ,而且还可揭示染色体内的结构重组。 田颖 佴文惠 王金焕 杨云飞 杨凤堂关键词:小熊猫 家猫 核型进化 赤麂Sry基因的定位及Y染色体的鉴别 被引量:1 2001年 应用流式细胞仪分离赤麂的1,Y_1,Y_2染色体,通过简并寡核苷酸引物聚合酶链式反应(DOP-PCR)增加模板数量.用人的性别决定基因HMG框内设计1对引物进行PCR扩增.在雄性赤麂Y_2染色体DOP-PCR产物中扩增出与人SRY基因同源的Sry基因片段,经克隆测序后,初步证明赤麂Y_2染色体是真正的Y染色体,同时对赤麂Sry基因进行了初步定位. 张悦 单祥年 刘宁生 鲁晓萱 聂文惠 杨凤堂 王金焕 陈玉泽关键词:赤麂 SRY基因 DOP-PCR 性染色体 性别鉴定 利用狗染色体特异探针探讨四种食肉目动物核型进化中所发生的染色体间和染色体内结构重排 已往研究表明大多数食肉目动物的核型是高度保守的,在核型进化过程中仅有少数染色体发生了重排;而犬科和熊科的染色体重组程度较高。在食肉目动物中,家狗具有最多的二倍体染色体数目和最高度重排的核型,并且有较为完善的基因组图谱,故... 佴文惠 王金焕 杨凤堂关键词:食肉目动物 核型进化 染色体重排 文献传递 利用高分辨BAC定位探讨麂类动物核型进化及染色体串联融合的机制 麂属动物的核型在较短的分化时间内(仅数百万年)发生了巨大变化,不同的种染色体数目差异极大,是研究哺乳动物核型进化及其在物种分化中的作用的好材料。早在1975年美籍华裔细胞遗传学家徐道党先生就推测:赤麂的2n=6核型可能由... 黄玲 迟建祥 杨凤堂关键词:黑麂 BAC文库 荧光原位杂交 文献传递 食蟹猴和熊猴杂种F_1的细胞遗传学研究 被引量:1 1994年 本工作采用染色体显带、睾丸组织学切片以及低渗铺张──硝酸银染色等方法较为详细地研究了食蟹猴和(M.fascicularis)和熊猴(M.assamensis)种间杂种F_1体细胞染色体的G带、C带,Ag-NOR、精母细胞联会复合体的结构、形态和行为以及精子发生。结果表明:(1)杂种亲本的染色体组具有高度的同源性;(2)杂种的精子发生过程完全正常;(3)食蟹猴和熊猴的种间生殖屏障可能主要是生态隔离。此外,本文还对食蟹猴和熊猴分类地位以及杂种细胞中Ag-NOR的异态性等问题进行了分析和讨论。 杨凤堂 施立明关键词:食蟹猴 熊猴 种间杂种 细胞遗传学 BAC克隆的比较定位显示赤麂核型进化过程中发生的所有串联融合均属着丝粒-端粒融合 麂属动物由于其进化时间短、核型差异大而长期成为染色体进化研究的模型动物。徐道觉和施立明先生提出:染色体串联融合为赤麂核型进化的主要机制,即著名的串联融合假说。尽管该假说已得到比较染色体显带、比较染色体涂色、卫星DNA序列... 迟建祥 宿兵 杨凤堂关键词:小麂 赤麂 基因文库 文献传递