杨冬华
- 作品数:262 被引量:894H指数:14
- 供职机构:暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 特异性抗肝癌单链抗体二聚体在毕赤酵母中的表达、纯化及生物学活性鉴定被引量:2
- 2009年
- 目的:实现特异性抗肝癌单链抗体二聚体在毕赤酵母中高效表达、纯化并鉴定其生物学活性.方法:构建酵母表达载体pGAPZαA-BDM,转化感受态大肠杆菌DH5α,选择测序正确的阳性克隆进行扩增后,电转化酵母细胞,表达抗体二聚体,对表达抗体进行纯化、浓度检测,并鉴定其对肝癌细胞的结合活性,免疫组织化学检测二聚体对肝癌组织抗原的特异性.结果:测序显示成功构建酵母表达载体pGAPZαA-BDM,表达96h抗体收获量最大,二聚体表达量为30mg/L菌液,为大肠杆菌的300倍.抗肝癌单链抗体二聚体BDM与三种肝癌细胞结合,而与正常肝细胞不结合,结合效价为1:128.免疫组织化学显示二聚体与肝癌组织结合的阳性率比肝硬化、胃癌、正常肝组织高,差异有统计学意义.结论:成功制备了高表达量、高特异性、较好的活性及稳定性的抗肝癌单链抗体二聚体BDM,为制备免疫纳米颗粒及开展肝癌的放射免疫诊断和靶向治疗奠定了基础.
- 别彩群杨冬华汤绍辉丁世华
- 关键词:毕赤酵母结合活性特异性
- 人胰岛素样生长因子ⅡP3启动子调控融合基因质粒构建的研究被引量:2
- 2006年
- 目的构建人胰岛素样生长因子Ⅱ基因(IGF-Ⅱ)P3启动子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因穿梭质粒,观察其在肝癌细胞株HepG2及宫颈癌细胞株HeLa细胞中的表达及其作用。方法应用基因重组技术,构建IGF-ⅡP3启动子驱动EGFP与HSV-tk融合表达穿梭质粒载体,脂质体转染技术将其转入HepG2及HeLa中,48h后荧光显微镜下观察荧光表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSV-tk和EGFP的mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝实验检测转染融合蛋白载体后给予不同浓度的更昔洛韦对HepG2及HeLa细胞毒作用。结果酶切鉴定和测序分析证实重组质粒构建成功;转染此穿梭质粒的细胞中仅有HepG2细胞检测到绿色荧光;RT-PCR检测到HSV-tk和EGFP的mRNA仅在HepG2细胞中表达;更昔洛韦(GCV)对转染了携此质粒载体的HepG2细胞有选择性细胞毒作用,1、10、和100μg/ml3个浓度GCV作用72h后(实验均重复3次),对转染细胞的抑制率分别为19.8%±1.3%、36.2%±2.0%和48.7%±1.9%,与细胞病毒转染HepG2组(24.1%±1.9%、45.1%±1.7%、69.4%±3.6%)和此质粒转染HeLa细胞组(25.1%±1.6%、49.3%±1.1%、72.2%±2.9%)相比,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论成功构建IGF-ⅡP3启动子驱动携带HSV-HSV-tk与EGFP融合基因穿梭质粒载体,转染后对人肝癌细胞系HepG2有选择性杀伤作用,为进一步靶向性肝癌腺病毒基因治疗奠定基础。
- 周鸿科杨冬华汤绍辉黄卫卢筱华
- 关键词:质粒胸苷激酶
- 多司马酯片治疗消化性溃疡的多中心临床研究被引量:4
- 2006年
- 目的研究多司马酯片对消化性溃疡的临床疗效及安全性。方法采用多中心随机双盲双模拟平行阳性药对照研究,235例消化性溃疡(116例胃溃疡和119例十二指肠溃疡)患者随机分配进入试验组和对照组。试验组服用多司马酯1500 mg,每天2次,硫糖铝空白片2片,每天4次;对照组服用多司马酯空白片3片,每天2次,硫糖铝片1000 mg,每天4次,疗程4周。结果共有213例可供疗效分析,232例可供评价不良反应。胃溃疡试验组4周有效率和愈合率分别为92.5%和62.3%,与对照组(分别为82.0%和50.0%)相比差异无统计学意义(P>0.05),十二指肠溃疡试验组4周有效率和愈合率分别为88.9%和80.4%,与对照组(分别为61.1%和50.0%)相比差异无统计学意义(P> 0.05)。试验组不良反应发生率为2.61%,与对照组的2.56%相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论多司马酯片是安全有效的消化性溃疡治疗药物。
- 多司马酯研究协作组杨冬华
- 关键词:消化性溃疡药物治疗
- 经皮微波消融治疗38例脾功能亢进的临床研究被引量:4
- 2014年
- 目的 探讨经皮微波消融脾脏治疗脾功能亢进的临床效果和安全性.方法 选取2007年3月至2011年5月慢性乙型肝炎肝硬化继发中重度脾功能亢进患者38例.行经皮分次微波消融治疗前,先经三维CT平扫计算脾脏体积,并行多普勒超声、血常规、尿常规、肝功能、肾功能、血清淀粉酶水平、血清脂肪酶水平检查.第1次操作的消融体积约为初始脾脏的1/3,1周后若无明显并发症,则再次消融1/3初始脾脏体积的脾脏组织.微波消融后第1、3、5天分别行血常规和肝功能检查.微波消融后第7和14天分别行血常规、肝功能、多普勒超声检查.微波消融后第30天行增强CT检查.微波消融后1和3个月,以及之后每3个月行血常规、肝功能、肾功能、血清淀粉酶水平和多普勒超声检查.随访时间>2年.临床数据的比较采用t检验.结果 消融体积比例为41%~57%,平均为(47±5)%.术前白细胞平均计数为(2.46±0.78)×10^9/L,术后渐升,至术后第3天达峰值[(5.34±2.10)×10^9/L],之后渐下降,术后24个月时为(3.16±1.02)×10^9/L,与术前比较差异有统计学意义(t=-3.349,P<0.01).术前血小板计数为(46.58±17.30)×10^9/L,术后渐下降,至术后第3天达最低点,之后开始上升,于术后30 d内达峰值[(101.79±25.80)×10^9/L],之后渐下降,术后24个月时为(61.97±15.09)×10^9/L,与术前比较差异有统计学意义(t=-4.135,P<0.01).术前门静脉平均内径为(14.66±0.88) mm,术后3个月时为(13.22±0.64) mm,与术前比较差异有统计学意义(t=8.145,P<0.01),术后6个月时为(14.64±0.81) mm,与术前比较差异无统计学意义(P>0.05).主要不良反应为发热、左上腹痛、左肩痛、胸腔积液、腹腔出血、短时血红蛋白尿,对症治疗后均恢复.未发生无法控制的出血、脾脓肿、脾破裂、周围器官损伤等严重并发症或治疗相关的死亡.结论 经皮分次微波消融�
- 江向武马彦冯淑芬刘雪莲杨冬华
- 关键词:微波消融脾功能亢进症疗效
- 肝癌瘤苗的研究现状与展望
- 肝癌瘤苗的研究主要涉及树突状细胞瘤苗、基因瘤苗、高强度聚焦超声固化瘤苗、人细胞融合肝瘤瘤苗、化学修饰肝癌细胞瘤苗和细胞因子—微粒肝瘤苗等方面.本文便对这几方面作了详细的探讨.并指出肝癌瘤苗将成为治疗肝癌的重要手段.但目前...
- 杨冬华
- 关键词:肝癌瘤苗肿瘤免疫治疗
- 文献传递
- CDKN2A位点p16^(INK4α)、p14^(ARF)基因变异与胃癌发生的关系被引量:5
- 2004年
- 目的 探讨p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因变异与胃癌发生的关系。方法 应用聚合酶链反应(PCR)、PCR-单链构象多态性(SSCP)、PCR甲基化分析法和RT-PCR分别检测48例胃癌及癌旁组织中p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因纯合性缺失、突变、CpG岛甲基化及mRNA表达状况。结果(1)胃癌组织p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因总缺失率为35.4%(17/48),癌旁组织均未见纯合性缺失。(2)31例无纯合性缺失的胃癌及癌旁组织均未见p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因点突变。(3)胃癌组织p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因总甲基化率为47.90%(23/48),癌旁组织仅2例甲基化,两者差异有显著性(P<0.01)。(4)胃癌组织p16^(INK4a)mRNA缺失率为47.9%(23/48),其中E1α和E2共甲基化者p16^(INK4a)mRNA缺失率(100%,6/6)明显高于其他类型甲基化者(11.8%,2/17)(P<0.01);胃癌组织p14^(ARF)mRNA缺失率为45.8%(22/48),其中E1β和E2共甲基化者p14^(ARF)mRNA缺失率(100%,3/3)明显高于其他类型甲基化者(15%,3/20)(P<0.05)。(5)低未分化癌组p16^(INK4a)和p14^(ARF)mRNA共同缺失率(36.7%,11/30)明显高于高中分化癌组(5.6%,1/18)(P<0.05)。结论 胃癌中p16^(INK4a)和p14^(ARF)基因失活多由纯合性缺失和5’CpG岛甲基化所致,其表达缺失与胃癌的发生密切相关。
- 汤绍辉杨冬华罗和生于皆平舒建昌
- 关键词:P16^INK4AP14^ARF基因变异胃癌
- β受体阻滞剂联合5-单硝酸异山梨酯与内镜套扎术预防食管静脉曲张破裂再出血疗效比较的荟萃分析被引量:1
- 2008年
- 肝硬化食管静脉曲张破裂出血后,患者再出血和死亡的危险性明显增加,采取一定的干预措施防止再次出血极为重要。内镜套扎术(EVL)和B受体阻滞剂(BB)是目前防止食管静脉曲张破裂再出血的两种主要方法。有研究表明,BB联合5-单硝酸异山梨酯(ISMN)的疗效优于单用BB;但比较BB联合ISMN与EVL预防食管静脉曲张破裂再出血的疗效,各项研究结果却不一致,甚至相互对立。
- 丁世华杨冬华汤绍辉黄卫
- 关键词:肝硬化食管静脉曲张破裂出血5-单硝酸异山梨酯内镜套扎术疗效比较再出血Β受体阻滞剂
- 卵巢癌、结肠癌、胰腺导管内乳头状黏液腺癌三原发癌一例
- 2009年
- 患者女,54岁。因“腹痛、恶心6h”于2008年9月2日入院。患者6h前晚餐后腹痛,始为上腹部,渐弥散至全腹,呈阵发性绞痛,无发热、呕吐及腹泻,2h前曾排便。既往史:15年前曾因卵巢癌行卵巢癌根治术,术后应用铂类制剂静脉化疗;高血压病史5年,血压控制可。无吸烟、酗酒史,家族史无特殊。
- 姚艳芳杨冬华汤绍辉甘思远冯淑芬
- 关键词:三原发癌黏液腺癌结肠癌乳头状导管内胰腺
- 肝癌和癌旁肝组织胰岛素样生长因子-Ⅱ及其受体的免疫电镜研究被引量:6
- 2000年
- 覃汉荣杨冬华范子荣邱庆林徐重张鸣青
- 关键词:肝癌免疫电镜
- Cox回归分析对肝肾综合征预后因素的评估被引量:7
- 2003年
- 目的 探讨影响肝肾综合征(HRS)预后的参数及最佳预后指标。方法 对71例肝硬化合并HRS患者进行研究,以确诊HRS时间为基线,选择35个可能对肝肾综合征预后产生影响的临床及生物化学指标,通过COX比例风险模型对患者预后进行多因素分析。结果 Child-Pugh评分是HRS的独立危险因素,相对危险度=1.333,95%可信区间为(1.026,1.731)。结论 Child-Pugh评分是临床上判断HRS患者预后的最重要指标。
- 张文洁杨冬华舒建昌
- 关键词:COX回归分析肝肾综合征预后肝硬化合并症肾衰竭