李羽
- 作品数：66 被引量：162H指数：6
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省社会发展科技攻关项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 拉米夫定治疗期间患者体内HBV-DNA聚合酶基因变异的分析被引量：1
- 2004年
- 目的 :了解接受拉米夫定 (Lamivudine)治疗的慢性乙型肝炎患者体内HBV P基因的变异特点及规律 ,提高抗HBV的治疗效果。 方法 :①选择 5 0例服用拉米夫定 (1 0 0mg /d)的慢性乙型肝炎患者 ,采集 1 3例服药 4 8周时HBV DNA检测阳性患者的外周血 ,提取HBV DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)技术扩增后直接测序 ,分析HBV P基因的酪氨酸 蛋氨酸 天冬氨酸 天冬氨酸 (YMDD)基序变异情况 ,同时用基因芯片方法进行验证。②用逆向追踪方法对上述 1 3例HBV DNA阳性患者服药前和服药 36周时血清标本中扩增的HBV P基因片段进行测序及HBV DNA定量的检测。同时对 5 0例患者服药前、服药 1 2、2 4、36和 4 8周时的丙氨酸氨基转移酶 (ALT)进行检测 ,观察对比发生YMDD变异者及非变异者ALT的变化情况。 结果 :①拉米夫定治疗 4 8周结束时 ,1 3例HBV DNA检测阳性的患者中有 5例外周血中HBV P基因发生YMDD变异 ,其中 2例为YVDD变异 ,伴L5 2 8M变异 ;3例为YIDD变异。②所有YMDD变异均发生于用药 36周以后 ,变异率为 1 0 % ,基因芯片检测结果与测序完全符合。③除了YMDD外 ,还发现了若干其他的变异位点 ,如 1例伴有N4 82E、N4 87K、V5 2 1L、T5 32S和S5 6 1T突变 ;1例伴有T4 6 6N、N4 6 9I、Y4 72N、G4 75R、D4 79N和D4 82N突变 ;
- 张岩白雪帆李新红李羽王九平王平忠陈伟红李光玉
- 关键词：拉米夫定慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒YMDD变异
- 陕西地区乙型肝炎患者血清中病毒的基因分型被引量：36
- 2002年
- 目的 了解陕西地区乙肝病毒 (HBV)基因分型情况 .方法 用套式 PCR方法从 10 0份 HBs Ag阳性的乙型肝炎患者血清中扩增 5 85 bp的 S基因 ,用限制性内切酶 Bsr ,Sty ,Dpn 和 H pa 平行酶切鉴别 HBV A～ F基因型 .结果 所有标本用内引物 P1和 P2均扩增获得的 5 85 bp的靶基因 ,继之用上述限制性内切酶消化鉴定 ,证明 10 0份血清标本中的 HBV可分为 B型 36份 (36 % ) ,C型 5 6份 (5 6 % ) ,D型 8份 (8% ) .结论 陕西地区 HBV分型以 B,C型为主 ,D型较少 ,未发现 A,E,F型 .结果同时表明 PCR- RFL P方法灵敏性高 ,特异性强 ,且酶切图谱简明单一 ,易于识别 。
- 张岩白雪帆李新红李羽谢玉梅康文臻赵玉玲
- 关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应PCR-RFLP乙型肝炎基因分型
- 汉坦病毒蛋白相互作用研究
- HN是有包膜的负链RNA病毒(negative-strand RNA virus,NSRV)。基因组分为L、M 和S 3个片段,分别编码HV的RNA聚合酶、包膜糖蛋白(G1、G2)和核蛋白(NP)。近年来, HV蛋白之间...
- 陈延平王平忠白雪帆李羽
- 文献传递
- 介导大鼠结缔组织生长因子基因沉默的慢病毒载体转移质粒的构建及鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:构建介导大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因沉默的慢病毒载体转移质粒pGCL-CTGF,为进一步包装慢病毒载体奠定基础。方法:以大鼠CTGF基因为靶基因,根据RNA干扰(RNAi)序列设计原则,设计4对有小发夹结构的RNAi靶点序列,退火形成双链DNA,双酶切后定向克隆到慢病毒载体转移质粒pGCL-GFP中,构建4个含靶基因片段的重组慢病毒载体转移质粒pGCL-CTGF,并对质粒进行PCR及测序鉴定。结果:CTGF的短发夹RNA(shRNA)片段被成功克隆到慢病毒载体转移质粒pGCL-GFP中,4个插入序列与设计的靶基因片段完全一致。结论:构建了能够表达4个含CTGF靶基因片段的慢病毒载体转移质粒,为进一步包装介导CTGF基因沉默的慢病毒载体奠定了基础。
- 彭梅娟郝春秋姜泓谢玉梅张岩李羽陈隆白雪帆
- 关键词：结缔组织生长因子慢病毒载体肝纤维化
- 拉米夫定联合双甲五灵胶囊的抗肝纤维化作用被引量：5
- 2004年
- 目的研究拉米夫定与双甲五灵胶囊联合治疗对慢性乙型肝炎患者血清肝纤维化指标及肝脏病理组织学的影响。方法随机选择50例慢性乙型肝炎患者作为治疗组,给予口服中药双甲五灵胶囊,3次/d,6粒/次,并同时口服拉米夫定01g/d,疗程1年;同时设对照组,给予保肝对症治疗。动态观察服药0、6、12个月患者血清中肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(ⅣC)的变化;对其中8例患者治疗前后肝穿刺活检,用Masson三色组织化学染色后观察肝组织纤维化程度的改变。结果与对照组相比,治疗组患者4项血清肝纤维化指标明显下降(P<001)。肝细胞坏死、汇管区炎细胞浸润及纤维化明显减轻。结论拉米夫定联合双甲五灵胶囊治疗慢性乙型肝炎,可使患者血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC含量显著下降,并减轻肝组织的炎症坏死和纤维化程度。
- 张岩李艳红谢玉梅李伟李羽张颖洪沙白雪帆
- 关键词：拉米夫定血清肝纤维化指标抗肝纤维化作用
- 血浆置换治疗重症肝炎时电解质变化的临床研究被引量：1
- 2005年
- 目的:观察血浆置换治疗重症肝炎时电解质的变化情况及对疗效的影响。方法:随机选取58例重症肝炎患者,其中并发低钾血症24例,低钠血症31例,低氯血症33例,在内科治疗的基础上加用血浆置换治疗,观察治疗前后血清K+、Na+、Cl-、HCO3-、Ca2+及肝功的变化情况,并对治疗前后血清电解质水平进行比较。结果:血浆置换治疗前后血清中K+、Na+、Cl-水平存在明显差异,HCO3-、Ca2+变化不明显。存活患者治疗前后电解质水平差异明显,无效患者则无明显改善。结论:血浆置换治疗重症肝炎可有效纠正电解质紊乱,纠正的程度可能影响患者的预后。
- 李羽白雪帆冯志华张岩郑荣
- 关键词：血浆置换电解质人工肝支持系统重症肝炎
- 针对HBVS区的siRNA的抗病毒活性被引量：2
- 2005年
- 目的:体外观察siRNA对HepG22.2.15细胞中乙型肝炎病毒(HBV)SmRNA及HBsAg,HBeAg产生的影响.方法:设计并合成针对HBVS区的三条siRNA,构建含上述siRNA的表达载体pSilencerZY1,pSilencerZY2和pSilencerZY3,pSilencerHK2测序及酶切鉴定后用脂质体介导重组质粒转染HepG22.2.15细胞,用酶免分析法对HepG22.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg进行检测,用逆转录聚合酶链反应检测HBVSmRNA.结果:成功构建了针对HBVS区的siRNA的表达载体,三条siRNA均可程度不同地抑制HepG22.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的分泌,72h抑制率达高峰,对HBsAg的抑制率分别为81%,29%及78%,对HBeAg的抑制率分别为35%,3%及49%,并有抑制HBVSmRNA的作用.结论:针对HBVS区的siRNA能明显抑制HBV的复制.
- 张岩白雪帆张颖黄长形李羽李光玉王平忠洪沙陈伟红任广立
- 关键词：S抗原RNA干扰
- 第60～80位氨基酸多肽片段缺失的HCV核蛋白在真核细胞中的表达被引量：4
- 2005年
- 目的:构建丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)第6080位氨基酸多肽缺失核蛋白的真核表达载体,并在真核细胞中表达.方法:用RTPCR方法从西安地区丙型肝炎患者血清中扩增HCVC区及部分E1区基因并进行克隆、测序,以此为模板用重叠延伸拼接方法扩增第6080位氨基酸多肽基因缺失的核蛋白基因片段(C510),将其定向克隆入哺乳动物高效表达载体pCIneo中,通过Lipofectamine2000转染入p815细胞,经间接免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜和WesternBlotting方法检测细胞中目的蛋白的表达.结果:从患者血清中成功克隆出HCVC区基因,序列及系统发生树分析结果显示为1b型;测序结果显示构建的第6080位氨基酸多肽缺失核蛋白基因的重组真核表达质粒pCI510基因序列准确;免疫荧光和免疫印迹方法均证实目的蛋白p170可在p815细胞中表达.结论:重组体pCI510构建正确,其目的基因在p815细胞中可有效表达,为进一步的研究奠定了基础.
- 洪沙黄长形杨为松陈红梅李光玉王平忠陈伟红张岩李羽白雪帆
- 关键词：肝炎病毒病毒核心蛋白质类
- 永生化肝细胞移植治疗肝衰竭被引量：1
- 2006年
- 目的观察永生化胎肝细胞及胚胎肝细胞经脾脏移植对D-氨基半乳糖(D-gal)诱导的急性肝衰竭大鼠的治疗作用.方法采用D-gal诱导大鼠急性肝衰竭,分3组进行治疗实验,Ⅰ组经脾脏移植永生化胎肝细胞2×107个;Ⅱ组移植原代胚胎肝细胞2×107个;Ⅲ组脾脏注射生理盐水1mL,各组大鼠同时肌肉注射环孢霉素A(CsA)10mg/kg.观察大鼠的存活率、肝脏功能、肝脏病理变化情况.结果Ⅰ组及Ⅱ组大鼠存活率均显著高于Ⅲ组大鼠(72.2%vs22.2%,61.1%vs22.2%,P<0.01),肝脏功能及肝脏病理均有改善,Ⅰ组与Ⅱ组之间大鼠存活率无明显差异(72.2%vs61.1%,P>0.05).结论经脾脏移植胚胎肝细胞可明显改善D-gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率,改善肝功能及肝脏病理,该永生化胎肝细胞可以成为肝细胞移植研究中的理想细胞材料.
- 李羽王军徐哲张岩白雪帆
- 关键词：永生化D-氨基半乳糖
- 儿童流行性出血热误诊2例被引量：1
- 2005年
- 张岩李羽
