李恒
- 作品数:10 被引量:41H指数:4
- 供职机构:华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Fibulin-5基因慢病毒表达载体的构建与鉴定
- 2012年
- 目的构建Fibulin-5基因的慢病毒表达载体。方法从pBluescript-Fibulin5质粒中克隆出Fibulin-5基因,将其连同慢病毒载体质粒pCDH-CMV-MCS-EF1双酶切,使目的基因连接到载体质粒中,构建成重组慢病毒载体质粒pCDH-F5。对重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行酶切鉴定和测序鉴定后,制备包装病毒并感染膀胱癌细胞系5637,检测细胞中Fibulin-5基因的表达水平。结果构建的重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行PCR及酶切鉴定,获得的克隆和酶切产物与预计的基因片段大小一致。所获得的Fibulin-5基因经测序后与报道序列对比仅有1处突变,且属同义突变,说明pCDH-F5中携带正确的Fibulin-5基因。通过感染5637细胞,发现构建的慢病毒转染效率达95%以上,且能有效表达Fibulin-5基因。结论实验成功构建了Fibulin-5基因的慢病毒表达载体。
- 李恒肖巍余淦杨洋徐华叶章群
- 关键词:FIBULIN-5慢病毒表达载体
- 改良式Brricker回肠膀胱术早期并发症危险因素分析被引量:3
- 2013年
- 目的探讨根治性改良式Bricker回肠膀胱术(BUD)早期并发症相关的手术危险因素。方法回顾总结52例行改良式BUD的膀胱癌患者的术后早期并发症(90 d),对并发症按照Clavien-Dindo手术并发症分级标准进行分级,采用Logistic回归分析术后早期并发症的危险因素。结果改良BUD术膀胱癌患者发生并发症共30例(57.7%),其中轻中度并发症发生率为36.5%(19/52),重度并发症发生率为21.2%(11/52)。Logistic回归分析显示年龄(P=0.023)、Charlson合并症指数(CCI)(P=0.015)、美国麻醉学评分(ASA)(P=0.017)、手术时间(P=0.033)和术后早期轻中度并发症显著相关;年龄(P=0.009)、CCI(P=0.015)、ASA(P=0.022)和重度术后早期并发症显著相关。结论 Clavien-Dindo并发症分级系统可作为根治性膀胱切除术尿流改道术后并发症的分析研究,年龄、CCI、ASA和重度术后早期并发症呈显著性相关。
- 曾星胡志全王志华李恒庄乾元叶章群
- 关键词:膀胱肿瘤根治性膀胱切除术并发症
- 人KLF4基因克隆及重组KLF4慢病毒表达载体的构建被引量:1
- 2013年
- 背景:KLF4基因在细胞分化过程中有重要作用。目的:构建KLF4基因慢病毒过表达载体。方法:聚合酶链反应扩增(PCR)目的基因KLF4后插入慢病毒表达载体pCDH中,构建重组载体pCDH-KLF4。通过PCR、双酶切和DNA测序方法对其鉴定,共同转染293NT细胞包装病毒,荧光显微镜观察报告基因的表达情况,收集病毒上清,测定病毒的滴度。将重组的慢病毒感染5637细胞,RT-PCR检测KLF4mRNA的表达。结果与结论:重组慢病毒表达载体质粒经限制性酶切和DNA测序分析证实重组慢病毒载体pCDH-KLF4的插入序列完全正确,重组慢病毒载体感染5637细胞后,细胞内KLF4mRNA高表达。结果证实,实验成功构建KLF4基因慢病毒过表达载体。
- 王博涵余虓余淦李恒肖巍徐华叶章群
- 关键词:慢病毒载体DNA测序泌尿系肿瘤
- PSAD预测前列腺癌根治术前后Gleason评分变化的临床应用价值被引量:5
- 2013年
- 目的:探讨前列腺根治术前血清前列腺特异性抗原密度(PSAD)预测术后Gleason评分变化的应用价值。方法:对133例行前列腺癌根治术的患者资料进行回顾,将前列腺癌根治术前术后Gleason评分变化与患者年龄、术前Gleason评分、前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺体积和PSAD的相关性进行分析,并进一步分析术前Gleason评分≤6患者中评分升高和Gleason评分≥7患者中评分下降与上述因素的关系。结果:133例患者中经直肠超声(TRUS)引导下前列腺穿刺活检Gleason评分与前列腺癌根治术后Gleason评分保持一致52例(39.1%),评分下降13例(9.8%),评分升高68例(51.1%)。PSAD(P=0.002)与Gleason评分升高明显相关,未发现Gleason评分≥7患者中评分下降与前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺体积和PSAD有相关性。进一步应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析得出:TRUS穿刺活检Gleason评分≤6患者PSAD>0.2435预示根治术后Gleason评分升高可能性较大。结论:TRUS引导下前列腺穿刺活检Gleason评分较低且PSAD较高的前列腺癌患者提示有可能实际Gleason评分升高,进而影响治疗选择和预后。
- 曾星王志华胡志全邓康俐杨春光李恒庄乾元叶章群
- 关键词:前列腺癌前列腺特异性抗原密度GLEASON评分
- 改良式Bricker回肠膀胱术与经典式Bricker回肠膀胱术并发症的比较被引量:5
- 2014年
- 目的比较分析改良式Bricker回肠膀胱术与经典式Bricker回肠膀胱术并发症的发病情况。方法回顾总结46例改良式Bricker回肠膀胱术和52例经典式Bricker回肠膀胱术,应用Clavien-Dindo并发症分级系统进行分析。结果改良式Bricker回肠膀胱术组并发症发生率为34.8%(16/46),经典式Bricker回肠膀胱术并发症发生率为67.3%(35/52),改良式Bricker回肠膀胱术组并发症发生率明显降低,且重度并发症发生率较低(30 d,4.3%vs.15.4%;90 d,6.5%vs.17.3%)。结论Clavien-Dindo并发症分级系统可作为根治性膀胱切除术尿流改道术后并发症的分析研究,改良式Bricker回肠膀胱术较经典Bricker回肠膀胱术可有效降低术后并发症,患者术后生活质量更高。
- 曾星胡志全王志华李恒庄乾元叶章群
- 关键词:根治性膀胱切除术尿流改道术
- 抗人转铁蛋白受体单克隆抗体增强姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌的抑制效应被引量:4
- 2012年
- 目的检测抗人转铁蛋白受体单克隆抗体(TfR mAb)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞生物学行为的影响,了解抗人TfR mAb对姜黄素抗瘤作用的协同效应。方法利用杂交瘤细胞株制备抗人TfR mAb,分别采用CFSE染色、AnnexinⅤ-PI染色和PI染色法流式细胞仪检测抗人TfR mAb对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。采用FITC标记的鼠抗人TfR mAb检测姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞表面TfR表达的影响。采用流式细胞仪进一步检测抗人TfR mAb联合姜黄素对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果抗人TfR mAb对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期无明显影响(均P>0.05)。姜黄素能够显著上调雄激素非依赖性前列腺癌细胞表面TfR表达(P<0.05)。抗人TfR mAb可显著增强姜黄素对PC-3细胞凋亡的诱导作用(P<0.05),而不影响姜黄素对PC-3细胞增殖和细胞周期的影响(均P>0.05)。结论姜黄素可导致雄激素非依赖性前列腺癌细胞表面TfR表达增高。抗人TfR mAb单独作用对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的生物学行为无显著影响,但抗人TfR mAb可以增强姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的凋亡效应。
- 刘双林王志华胡志全曾星李有元李恒章传华叶章群
- 关键词:姜黄素转铁蛋白受体单克隆抗体雄激素非依赖性前列腺癌细胞凋亡
- 雄激素受体剪接突变体7和雄激素受体表达量的比值在预测前列腺癌内分泌治疗预后中的作用被引量:12
- 2018年
- 目的分析雄激素受体(androgen receptor, AR)和雄激素受体剪接突变体7(androgen receptor splice variant-7, AR-V7)表达量的比值(AR-V7/AR)预测前列腺癌内分泌治疗预后的作用。方法采用免疫组化染色法检测2010年1月至2015年12月我院行内分泌治疗的136例前列腺癌患者的活检穿刺标本,以HS评分评估其表达量。患者年龄53~96岁,中位年龄71岁。确诊时中位tPSA为110.00 ng/ml(2.61~4 003.40 ng/ml),中位fPSA为14.62 ng/ml(0.12~640.19 ng/ml),中位PSA密度为1.15 ng/(ml·cm^3)[0.02~62.63 ng/(ml·cm^3)]。Gleason评分≥8分88例(64.7%),7分39例(28.7%),〈7分9例(6.6%);T3期57例(41.9%),T4期54例(39.7%),Tx期25例(18.4%);N0期46例(33.8%),N1期62例(45.6%),Nx期28例(20.6%);M0期30例(22.1%),M1期97例(71.3%),Mx期9例(6.6%)。利用Cox模型分析患者各临床因素对前列腺癌内分泌治疗预后的影响,采用Kaplan-Meier法分析AR-V7/AR对前列腺癌内分泌治疗预后的预测作用。结果本组136例中79例(58.1%)AR表达阳性,其中26例(19.1%)AR-V7表达阳性。Spearman相关性分析结果显示,AR与AR-V7的表达无相关性(r=0.042, P=0.629)。本组136例中位随访时间为44个月(15~71个月)。中位疾病无进展生存时间(PFS)为19个月(5~59个月);中位总生存时间(OS)为31个月(12~61个月)。AR-V7阳性患者较阴性患者有较短的中位PFS(10.8个月与25.0个月,P〈0.001)和中位OS(20.3个月与42.8个月,P〈0.001);高AR-V7/AR值患者较低AR-V7/AR值患者有较短的中位PFS(12.0个月与24.8个月,P〈0.001)和中位OS(22.5个月与42.8个月,P〈0.001)。在Cox单因素回归分析中,确诊时Gleason评分、前列腺癌T分期、tPSA、PSA密度、AR-V7/AR值可预测内分泌治疗的预后。在Cox多因素回归分析中,T4期(HR=2.597,95% CI 1.351~4.995,P=0.004)和高
- 王之泽张宇聪丁北辰肖巍刘聪李恒叶章群
- 关键词:前列腺肿瘤雄激素受体内分泌治疗预后
- 冷冻消融在肾肿瘤治疗中的应用被引量:4
- 2011年
- 肾肿瘤是泌尿系统常见的肿瘤性疾病,在中国,肾肿瘤的发病率位居泌尿系肿瘤第二位,仅次于膀胱肿瘤。随着超声、CT、MRI等技术的广泛应用,越来越多的肾肿瘤在体检时被发现,其中60%以上都是直径≤4cm的肾肿瘤。
- 李恒叶章群
- 关键词:肾肿瘤冷冻消融肿瘤性疾病泌尿系肿瘤泌尿系统膀胱肿瘤
- 前列腺癌干细胞的理论与技术新观念被引量:1
- 2010年
- 在西方国家前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤,占男性癌症死因的第2位。我国前列腺癌发病率虽较西方国家低,但近年随着人口老龄化及饮食习惯的改变,发病率也有明显增加的趋势。肿瘤千细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体,具有自我复制增殖的能力,是形成不同分化程度肿瘤细胞及肿瘤转移、耐药和复发等现象的根源。最近在前列腺癌中也发现了肿瘤干细胞的存在,称为前列腺癌干细胞。通过对前列腺癌干细胞的研究,人们对前列腺癌发生、发展,诊断、治疗及预后的判断提高到一个新的阶段。
- 王志华李恒李有元胡志全叶章群
- 关键词:肿瘤干细胞前列腺癌癌发病率人口老龄化饮食习惯细胞群体
- 前列腺癌冷冻消融治疗新进展被引量:6
- 2011年
- 前列腺癌是老年男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤,在欧美国家男性肿瘤发病率和死亡率中分别占第一和第二位。在我国,随着生活方式、饮食习惯的改变及检测水平的提高,近年发病率有明显上升趋势。目前治疗前列腺癌的方法主要有根治性手术治疗,激素治疗,前列腺内、外照射治疗。
- 李恒胡志全
- 关键词:前列腺癌男性泌尿生殖系统根治性手术治疗冷冻年发病率外照射治疗