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李建侠: 作品数：23 被引量：84H指数：5; 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>; 发文基金：山东省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目山东省科技发展计划项目更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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肉鸡群中呼吸道病原体共感染情况调查被引量：10: 2011年; 【目的】对肉鸡群中常见的呼吸道病原体共感染情况进行调查,为肉鸡呼吸道疾病的防控提供流行病学资料。【方法】从山东省济南、潍坊、青岛等地区采集421份有呼吸道症状的病(死)鸡肺脏及160份临床健康肉鸡的肺脏作为供检样品,用特异性核酸探针技术,对其进行H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、禽偏肺病毒(aMPV)、禽败血性支原体(MG)、鼻气管鸟杆菌(ORT)和大肠杆菌(E.coli)共感染情况的调查。【结果】421份发病肉鸡肺脏中,H9N2AIV、NDV、IBV、aMPV、MG、ORT和E.coli的检出率分别为53.68%,68.41%,33.49%,54.87%,57.25%,9.02%和41.17%;且存在严重的共感染现象,共感染率高达90.26%,单一感染和阴性个体仅占7.36%和2.38%;发病肉鸡群中,7种呼吸道病原体2重、3重、4重、5重、6重、7重感染的检出率分别达19.48%,26.12%,27.32%,11.88%,4.51%和0.95%,以2重、3重和4重感染较为常见。而临床健康肉鸡肺脏中,H9N2AIV、NDV、IBV、aMPV、MG、ORT和E.coli的检出率分别为12.50%,23.13%,5.63%,36.87%,21.88%,0%和16.88%;呈阴性和单一感染的样品分别占25.00%和43.75%;多重感染样品仅占31.25%,且主要为2重感染。7种病原体中,H9N2AIV、NDV、MG和E.coli在肉鸡呼吸道疾病的共感染中起重要作用。【结论】发病肉鸡和临床健康肉鸡均存在混合感染,但以发病鸡群更为严重和复杂;呼吸道病原体多重感染是导致肉鸡呼吸道疾病日益严重的重要原因。; 孙静刁有祥刘霞孙杰李建侠; 关键词：肉鸡呼吸道病原体共感染斑点杂交

高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性研究: 研究目的:探讨高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性。方法:在高抗体水平下，通过点眼、滴鼻、气管注射3种接种途径人工感染300日龄种鸭，观察种鸭的发病情况、症状及剖检变化;于感染后3、6、9d采血进行血液生化指标...; 肖坡刁有祥李建侠吴海洋程艳丽; 关键词：血液生化指标组织病理学间接免疫荧光

10株鸭源新城疫病毒的分离鉴定及F基因遗传进化分析被引量：25: 2010年; 为调查山东省鸭群中新城疫病毒(NDV)的流行情况,对2007—2009年山东不同地区发病鸭群进行了NDV的分离鉴定,并对分离的10株鸭源NDV进行了生物学特性和遗传特性研究。结果显示:10株鸭源NDV的致病指数MDT和ICPI测定结果分别为50.4～60.0和1.66～1.78,表明10株分离株均属强毒株。致病性试验显示,3株代表毒株对不同日龄雏鸭均具有较强的致病性,发病率和死亡率分别达70%～100%和20%～70%。对F基因序列分析表明,相对于基因Ⅰ～Ⅵ型NDV,10株鸭源NDVF蛋白存在较大变异,这些变异主要集中在1—30、101—124、479—494和509—516 aa处,且在52、71、176、272、314、402和489位出现了与近几年流行毒株一致的氨基酸替代。核苷酸同源性分析结果表明,10株鸭源NDV之间同源性在95.8%～99.9%,与2000年以来国内外分离的基因Ⅶ型NDV同源性较高,在95.7%～99.8%,与传统LaSota、F48E9同源性较低,为83.8%～90.9%。遗传进化分析结果显示分离毒株均属于基因Ⅶd型。此外,10株鸭源NDV还具有大多数鹅源NDV所特有的973位和1 249位RsaⅠ位点。上述结果表明基因Ⅶd型NDV是造成我国鸭群近年来发生新城疫的主要病原,鸭源NDV很可能源于早期的鹅源NDV。; 孙杰刁有祥李建侠吴焕荣颜贇杨建朋李瑶瑶; 关键词：新城疫 F基因

商品肉鸡中包涵体肝炎病毒的分离鉴定: 从山东省自然发生疑似鸡包涵体肝炎的商品肉鸡群中分离到4株鸡包涵体肝炎病毒，分别命名为山东章丘株(SDZQ)、山东费县株(SDFX)、山东日照株(SDRZ)和山东潍坊株(SDWF)。这些毒株的复制可被5-溴尿嘧啶-2-脱氧...; 国纪垒刁有祥薛聪王蛟李建侠唐熠程彦丽; 关键词：商品肉鸡包涵体肝炎

鸭副黏病毒油乳剂灭活疫苗的制备被引量：2: 2011年; 将分离的鸭副黏病毒,经0.1%的甲醛灭活后与白油、吐温-80、司盘-80,按一定比例混合后在胶体磨中快速乳化成油包水型,制备了鸭副黏病毒油乳佐剂灭活疫苗。并对制备的疫苗进行了物理性状、无菌检验、安全性、稳定性检验、抗体消长规律、交叉免疫保护及免疫效力检验。结果表明,该疫苗安全可靠,注射后鸭的精神状况良好,饮食、粪便无异常变化,注射部位未见明显变化,疫苗吸收良好。免疫后14d即可产生抗体(平均为41og2),60d可达到91og2。免疫后25d攻毒保护率可达90%以上。; 刘霞刁有祥李秀娟李建侠; 关键词：副黏病毒油乳剂灭活苗

人工感染种鸭生殖系统新城疫病毒的检测: 本研究旨在探明鸭新城疫病毒通过人工感染后在种鸭生殖系统中分布。应用本实验室分离的一株经鸭胚传递的新城疫病毒SDFCH株，对42只无新城疫病毒感染的28周龄樱桃谷种鸭进行人工感染试验，试验分A、B、C 3组，A组母鸭攻毒组...; 李建侠刁有祥刘霞程彦丽肖坡国纪垒孙静吴海洋; 关键词：人工感染试验种鸭新城疫病毒生殖系统 RT-PCR检测

山东省鸡鼻气管鸟杆菌的分离与鉴定被引量：4: 2010年; 【目的】对山东省鸡鼻气管鸟杆菌进行分离鉴定。【方法】采集山东省不同地区有呼吸道症状的病(死)鸡,进行鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)的分离,根据培养特性及生化试验和玻片凝集试验结果对分离的菌株进行鉴定;应用PCR方法对分离菌株16SrRNA基因的一段保守序列进行扩增,应用琼脂扩散沉淀试验(AGP)对分离菌株的血清型进行鉴定,并对分离株进行药敏试验。【结果】试验共分离到5株ORT,所有分离菌株均能扩增到1条长671bp的特异性片段,而阴性对照菌株的扩增结果为阴性;5株ORT分离菌株可分为3个血清型,其中血清A型3株、血清B型1株、血清D型1株;分离ORT菌株对羟氨苄青霉素、头孢曲松、丁胺卡那、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星高度敏感。【结论】从山东省病死肉鸡中分离鉴定到5株ORT。; 吴海洋刁有祥李瑶瑶李建侠孙静刘霞陈琳; 关键词：鼻气管鸟杆菌

肉鸡呼吸道病料中AIV、NDV、IBV、aMPV共感染的检测: 本文从山东省济南、潍坊、青岛等地区肉种鸡群采集107份有呼吸道症状的病、死鸡肺脏样品，检测病料中低致病性禽流感病毒(Avian Influenza virus，AIV)、新城疫病毒(Newcastle disease v...; 孙静刁有祥刘霞孙杰李建侠程彦丽; 关键词：传染性支气管炎病毒共感染; 文献传递

鸭源新城疫病毒RT-LAMP快速检测方法的建立被引量：3: 2011年; 【目的】建立鸭源新城疫病毒逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)快速检测方法,为鸭源新城疫病毒的快速诊断提供支持。【方法】选取鸭源新城疫病毒NP基因的相对保守区序列,利用Primer Explorer V4在线软件设计了3对RT-LAMP引物,以鸭源新城疫病毒SDFCH株RNA为模板进行RT-LAMP反应,通过对反应温度、时间及反应体系各组分浓度的筛选,优化反应体系和反应条件,然后对该方法的灵敏性和特异性进行检测(以RT-PCR方法为对照),并将其应用于临床病料检测。【结果】优化的RT-LAMP反应体系能够在63℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,反应结果可直接用肉眼判断;建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法特异性较强,灵敏度较高,与其他病毒,如H9N2亚型禽流感病毒(AIV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、禽偏肺病毒(aMPV)、传染性支气管炎病毒(IBV)等的核酸无交叉反应,可检测到1×10-3稀释度的目标RNA(0.1pg/μL),较普通RT-PCR的灵敏性高10倍;利用建立的鸭源新城疫病毒RT-LAMP检测方法对24份疑似鸭源新城疫样品的阳性检出率为41.7%。【结论】建立的鸭源新城疫病毒的RT-LAMP检测方法,具有快速、准确、特异性强、灵敏度高的特点。; 鞠小军刁有祥唐熠程彦丽陈琳李建侠宋晓娜; 关键词：新城疫病毒

高抗体水平下H9N2亚型禽流感病毒对鸭的致病性被引量：1: 2013年; 将60只种鸭免疫接种H9N2灭活疫苗,在高抗体水平下,通过点眼、滴鼻、气管注射3种接种途径人工感染300日龄种鸭,观察种鸭的发病情况、症状及剖检变化;于感染后3、6、9d采血进行血液生化指标检测;利用建立的RT-PCR方法检测各试验组和对照组的带毒情况;采集输卵管、肝脏、肺脏和气管等组织固定、切片、HE染色,观察各器官病理组织学变化;利用建立的IFA方法对H9N2在种鸭体内的分布进行研究。结果显示,3组接种H9N2亚型禽流感后,引起种鸭采食下降、流泪、排白色稀便等症状;总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(AKP)的含量发生了显著变化;病理组织学变化以肝脏颗粒变性和空泡变性,肺脏广泛性出血和炎性细胞浸润,输卵管纤维蛋白渗出为特征;IFA阳性信号主要分布于气管、输卵管、肺脏、肝脏和胰腺等处;对照组精神状态良好,各项生理指标趋于正常,IFA未检测到阳性信号。结果表明,在高抗体水平下,H9N2亚型禽流感病毒也可通过眼结膜、鼻腔黏膜、气管黏膜等侵入机体导致鸭的发病。; 肖坡刁有祥李建侠吴海洋程彦丽; 关键词：H9N2 血液生化指标组织病理学间接免疫荧光

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