李小俊 作品数:37 被引量:158 H指数:7 供职机构: 河北北方学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “重大新药创制”科技重大专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
树突细胞趋化因子对不可分型流感嗜血杆菌P6蛋白疫苗免疫效果的影响 韩小艳 张玉妥 王晨红 乔海霞 常月立 李小俊 杨新玲 该研究的成果和创新性在于首次通过基因工程技术体外大量诱导NTHiP6蛋白的表达首次探讨了MDC佐剂对P6蛋白疫苗免疫效果的影响。通过研究发现通过腹腔免疫MDC佐剂明显提高了NTHiP6疫苗的体液免液水平并在一定程度上提高...关键词:关键词:流感嗜血杆菌 基因佐剂 巨噬细胞源性趋化因子对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响 2015年 观察巨噬细胞源性趋化因子(MDC)佐剂对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响。将原核表达质粒PGEX-6P2/P6转入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导P6蛋白的表达并进行纯化。将BALB/c小鼠随机分为A-D四组,分别为PBS对照组、MDC对照组、P6蛋白组、P6蛋白联合MDC组。分别于0、14、28d经黏膜免疫,末次免疫后14d,每组12只小鼠取血和肺泡灌洗液,ELISA检测血清中IgG抗体和肺泡灌洗液中IgA抗体水平。每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4、IL-17和IFN-γ水平。用10LD50NTHi攻击每组剩余15只小鼠,观察免疫保护作用。在大肠杆菌中成功表达P6蛋白。第三次免疫后,D组诱导的IgG抗体、IgA抗体、IL-4、IL-17和IFN-γ水平显著高于其他各组(P<0.05)。经NTHi攻击后,D组生存率达80%,与A组、B组相比差异有统计学意义(P<0.05),但C组、D组之间无显著性差异(P>0.05)。MDC作为佐剂可以使NTHiP6疫苗获得较好的免疫效果。 韩小艳 张彦霞 杨新玲 李小俊 王晨红 张玉妥关键词:不可分型流感嗜血杆菌 黏膜免疫 两株红树林根际土壤放线菌的鉴定和抗菌活性研究 被引量:4 2017年 目的对分离自广西北仑河口红树林根际土壤的两株放线菌(B200、B205)进行抗菌活性研究及鉴定。方法观察两株放线菌的形态特征;通过PCR扩增、测定并比对16S rRNA基因序列,采用邻接法构建系统发育树并进行分析;通过液体发酵、萃取等方法,分别获得发酵液水相、发酵液酯相和菌丝丙酮浸提液三类样品;样品通过纸片扩散法进行抗菌活性测定。结果从红树林根际土壤分离的两株放线菌,其发酵液具有较强的广谱抗菌活性,菌株的16S rRNA基因序列对比结果显示,菌株B200和B205分别与有效发表菌株Agromyces subbeticus DSM16689~T的相似率为98.01%和Micromonospora rosaria DSM 803~T的相似率为99.73%,菌株B200可能为壤霉菌属潜在新种,B205初步鉴定是小单孢菌Micromonospora rosaria DSM 803~T的变种。结论分离自广西北仑河口红树林根际土壤的两株放线菌其次级代谢产物有较强抗菌活性,具有从中发现新抗生素的潜力。 吴越 李小俊 陈建宏 蒋莲秀 何玉林 韦晗宁 孙承航 黄大林关键词:红树林 放线菌 抗菌活性 耐药菌 RRNA 留学生医学微生物学实验教学实践与探索 被引量:1 2012年 医学微生物学是医学专业留学生的一门重要基础课,而实验课是医学微生物学整个教学环节中的一个重要组成部分。该文从教材和教学内容选取、实验准备、课堂教学及教学管理等方面,对留学生医学微生物学实验教学活动进行实践与探索,为医学院校开展留学生教育提供参考。 杨新玲 李小俊 张玉妥关键词:医学微生物学 留学生 实验教学 河南神仙洞放线菌资源勘探及抗菌活性筛选 被引量:7 2015年 目的勘探河南神仙洞放线菌多样性,以期发现药用微生物资源,为新抗生素发现奠定基础。方法采用10种分离培养基,以稀释涂布法分离放线菌;采用16S r RNA基因序列比对分析开展初步鉴别;经液体发酵,发酵液乙酸乙酯萃取,菌丝体丙酮浸提,获得提取浓缩物样品,采用纸片扩散法对样品进行抗菌活性筛选,活性菌株进行次级代谢产物生物合成基因NRPS,PKS I和PKS II的筛选。结果从6份土壤样品中共纯化到179株放线菌;经16S r RNA基因序列比对分析,它们分布于11个科18个属,其中链霉菌属为优势菌属;菌株S6R2A4-9的16S r RNA基因序列与最近有效菌株Flindersiella endophytica EUM 378T的相似率为93.58%,为潜在新属;发酵74株放线菌,其中52株在至少一个抗菌活性筛选中为阳性,总阳性率为70.27%。52株有活性的放线菌中,48株菌存在至少一个次级代谢产物生物合成基因簇,阳性率为92.3%,其中17株同时具有3种生物合成基因簇。结论河南新密神仙洞土壤中存在较为丰富的药用放线菌资源,具有从中发现放线菌新物种及新抗生素的潜力。 戴素娟 李静 刘少伟 李小俊 蒋忠科 姜蓉 孙承航关键词:洞穴 放线菌 生物合成基因簇 生物活性 利用原生质体融合技术选育高产菌株 被引量:3 2007年 以龟裂链霉菌(Sterpomyces rimosus)98#和76#为出发菌株,分别用溶菌酶制得2个亲本的原生质体,其中76#采用15 W紫外灯下30 cm照射25 min,100%灭活,用PEG诱导进行了原生质体的融合.通过比较菌落外观、颜色挑选融合子328株,结合前期代谢情况进一步筛选高单位的融合菌株8株,经反复传代考察融合子的稳定性后得到1株新菌株102#,其发酵单位比亲本提高了13.0%. 李小俊 孙海虹 赵宝华 边艳青关键词:原生质体融合 灭活 泌尿生殖道感染沙眼衣原体PmpH基因多态性分析 被引量:1 2024年 目的探讨泌尿生殖道感染沙眼衣原体多态膜蛋白H(PmpH)基因的多态性及与临床感染的关系,为研究PmpH作为候选疫苗在不同人群的应用差异提供理论基础。方法收集泌尿生殖道标本,标本处理后筛选阳性标本,巢式PCR扩增PmpH基因并进行序列测定,比对分析确定多态性位点,构建系统发育树进行基因分型,用卡方检验探讨PmpH基因型与患者性别、年龄的相关性。结果共获得阳性标本86份,70份标本扩增得到PmpH基因。多态性分析共发现21个多态性位点,其中13个位点能引起氨基酸差异。根据系统发育树的结果,将70例标本分为3个基因型。χ^(2)检验结果表明:PmpH基因型与性别没有相关性,与年龄具有相关性,20岁以下患者、30~40岁患者和40岁以上患者中,基因型1型最多,占比57.14%~77.27%;20~30岁患者中,基因型2最多,占比为58.33%。结论本组患者中引起泌尿生殖道感染的沙眼衣原体的PmpH基因共发现21个多态性位点,13个位点能引起氨基酸差异,PmpH基因可以分成3个基因型,基因型与患者年龄具有相关性。 常月立 王威 孙克 石岩丽 李小俊 张存辉 张玉妥关键词:沙眼衣原体 泌尿生殖道 多态性 系统发育树 沙眼衣原体PmpH基因克隆及生物信息学分析 2022年 [目的]克隆沙眼衣原体PmpH基因并进行生物信息学分析。[方法]以沙眼衣原体核酸检测阳性泌尿生殖道标本为研究对象,设计引物扩增PmpH基因,克隆、测序后获得其全长核酸序列,应用生物信息方法预测分析编码蛋白的理化性质、主要结构域、结构及B细胞抗原表位。[结果]PCR扩增出沙眼衣原体PmpH基因,克隆并测序后获得PmpH基因核酸序列,长度为3051 bp,预测PmpH蛋白理论分子质量为107.898 ku,等电点为6.05,该蛋白具有信号肽和2个结构域。PmpH蛋白二级结构主要为无规则卷曲,占比高达50.69%。预测该蛋白含有34条线性B细胞表位,其中氨基酸数大于7的有26个。[结论]克隆得到沙眼衣原体PmpH基因,预测PmpH蛋白分子量为107.898 ku,二级结构主要为无规则卷曲,含有34条线性B细胞表位(大于7个氨基酸的有26个)。 常月立 王威 孙克 石岩丽 李小俊 张存辉 张玉妥关键词:沙眼衣原体 克隆 生物信息学分析 B细胞抗原表位 一种枯草芽孢杆菌及其应用 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌(Bacillius subtilis)菌株,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)的菌种保藏编号为CGMCCNo.1982。该菌株制成的干粉菌剂可用于防治由小麦赤霉病菌... 王立安 成丽霞 李小俊 彭兵 贾宇临床微生物学与检验实验教学的探索与实践 2014年 河北北方学院微生物教研室一直致力于临床微生物学与检验的实验教学改革,在实验教学改革方面迈出了较大的步伐,采取了建立完善实验教学管理体制、优化实验教学内容、改进教学手段等措施。为进一步实验教学改革,提供一定的参考价值。 韩小艳 张玉妥 王晨红 杨新玲 李小俊关键词:临床微生物学与检验 实验教学