朱鸿飞
- 作品数:175 被引量:436H指数:11
- 供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 重组大肠杆菌碱裂解方法的改进被引量:3
- 2007年
- 为了降低质粒DNA的生产成本,对经典碱裂解法中的溶液III进行了改进,以表达溶菌酶基因的pcDNKLYZ重组质粒转化的大肠杆菌DH5α为指示菌,用标准碱裂解和改进碱裂解法提取质粒pcDNKLYZ,以提取的质粒产量和质量为指标,判断优化碱性裂解法的性价比,结果显示,用改进后的碱裂解法裂解重组菌,提取的pcDNKLYZ质粒产量和质量等指标与标准方法接近,而成本仅为标准方法的1/4,可用于重组质粒的大规模制备。
- 张泉朱鸿飞于可响薛方明孙怀昌
- 关键词:重组大肠杆菌碱裂解法
- 一种牛结核病检疫注射装置
- 本实用新型公开了一种牛结核病检疫注射装置,属于兽医设备技术领域,包括针筒,针筒内活动插接有活塞,活塞的右端固定连接有推杆,推杆的右端固定连接有把手,针筒的左端螺纹连接有第二螺纹环,第二螺纹环的左端固定连接有连接头,连接头...
- 鑫婷贾红袁维峰朱鸿飞郭晓宇侯绍华姜一曈
- 文献传递
- 细粒棘球蚴EG95s重组蛋白免疫原性分析
- 目的:分析EG95s重组蛋白的免疫原性。方法:本研究分别诱导表达含有1、2、3拷贝EG95s的pET-1EG95s、pET-2EG95S和pET-3EG95s重组质粒,并用Hi S亲和纯化HIS-lEG95 S、HIS-...
- 贾红袁维峰侯绍华郭晓宇马世春朱鸿飞
- 关键词:基因工程疫苗细粒棘球蚴重组蛋白免疫原性哺乳动物
- 一种免疫佐剂标准品制备用装置
- 本实用新型公开一种免疫佐剂标准品制备用装置,包括:箱体,箱体顶端设置有箱盖,箱盖的一侧与箱体铰接,箱体一侧外壁固接有控制面板;震荡机构,震荡机构包括支撑板、限位滑动部和往复驱动部,箱体一相对内壁均固接有限位滑动部,支撑板...
- 吉日木图贾红朱鸿飞庞忠宝姜一曈袁维峰黄颖翟文竹何宇恒蒋思文李鸿洋
- 牛结核病诊断标志物及其应用
- 本发明提供了牛结核病诊断标志物及其应用,本发明利用非靶向蛋白质组学技术筛选、靶向蛋白质组学技术验证获得了能够区分牛结核病阴、阳性的标志物,其为IL‑8、CRP。本发明提供的牛结核病诊断标志物能够鉴别待检牛是否为牛结核病阴...
- 鑫婷贾红高新桃郭晓宇姜一曈朱鸿飞侯绍华林伟东
- 文献传递
- 区分牛病原性和非病原性分枝杆菌感染的试剂盒及方法
- 本发明属于免疫检测领域。本发明涉及用于区分牛病原性与非病原性分枝杆菌感染的检测试剂和方法。所述检测试剂包括作为特异性刺激原的重组融合蛋白rE6-M63-H70,该重组融合蛋白能够有效刺激体外培养的致敏外周血淋巴细胞高水平...
- 朱鸿飞侯绍华郝辉贾红张泉毛开荣
- 文献传递
- 一种牛结核病检测用多层试剂盒
- 本实用新型公开了一种牛结核病检测用多层试剂盒,属于试剂盒技术领域,包括盒体,所述盒体的侧壁安装有限位环,所述限位环的内部安装有横杆,所述横杆上套接有移动板,所述移动板的上端连接有连板,所述连板的上端连接有承托板,所述承托...
- 鑫婷贾红袁维峰朱鸿飞郭晓宇侯绍华姜一曈
- 文献传递
- 牛分枝杆菌重组蛋白TB27.4的表达、纯化及活性鉴定
- 2014年
- 为探索TB27.4蛋白在牛结核病鉴别诊断中的作用,本试验以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增tb27.4全长基因片段,将其定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-TB27.4,优化原核表达条件,并用AKTA Purifier对蛋白的纯化条件进行优化。SDS-PAGE结果显示重组蛋白为可溶性表达,且大小与理论值相符,用牛分枝杆菌阳性血清进行Western blotting检测有特异性条带,且可特异性地刺激牛分枝杆菌感染牛外周血淋巴细胞释放大量IFN-γ。结果表明,重组蛋白TB27.4具有良好的B细胞活性和T细胞刺激活性,为进一步研究其在牛结核病诊断中的作用奠定了基础。
- 高新桃李平俊鑫婷贾红郭晓宇张改梅李明刘淑清朱鸿飞许雷
- 关键词:牛分枝杆菌纯化活性鉴定
- 犬瘟热病毒截短P蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
- 2013年
- 为制备针对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)P1蛋白的单克隆抗体(McAb),本研究利用重组犬瘟热病毒P1蛋白免疫BALB/c小鼠,并将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,用CDV包被ELISA板,通过间接ELISA法筛选出两株稳定分泌抗CDV-P1的杂交瘤细胞株(E9E4C10、E9F8D9)。间接ELISA检测腹水效价均为1∶106,亚类鉴定结果均为IgG2b。Western blotting和间接免疫荧光(IFA)分析结果表明,两株单克隆抗体均能与重组P1蛋白和CDV发生反应;ELISA叠加试验增殖结果表明,两株单克隆抗体识别的抗原表位不同。本研究制备的特异性抗CDV-P1的单克隆抗体为建立CDV免疫学检测方法和P蛋白的功能研究奠定了基础。
- 袁维峰贾红于萍萍侯绍华郭晓宇史利军赵占中朱鸿飞
- 关键词:犬瘟热病毒单克隆抗体
- 非洲猪瘟病毒感染后猪外周血淋巴细胞Toll样受体信号通路的lncRNA-mRNA分析
- 2022年
- 【目的】丰富非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染后猪外周血淋巴细胞长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱,并进一步挖掘影响Toll样受体信号通路的调控网络。【方法】试验动物感染ASFV,于第7天采集外周血并分离得到外周血淋巴细胞,运用Illumina高通量组学测序对外周血淋巴细胞中lncRNA进行测序,原始数据经处理后筛选获得差异表达的lncRNA,并进行靶基因预测,利用生物信息学方法对靶基因进行GO功能和KEGG信号通路富集分析,初步绘制与Toll样受体信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络,并对lncRNA-ENSSSCG00000041959在内的4个lncRNAs进行实时荧光定量RT-PCR验证。【结果】共筛选到73个差异表达的lncRNAs,其中上调表达lncRNAs 38个,下调表达lncRNAs 35个。GO功能分析结果显示,靶基因显著富集在调节免疫系统过程、防御反应、生物刺激、病毒反应和先天性免疫;KEGG信号通路富集分析显示,大部分靶基因与细胞循环、疾病及免疫应答有关,其中免疫相关信号通路有Toll样受体信号通路、TNF信号通路、产生IgA的肠道免疫网络等。进一步挖掘出lncRNA-ENSSSCG00000041959-RIPK1和lncRNA-ENSSSCG00000041959-IRAK1可能是影响Toll样受体信号通路的重要调控网络,实时荧光定量RT-PCR与测序结果一致。【结论】本研究初步鉴定出lncRNA-ENSSSCG00000041959-RIPK1和lncRNA-ENSSSCG00000041959-IRAK1可能是影响Toll样受体信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,为进一步探索lncRNA调控ASFV感染机体免疫反应奠定了理论基础。
- 陈世钰崔帅蒋亚君鑫婷王洋郝玉欣黄建新郭晓宇朱鸿飞吴佳俊贾红
- 关键词:TOLL样受体信号通路